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普通動物學實驗指導(全卷)-wenkub

2023-04-10 01:12:49 本頁面
 

【正文】 些的效果較好)。圖 25復層扁平上皮剖面圖 變移上皮:取膀胱切片觀察。細胞的游離面具有纖毛,在細胞間還看到單細胞腺的分布。注意觀察該層上皮內的杯狀細胞(呈大的空泡狀)。圖 22 單層立方上皮剖面圖 單層柱狀上皮:用小腸橫切片觀察。蛙皮膚的表皮,最外層是扁平細胞層;細胞扁平,呈不規(guī)則多邊形;核大,明顯,在細胞中央。二、實驗目的通過實驗,進一步了解上皮組織和肌肉組織的形態(tài)結構特征,為今后學習動物形態(tài)學、組織學和動物生理學打下基礎。4. 末期:染色體到達兩極后,先形成螺旋狀的染色質絲,然后變?yōu)轭w粒狀,最后恢復到原來的狀態(tài),同時,兩新細胞核漸次形成,核仁核膜出現。2. 中期:染色體聚集在紡錘體的中央,排成一平面與紡錘絲的縱軸垂直,稱赤道板。 (三)細胞分裂取馬蛔蟲子宮切片觀察細胞的有絲分裂各期(請注意馬蛔蟲卵呈圓形,外周無色透明很厚的部分是卵殼,中央顏色很深的部分才是卵細胞)。3. 細胞核:在細胞的中央,呈圓形。(二)口腔上皮細胞裝片的制作和觀察取一張清潔的載玻片,用吸管滴一小滴生理食鹽水在載玻片中央;取消毒牙簽在自己口腔頰部內壁,刮取少許粘膜(自色碎片),涂在載片上的生理鹽水中,并使其均勻分布;加上蓋玻片(一側接觸標本傾斜蓋上)。 復原顯微鏡顯微鏡使用完畢,降下鏡臺至原處,轉動鏡頭轉換器,使物鏡鏡頭轉離鏡臺孔,取下已觀察的玻片標本。然后從目鏡中觀察,用粗調節(jié)器極其緩慢地向下調節(jié)至出現物像為止(注意切勿反向轉動粗調節(jié)器,以免油鏡頭與載玻片相碰而損壞了鏡頭及玻片),再用細調節(jié)器調至物像清晰,此時還應適當增加光亮度。在高倍鏡下,將玻片中的被檢物按從前到后、從左到右的順序移動、觀察,再由低倍鏡轉高倍鏡反復觀察幾次,以熟練高倍鏡的使用。如果觀察的目標不在視野中央,可調節(jié)標本移動器,使之恰好位于視野中央(請思考玻片移動方向與物像移動方向的關系如何?若光線不適,可撥動虹彩光圈的調節(jié)桿,調節(jié)光線至適宜)。 調焦光線調好后,將玻片標本放在鏡臺上標本移動器的卡槽內,并用標本移動器上的壓片夾卡緊,有蓋玻片的一面朝上,旋轉標本移動器調節(jié)螺旋將被檢材料移至鏡臺孔下的聚光器透鏡中央,然后調焦。配置內置式電光源的顯微鏡可直接打開電源開關,并調節(jié)光量,使視野內的亮度達到明暗適宜。2. 顯微鏡的使用方法 安放顯微鏡打開鏡箱(或鏡柜),右手緊握鏡臂,左手平托鏡座,將顯微鏡輕放桌上距離桌子邊緣幾厘米處,讓目鏡對著觀察者。上下移動聚光器側面的調節(jié)桿(或旋轉旋鈕),可升高或降低聚光器的高度,調節(jié)聚光效果。平面鏡反光較弱,用于光線較強的情況;凹面鏡反光較強,用于光線較弱的情況。一般有幾種倍數不同的目鏡可供選配,分別標有等放大倍數(請思考如何計算顯微鏡的放大倍數?)。NA ——物鏡的數值孔徑例如:,可見光波長范圍為400—700nm ,取其平均波長550 nm,則d=270 nm,約等于照明光線波長一半。