【正文】 代培養(yǎng) ： 也稱初代培養(yǎng)期。 2 基因的直接進(jìn)化：在分子水平上，對(duì)目標(biāo)基因直接處理，然后通過高通量的篩選方法，提高目標(biāo)蛋白的性能。 2固定化酶： 固定在一定載體上并在一定空間范圍發(fā)生催化反應(yīng)的酶。 3. 人工種子 ：即人為制造的種子，它是一種含有植物胚狀體或芽、營養(yǎng)成分、激素以及其它成分的人工膠囊。 二、選擇題 1. 基因工程的實(shí)質(zhì)是（ A ） A. 基因重組 B. 基因突變 C. 產(chǎn)生新的蛋白質(zhì) D. 產(chǎn)生新的基因 2. 植物組織培養(yǎng)是指 （ C ） A. 離體的植物器官或細(xì)胞培育成愈傷組織 B. 愈傷組織培育 成植株 C. 離體的植物器官、組織或細(xì)胞培養(yǎng)成完整植物體 D. 愈傷組織形成高度液泡化組織 3. 植物體細(xì)胞雜交要先去除細(xì)胞壁的原因 是（ C ） A. 植物體細(xì)胞的結(jié)構(gòu)組成中不包括細(xì)胞壁 B. 細(xì)胞壁使原生質(zhì)體失去活力 C. 細(xì)胞壁阻礙了原生質(zhì)體的融合 D. 細(xì)胞壁不是原生質(zhì)的組成部分 4. 植物體細(xì)胞雜交的結(jié)果 是（ A ） A. 產(chǎn)生雜種植株 B. 產(chǎn)生雜種細(xì)胞 C. 原生質(zhì)體融合 D. 形成愈傷組織 5. 科學(xué)家把天竺葵的原生質(zhì)體和香茅草的原生質(zhì)體進(jìn)行誘導(dǎo)融合，培育出的驅(qū)蚊草含有香茅醛 ，能散發(fā)出一種特殊的達(dá)到驅(qū)蚊且對(duì)人體無害的效果。（ √ ） Western 雜交是 DNA— RNA 之間的雜交。（ √ ） 假基因不能合成功能蛋白質(zhì)，是相應(yīng) 的正?；蛲蛔円鸬?。 1檢測外源基因的導(dǎo)入時(shí)， PCR 的準(zhǔn)確性要高于 Southern 雜交的準(zhǔn)確性。（ ） 1在生物技術(shù)的五大工程中，生化工程是核心技術(shù)，它能帶動(dòng)其他技術(shù)的發(fā)展。（√） Western 雜交可以檢 測外源 DNA 的導(dǎo)入與否。（ √ ） 2 現(xiàn)代生物技術(shù)是所有自然科學(xué)領(lǐng)域中涵蓋范圍最廣的學(xué)科之一。（ ） 3克隆子就是重組子。（ √） 3酶是具有生物催化特性的特殊蛋白質(zhì)。 （ √ ） 4培養(yǎng)基中的碳源，其唯一作用是能夠向細(xì)胞提供碳素化合物的營養(yǎng)物質(zhì)。 （ ╳ ） 4 α －淀粉酶在一定條件下可使淀粉液化，但不稱為糊精化酶。 (√ ) 5 包埋法可以用于酶、細(xì)胞和原生質(zhì)體的固定化。 2. PCR 包括三個(gè)步驟 _變性 ， 退火 ， 延伸 。 7. 現(xiàn)代生物技術(shù)是以 20 世紀(jì) 70 年代 DNA 重組 技術(shù)的建立為標(biāo)志。 11. 基因工程操作流程主要包括 目的基因分離 、 與克隆載體重組 、 轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞 、篩選和鑒定克隆子 。 14. 酶分子修飾的主要目的是改進(jìn)酶的性能 ，即提高酶的 活力 、減少 抗原性 ，增加 穩(wěn)定性 。 18. 細(xì)胞工程包括 植物細(xì)胞的體外培養(yǎng)技術(shù) 、 細(xì)胞融合技術(shù) 、 細(xì)胞器移植技術(shù) 、克隆技術(shù) 、 干細(xì)胞技術(shù) 。 22. 細(xì)胞融合技術(shù)的主要過程主要包括（ 制備原生質(zhì)體 ）、（ 誘導(dǎo)細(xì)胞融合 ）、（ 篩選雜合細(xì)胞 ）三個(gè)步驟。 26. 