動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體的制備-wenkub
2023-05-23 09:14:24 本頁(yè)面
【正文】 淋巴細(xì)胞（漿細(xì)胞） 誘導(dǎo)細(xì)胞融合常用方法是什么？ 滅活的仙 臺(tái)病毒 如何進(jìn)行篩選？ 具有篩選作用的培養(yǎng)基（選擇培養(yǎng)基） ？種 BB 、 B瘤 、 瘤瘤 、 雜交細(xì)胞 如何獲得大量的單克隆抗體？ ②免疫 B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的制備 ③細(xì)胞融合 ④雜交瘤細(xì)胞的選擇培養(yǎng) ⑤雜交瘤細(xì)胞的篩選 ⑥分泌單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞系的建立 ⑦單克隆抗體的大量制備 ？ ？ 抗原 效應(yīng) B細(xì)胞 篩選 篩選 （ AA型、 BB型） AB型雜交瘤細(xì)胞 能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞 過程： 抗原 小鼠 效應(yīng) B細(xì)胞 骨髓瘤細(xì)胞 雜交瘤細(xì)胞 細(xì)胞融合、篩選 多孔培養(yǎng)板單個(gè) 細(xì)胞培養(yǎng)，篩選 能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群 體外培養(yǎng) 體內(nèi)培養(yǎng) 提取出單克隆抗體 ，選用哪兩種細(xì)胞進(jìn)行融合？為什么選擇這兩種細(xì)胞？ 漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞 漿細(xì)胞能產(chǎn)生 單一抗體 ，但不能無(wú)限增殖；骨髓瘤細(xì)胞 能無(wú)限增殖 ，但不能產(chǎn)生單一抗體。 １、可用于作為診斷試劑：有準(zhǔn)確，高效，簡(jiǎn)易、快速的優(yōu)點(diǎn) ２、可用于疾病治療 ３、可用于運(yùn)載藥物（作為 運(yùn)載 對(duì)應(yīng)疾病的藥物的 “生物導(dǎo)彈“。 雜交瘤細(xì)胞既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生專一抗體。動(dòng)物在免疫反應(yīng)的過程中，每一種 B淋巴細(xì)胞能分泌一種特異性抗體，要想獲得大量的特異性抗體，必須使能分泌該單一抗體的 B淋巴細(xì)胞大量增殖。僅用兩個(gè)細(xì)胞融合，其效率太低，不一定能得到融合細(xì)胞。我們知道，體內(nèi)產(chǎn)生的特異性抗體種類可多達(dá)百萬(wàn)種以上，但是每一個(gè) B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體，如果僅取一個(gè)脾細(xì)胞（含 B淋巴細(xì)胞）和一個(gè)瘤細(xì)胞雜交，我們不能確定該脾細(xì)胞分泌的抗體是否正是我們所需要的；若用大量的脾細(xì)胞和瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，就可以從融合細(xì)胞中篩選出能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。然后檢測(cè)各孔上清液中細(xì)胞分泌的抗體（常用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法），那些上清液可與特定抗原結(jié)合的培養(yǎng)孔為陽(yáng)性孔。單倍體可以自發(fā)產(chǎn)生，也可以誘發(fā)產(chǎn)生。由于遠(yuǎn)緣雜交，雖然不能受精，但在遠(yuǎn)緣物種的花粉誘導(dǎo)下，卵細(xì)胞可以在未受精情況下發(fā)育成胚，這種情況在馬鈴薯、大麥、小麥、玉米中都可以發(fā)生； （ 2）物理和化學(xué)誘變。目前以油菜小孢子作為轉(zhuǎn)基因受體已得到轉(zhuǎn)基因植株。有些植物可以產(chǎn)生多胚種子，即 2～ 3個(gè)胚共處于一個(gè)種皮中，這樣的種子可以形成單倍體植株； （ 4）花藥或花粉培養(yǎng)。植物上自發(fā)產(chǎn)生單倍體的植物很多，如番茄、棉花、咖啡、甜菜、大麥、小麥、油菜等，共有約
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