西北農(nóng)林科技大學(xué)分子生物學(xué)-wenkub
2023-04-19 23:51:28 本頁面
【正文】 在中期染色體中壓縮 10，000 倍。構(gòu)建cDNA 文庫。 (有意義鏈)：與mRNA序列相同的那條DNA鏈。進行持續(xù)穩(wěn)定的繁殖和表達。 C 值反常：真核細胞基因組的最大特點是它含有大量的重復(fù)序列，而且功能DNA 序列大多被不編碼蛋白的DNA 所隔開。 基因組：對一般二倍體高等生物而言，能維持配子或配子體正常功能的最低數(shù)目的一套染色體DNA，構(gòu)成一個基因組?；蚪M中包含一整套基因。這就是C 值反?，F(xiàn)象 DNA 的轉(zhuǎn)座：是由可移位因子介導(dǎo)的遺傳物質(zhì)重排現(xiàn)象。 分子克隆的載體（vector）：具有自主復(fù)制能力的DNA 分子。（指不作模板的DNA單鏈） 模板鏈(反義鏈)：另一條根據(jù)堿基互補原則指導(dǎo)mRNA合成的 DNA鏈。 2. 一個生物體內(nèi)能產(chǎn)生百萬種以上的 Ig 分子，是源自于相應(yīng)數(shù)目的基因。 2．蛋白質(zhì)合成時 UAA 、 UGA 和 UAG 三個暗碼通常不代表任何氨基酸，它們代表 終止密碼子 。整個反應(yīng)包括 DNA 解鏈（變性） 、引物與模板結(jié)合（退火） 、 DNA 合成（延伸） 三步，此三步可以被不斷重復(fù)。 12. 原位雜交 是用標記的核酸探針，經(jīng)放射自顯影或非放射檢測體系，在組織、細胞、間期核及染色體上對核酸進行定位和相對定量研究的一種手段。通常采用 雙向電泳 方法將蛋白質(zhì)分離, 然后采用 質(zhì)譜 技術(shù)進行鑒定. 1受體酪氨酸激酶： [A、E] A、有一個胞質(zhì)激酶區(qū)；B、其配體一般是甾類物質(zhì)； C、配體結(jié)合后不發(fā)生二聚化D、配體結(jié)合胞質(zhì)區(qū)使受體構(gòu)型發(fā)生改變；E、能夠發(fā)生自磷酸化而激活。 D、有時可能通過野生型 Ras 蛋白的過量表達而引起腫瘤發(fā)生； E、不能介導(dǎo)信號通路。后隨鏈是以大量的獨立的片段的形式（岡崎片段）合成的。 3. 解釋什么是“套索結(jié)構(gòu)”，在內(nèi)含子套索中的磷酸二酯鍵有什么特別之處？ （5 分） 當RNA 分子的一端自身回折成環(huán)并與其自身的核苷酸形成共價結(jié)合時，便形成了一個套索結(jié)構(gòu)。 4. 列表說明原核生物與真核生物轉(zhuǎn)錄的差異。 2各種不同啟動子間的差異很大。 4．有增強子。 6．聚合酶III 的啟動子位于被轉(zhuǎn)錄的序列之中。（5 分） 原核細胞與真核細胞翻譯起始的主要區(qū)別是來自mRNA 的本質(zhì)差異以及小亞基與mRNA 起始密碼子上游區(qū)結(jié)合的能力。一旦結(jié)合，SIC 開始向mRNA 下游區(qū)搜索，直到找到第一個AUG 密碼子。因為內(nèi)含子兩端剪接點的識別是根據(jù)起始點是雙核苷酸GT，結(jié)束點是AG來確定的，所以剪接點的這種特征又稱為GTAG規(guī)則(Rule) (實際上RNA 中的序列是GUAG)。 ? 模板識別：RNA聚合酶與啟動子DNA作用并與之結(jié)合。 ：大腸桿菌的RNA聚合酶：全酶由5種亞基2個α、β、β’、σ組成，σ因子與其它部分的結(jié)合不是十分緊密，它易于與β’、β、2個α分離，沒有σ的酶稱為核心酶——只催化鏈的延長，對起始無作用。 σ亞基：識別起始位點。RNA鏈合成達8~9個堿基時，σ因子釋放，離開核心酶，由后者負責延伸。 ？ ρ因子是E. coli 的一種基本蛋白質(zhì)，只在終止階段發(fā)揮作用。RNA編輯的另一種形式是尿苷酸的缺失和添加。 第四章 原核基因表達調(diào)控模式 ：隨著生物個體的發(fā)育，DNA分子能有序地將其所承載的遺傳信息，通過密碼子反密碼子系統(tǒng)轉(zhuǎn)變成蛋白質(zhì)，執(zhí)行各種生理生化功能。這種識別的結(jié)果是根據(jù)調(diào)控蛋白的類型決定的，激活 或阻遏基因的表達。其中主要是起正性調(diào)控作用的順式作用元件，包括啟動子、增強子、近年又發(fā)現(xiàn)起負性調(diào)控作用的元件靜止子。 ? 根據(jù)對突變的影響來區(qū)分結(jié)構(gòu)基因和調(diào)控基因。 ? lacZYA 基因（乳糖結(jié)構(gòu)基因）的轉(zhuǎn)錄受lacI 基因（乳糖調(diào)控基因）指導(dǎo)合成的調(diào)控蛋白控制。 ? 調(diào)控基因：是編碼能與操縱序列結(jié)合的調(diào)控蛋白的基因。 ：一類能增強真核生物啟動子功能的順式作用元件（DNA序列）。 D、其增強效應(yīng)有嚴密的組織和細胞特異性。 （去甲基化的CpG島對轉(zhuǎn)錄起始是必需的） 原核生物 真核生物操縱元調(diào)控 多樣化調(diào)控，更為復(fù)雜基因組小，大腸桿菌：106bp, 編碼4288個基因, 每個基因約1100bp 基因組大，人類基因組全長3109bp，編碼10萬個基因，其余為重復(fù)序列 基因分布在同一染色體上，操縱元控制DNA與組蛋白結(jié)合成染色質(zhì)，染色質(zhì)的變化調(diào)控基因表達；基因分布在不同的染色體上，存在不同染色體間基因的調(diào)控問題適應(yīng)外界環(huán)境，操縱元調(diào)控表達基因差別表達是細胞分化和功能的核心 轉(zhuǎn)錄和翻譯同時進行，大部分為轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控轉(zhuǎn)錄和翻譯在時間和空間上均不同，從DNA到蛋白質(zhì)的各層次上都有調(diào)控，但多數(shù)為轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控 與原核生物比較它具有一些明顯的特點： (一)真核基因表達調(diào)控的環(huán)節(jié)更多 (二)真核基因的轉(zhuǎn)錄與染色質(zhì)的結(jié)構(gòu)變化相關(guān) 。 。 小分子物質(zhì)的跨膜轉(zhuǎn)運主要有簡單擴散、易化擴散、主動運輸三種方式。 膜受體的生物學(xué)特性是特異性、高親和性、可飽和性、可逆性。該途徑有刺激和抑制，但兩途徑的效應(yīng)器均為 受體 主動運輸：載體蛋白利用代謝能，逆濃度梯度轉(zhuǎn)運小分子物質(zhì)過膜的過程。 受體介導(dǎo)的胞吞作用：在細胞膜的有被小窩上，特定受體與相應(yīng)大分子物質(zhì)結(jié)合，引發(fā)形成有被小泡而實現(xiàn)選擇性快速吞入某物質(zhì)的過程。 ２、細胞膜的分子結(jié)構(gòu)特點是什么？ 1）脂雙分子層構(gòu)成膜的連續(xù)主體； 2）膜蛋白以鑲嵌和附著的方式存在脂雙層上； 3）具有流動性； 4）膜物質(zhì)呈不對稱分布。載體蛋白通過與被轉(zhuǎn)運物質(zhì)結(jié)合、變構(gòu)，使物質(zhì)轉(zhuǎn)運過膜，其轉(zhuǎn)運過程有的是耗能的
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