液體深層發(fā)酵是近年來發(fā)展起來的先進(jìn)發(fā)酵技術(shù)，與其它發(fā)酵方法相比，它的優(yōu)點(diǎn)主要包括（ 液體懸浮狀態(tài)有利微生物生長 ）、（ 在液體中菌體及營養(yǎng)物、產(chǎn)物易于擴(kuò)散，使發(fā)酵可在均質(zhì)條件下進(jìn)行，便于控制易進(jìn)行自動(dòng)化控制 ）、（ 液體輸送方便，易于機(jī)械化操作 ）、（ 占地小，易進(jìn)行自動(dòng)化控制 ）、（ 產(chǎn)品易于提取、精制 ）等 5 個(gè)方面。 30. 固定化酶的主要缺點(diǎn)是（ 酶易失活 ）。 34. 工業(yè)發(fā)酵按微生物對(duì)氧的不同需求可分為按培養(yǎng)基的物理性狀可分為（ 固體發(fā)酵 ）、（ 液體發(fā)酵 ）；按發(fā)酵菌的種類可分為（ 好氧發(fā)酵 ）及（ 厭氧發(fā) 酵 ）兩種發(fā)酵形式。 38. 干細(xì)胞的研究主要包括（ 獲得干細(xì)胞系 ）、（ 建立誘導(dǎo)分化模型 ）、（ 植入受體器官 ）三個(gè)階段，應(yīng)用干細(xì)胞治療疾病與傳統(tǒng)治療方法相比具有（低毒性）、（ 不需要了解發(fā)病機(jī) 制）、（ 可避免免疫排 斥 ）三方面的優(yōu)點(diǎn)。 （ 2）具有抗菌素抗性基因。 （ 2）基因是可切割的 （ 3）基因是可以轉(zhuǎn)移的 （ 4）多肽與基因之間存在對(duì)應(yīng)關(guān)系 （ 5）遺傳密碼是通用的 （ 6）基因可以通過復(fù)制把遺傳信息傳遞給下一代 分離目的基因的途徑有哪些？ （ 1）酶切法 （ 2） PCR 法 （ 3）化學(xué)合成法 （ 4）基因組或 cDNA 文庫法 談?wù)勀銓?duì)轉(zhuǎn)基因食品的看法。 （ 4）提高肉、奶和畜類產(chǎn)品的數(shù)量和質(zhì)量。一種食品會(huì)不會(huì)造成中毒主要是看它在人體內(nèi)有沒有受體和能不能被代謝掉，轉(zhuǎn)化的基因是經(jīng)過篩選的、作用明確的，所以轉(zhuǎn)基因成分不會(huì)在人體內(nèi)積累，也就不會(huì)有害。 （ 3）從 mRNA 合成 cDNA：采用一定的方法釣取特定基因的 mRNA，再通過逆轉(zhuǎn)錄酶催化合成其互補(bǔ) DNA（ cDNA），除去 RNA 鏈后，再用 DNA 聚合酶合成其互補(bǔ)DNA 鏈，從而得到雙鏈 DNA。 cDNA 文庫和基因組文庫的主要差別有哪些？ （ 1）基因組文庫克隆的是任何基因，包括未知功能的 DNA 序列； cDNA 文庫克隆的是具有蛋白質(zhì)產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)基因，包括調(diào)節(jié)基因。 （ 1）具有新穎性 （ 2）具有創(chuàng)造性 （ 3）具有應(yīng)用價(jià)值 （ 4）在申請(qǐng)專利說明書對(duì)發(fā)明做詳盡的描述，使在同一領(lǐng)域的其他人能夠了解執(zhí)行。 1工業(yè)化菌種的要求？ (1)原料廉價(jià)、生長迅速、繁殖能力強(qiáng)、目的產(chǎn)物產(chǎn)量高。 (5) 菌種遺傳性穩(wěn)定，不易變異和退化 (6)不產(chǎn)生任何有害的生物活性物質(zhì)和毒素，保證安全生產(chǎn)。還有在四環(huán)素發(fā)酵中加入硫氰化芐，菌體呼吸強(qiáng)，糖代謝快，而抗生素合成受阻，所以降低菌體呼吸，產(chǎn)量就會(huì)提高。、突變基因堿基序列的確定對(duì)于核酸類酶，根據(jù)欲獲得的酶 RNA 的核苷酸排列次序，依照互補(bǔ)原則，確定其對(duì)應(yīng)的突變基因上的堿基序列，確定需要置換的堿基及其位置。定點(diǎn)突變技術(shù)在酶分子修飾中試一種行之有效的常用方法，定點(diǎn)突變技術(shù)為氨基酸置換修飾和核苷酸置換修飾提供了先進(jìn)、可靠的手段。固定化酶的最適作用溫度一般與游離酶差不多，活化能也變化不大，但也有些固定化酶的最適溫度與游離酶比較會(huì)有較明顯的變化。而對(duì)于那些可作用于大分子底物，又可作用于小分子底物的酶而言，固定化酶的底物特異性往往會(huì)發(fā)生變化。