水產(chǎn)動物育種學(xué)第七章細胞融合與核移植-wenkub
2023-05-28 02:34:08 本頁面
【正文】 986年 日本學(xué)者使用 PEG誘導(dǎo)細胞融合虹鱒三倍體，后發(fā)現(xiàn)高鈣高 PH可提高誘導(dǎo)效果。（面包、葡萄酒等） ?植物育種 ： 1972，粉藍煙草和郎氏煙草原生質(zhì)體融合。被激活的 B細胞增殖產(chǎn)生可合成抗體的后代，稱之為克隆。 ?選擇培養(yǎng)基篩選： 利用雜種細胞特有的生化途徑，使用選擇培養(yǎng)基進行篩選。 ? 面接觸 病毒 /PEG等使細胞進入面接觸狀態(tài)。 ?電融合 ： 利用電場使細胞排列成串，并緊密接觸；再使用電脈沖使細胞接觸部分發(fā)生細胞膜融合。 ?1957年發(fā)現(xiàn)仙臺病毒在體內(nèi)和體外均引起歐利希氏腹水癌細胞的融合。 ?細胞融合 －－ 在自發(fā)或人工誘導(dǎo)下，兩個不同基因型的細胞或原生質(zhì)體融合形成一個 雜種細胞的現(xiàn)象。包括： 異種細胞，融合成雜種細胞 （ hybrid cell）。 1960年異種哺乳類動物細胞融合成功 ? 促使細胞融合的制劑稱為融合劑。 ?激光融合 ： 利用激光微束破壞相鄰細胞的接觸區(qū)，從而導(dǎo)致細胞膜的融合。在此階段各個細胞呈斜球形，細胞膜開始發(fā)生融合。脾臟細胞與骨髓瘤細胞融合： DNA合成途徑 （葉酸為輔酶）， 、胸腺嘧啶核苷途徑。多種 B細胞后代的細胞群，稱之為多克隆。目前細胞融合技術(shù)已應(yīng)用于糧油作物的再生植株上。 ?1986年 鄭瑞珍等用 β －丙內(nèi)脂滅活的仙臺病毒促使金魚囊胚細胞融合。囊胚細胞的融合與體細胞一樣，在 37℃,15 － 20分鐘完成融合。 ?由于細胞質(zhì) (線粒體 )中含有少量的遺傳物質(zhì)，故細胞核移植所得的雜種，稱 核質(zhì)雜種 。此后 40年里，魚類核移植的研究主要集中在我國 ，學(xué)者們在種、屬、亞科、科、目間甚至綱間進行了廣泛的細胞核移植研究。 ? 親緣關(guān)系近的魚類較容易獲得成魚，目以上的核移植雜交僅獲得早期的胚胎。一般可采用人工催產(chǎn)的方法得到。 ?供體與受體配合的辦法：可以用超低溫保存供體囊胚細胞；用溫度控制供體受精卵的發(fā)育速度。最常用的方法是用磨尖的不銹鋼鑷子在解剖鏡下剝開卵膜，游離出卵子。 ? ?用極細的玻璃微針挑去核。細胞被吸入管內(nèi)的位置，以剛進行管口一小段距離為宜，以免將它注入卵時帶入過多的培養(yǎng)液。 A grafted oocyte (couplet of a karyoplast and cytoplast) aligned between two microelectrodes. Takeuchi T et al. Hum. Reprod. 1999。在生長優(yōu)勢、蛋白質(zhì)含量上超過雙親，表現(xiàn)出明顯的優(yōu)勢。當(dāng)年魚苗即能養(yǎng)到商品規(guī)格，具有良好的經(jīng)濟效益和生產(chǎn)推廣價值。與其他雜交鯉相比，
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