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sds-聚丙烯酰胺凝膠-wenkub

2023-05-22 18:13:09 本頁面
 

【正文】 小。SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳 ? 一 .什么是 SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳 ? ? : ? 由丙烯酰胺單體 (Acr)和交聯(lián)劑甲叉雙丙烯酰胺 (Bis) ? 在催化劑過硫酸銨 (AP) 或核黃素 ,以及加速劑四甲基乙 ? 二胺 (TEMED)作用下聚合交聯(lián)而成的三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)凝 ? 膠 . ? 形成的凝膠具有穩(wěn)定的親水性 ,無電離基團 ,不帶電荷 , ? 幾乎無吸附和電滲作用 .凝膠孔徑可控制 . ? *凝膠機械性能和孔徑大小 : ? 由總濃度 T% 控制 . ? 即 100ml凝膠溶液中含有 Acr、 Bis的總克數(shù) . ? T%越大 ,平均孔徑越小 ,機械強度大 . ? 交聯(lián)度 C%: ? Acr和 Bis的比例 . ? 即交聯(lián)劑 Bis占單體 Acr與 Bis總量的百分數(shù) . ? * 分子量范圍 適用的凝膠濃度 (%) 蛋 白 質(zhì) ?104 2030 14 104 1520 15 1041 105 1015 1 105 510 ?5 105 25 核酸 ?104 15–20 104–105 510 1052 106 ? : ? 十二烷基磺硫酸鈉 (sodium dodecyl sulfate,SDS) ? 陰離子去污劑在水溶液中以單體( monomer)和分 ? 子團( micellae)的混合形式存在 . ? 破壞蛋白質(zhì)分子之間以及其他物質(zhì)分子之間的非 ? 共價鍵,使蛋白質(zhì)變性 (denature)而改變原有的構(gòu)象, ? 保證蛋白質(zhì)分子與 SDS充分結(jié)合而形成帶負電荷的蛋 ? 白質(zhì) SDS復合物。 ? 當?shù)鞍踪|(zhì)的分子量在 15KD— 200KD之間時,電泳 ? 遷移率與分子量的對數(shù)呈線性關(guān)系 . ? *不同的蛋白質(zhì)分子有不同的電泳遷移率 mR,自由遷移 ? 率 m0和 阻滯系數(shù) KR值 ? 不同蛋白質(zhì)的 SDS復合物的 m0值都很接近,分子量相 ? 差 5倍的蛋白質(zhì)之間, m0值只相差 10%,如果忽略這個差 ? 別 ,就可以認為,各種蛋白質(zhì) SDS復合物的 m0基本上是 ? 一個定值。 電泳緩沖液的種類:
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