固定化酶具有穩(wěn)定性較好，可以反復(fù)或連續(xù)使用的特點(diǎn)，應(yīng)用固定化酶進(jìn)行催化反應(yīng)，可以選擇填充床式反應(yīng)器、流化床式反應(yīng)器、鼓泡式反應(yīng)器、膜反應(yīng)器、攪拌器式反應(yīng)器等。 1簡述現(xiàn)代生物技術(shù)在人類生產(chǎn)生活中的作用 （ 1）改善農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、解決食品短缺 ①提高農(nóng)作物產(chǎn)量及其品質(zhì)（培育抗逆的作物優(yōu)良品系、植物種苗的工廠化生產(chǎn) 、提高糧食品質(zhì)、生物固氮，減少化肥使用量 、生物農(nóng)藥，生產(chǎn)綠色食品 ） ② 發(fā)展畜牧業(yè)生產(chǎn)（動(dòng)物的大量快速無性繁殖 、培育動(dòng)物的優(yōu)良品系 ） （ 2）食品生產(chǎn)、食品加工、食品檢測 （ 3）提高生命質(zhì)量、延長人類壽命（開發(fā)制造奇特而又貴重的 新型藥品 、疾病的預(yù)防和診斷、基因治療 ） （ 4）解決能源危機(jī)、治理環(huán)境污染（解決能源危機(jī) 、環(huán)境保護(hù) ） （ 5）制造工業(yè)原料、生產(chǎn)貴重金屬 （制造工業(yè)原料 、生產(chǎn)貴重金屬 ） 20. PCR 的基本步驟及特點(diǎn)分別是什么？ 標(biāo)準(zhǔn)的 PCR 過程分為三步： 變性（ 90℃ 96℃）：雙鏈 DNA 模板在熱作用下， 氫鍵斷裂，形成單鏈 DNA （ 25℃ 65℃）：系統(tǒng)溫度降低，引物與 DNA 模板結(jié)合，形成局部雙鏈。 23. pH 對(duì)發(fā)酵過程的影響及發(fā)酵過程中影響 pH 值的主要因素有哪些？ （ 1） pH 影響酶的活性。 （ 5） pH 對(duì)氧的溶解、氧化還原電位、營養(yǎng)物的物理狀態(tài)等都有影響。 技術(shù)流程：（ 1）抗原制備； （ 2）免疫動(dòng)物； （ 3）免疫脾細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的制備； （ 4）細(xì)胞融合； （ 5）雜交瘤細(xì)胞的選擇培養(yǎng)； （ 6）雜交瘤細(xì)胞的篩選； （ 7）雜交瘤細(xì)胞的克隆化； （ 8）單克隆抗體的檢定； （ 9）分泌單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞系的建立； （ 10）單克隆抗體的大量制備。（ 3）有一段多克隆位點(diǎn)。 26. 舉例說明生物技術(shù)在作物育種方面的應(yīng)用及原理。 動(dòng)物細(xì)胞融合的主要途徑有哪些？各有何特點(diǎn)？ 體細(xì)胞雜交和原生質(zhì)體融合有哪些類型？其產(chǎn)物和再生個(gè)體有何特點(diǎn)？ 1 細(xì)胞的固定化方法有哪些？各有何特點(diǎn)？ 1 為什么要進(jìn)行酶的修飾？ 1 闡述外源基因?qū)胧荏w細(xì)胞的各種途徑？ 1 考斯質(zhì)粒的定義及基本特征是什么？ 1 簡述胚胎干細(xì)胞與成體干 細(xì)胞的優(yōu)缺點(diǎn)。（ 3）包埋劑及人工種皮，目前仍沒有好的解決辦法，目前最常用的是褐藻酸鈉。 （ 5）容易從宿主細(xì)胞中分離純化。（ 4 分） 載體的基本要求：（ 1）具有對(duì)受體細(xì)胞的可轉(zhuǎn)移性，并在宿主細(xì)胞 內(nèi)能獨(dú)立復(fù)制。而實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)骨髓瘤細(xì)胞可在體外生長繁殖，應(yīng)用細(xì)胞雜交技術(shù)使骨髓瘤細(xì)胞與免疫的淋巴細(xì)胞二者合二為一，得到雜種的骨髓瘤細(xì)胞。 （ 3） pH 影響微生物細(xì)胞膜所帶電荷狀態(tài)，從而改變細(xì)胞膜 的滲透性，影響微生物對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的吸收和代謝產(chǎn)物的排泄。 PCR 的特點(diǎn)：（ 1）特