顯微鏡的分辨距離越小,即表示它的分辨力越高,也就是表示它的性能越好。物鏡的作用是將標本作第一次放大,它是決定顯微鏡性能的最重要的部件——分辨力的高低。③ 工作距離是指當所觀察的標本最清楚時物鏡的前端透鏡下面到標本的蓋玻片上面的距離。例:放大倍數為100,指的是長度是1μm的標本,放大后像的長度是100μm,要是以面積計算,則放大了10,000倍。每臺昱顯微鏡均備有幾個倍數不同的物鏡,放大40以下的為低倍鏡,一般有10;放大40及以上的為高倍鏡,放大100的一般為油鏡。粗調節(jié)器螺旋中央直徑較小的螺旋是細調節(jié)器,旋轉它時鏡臺升降距離較小,能精確地對焦,獲得更清晰的物像,主要在高倍鏡觀察時調節(jié)焦距。圖 11 標準光學顯微鏡構造圖d.鏡頭轉換器鏡頭轉換器是鏡筒下端1個可旋轉的圓盤,其上裝有數個不同放大倍數的物鏡鏡頭,轉動轉換器可換用不同倍數的物鏡。 c.鏡臺與標本移動器鏡臺亦稱載物臺,是放置玻片標本的平臺。鏡臂的頂端安裝有鏡筒和鏡頭轉換器。 機械系統機械系統主要對光學系紡和光源系統起支持和調節(jié)作用。在高倍鏡下只能用細調焦點,不能用粗調焦器。做顯微照相時,還必須調中心(即調聚光器中心)。對顯微鏡的了解和熟練使用,是作為一個生命科學研究者應具各的最基本的技能之一。四、實驗操作及觀察:(一)顯微鏡的基本構造與使用方法利用顯微鏡對生物體的結構進行觀察和研究,標志著對生命的研究從宏觀領域進入到微觀領域。制作口腔上皮細胞裝片并進行染色觀察。線條要均勻一致,不要有接痕。(4)繪圖時先把標本放在一個適宜的位置,能展現出圖中要求表示的各個部分。4. 繪圖注意事項(1)生物繪圖以科學性為主,首先從理論上對所繪標本有一定了解,認真觀察標本,掌握其各種特征,再嚴謹繪圖。觀察若不精確,繪圖不可能精確。(4)嚴格按照實驗指導進行工作:除明確目的,注意實驗提示外,需認真按實驗操作要求一步步進行觀察、解剖,包括示范標本的觀察及小實驗等。3. 學生如何進行實驗(1)每次實驗前應仔細閱讀實驗指導及教科書的有關章節(jié),明確實驗目的、內容和操作步驟。(4)每次的實驗報告應在教師指定時間內完成。2. 實驗課的要求(1)學生應按規(guī)定時間進入實驗室。保持實驗室的安靜,不得進行與實驗無關的活動。(5)實驗結束,在離開實驗室前,應清理好自己的實驗桌,要輪流打掃實驗室,保持實驗室的整潔衛(wèi)生。把必需的實驗用品準備好,并帶到實驗室。總的實驗目的之一,在于培養(yǎng)學生的獨立工作能力,因此每位學生在實驗中著重鍛煉自己獨立操作、獨立思考,培養(yǎng)創(chuàng)新意識。繪圖是生物實驗中一項重要的工作,也是基本技術之一,每位學生應認真對待。(2)只在紙的一面繪圖,鉛筆應經常保持尖銳,制面力求整潔。先測量或估量一下標本的大小、長寬比例,確定應放大或縮小的倍數,在開始繪圖。以點點表示標本上的凹凸、深淺、層次、結構的立體感等,要將筆垂直于圖紙繪成圓點。觀察細胞的基本結構和細胞的分裂。隨著個類對生物體結構和生命現象認識的不斷深入,人們對生命本質的微觀世界進行探索的動力也越來越高。實驗提示必須按實驗指導了解顯微鏡的各部分結構、性能及使用方法。使用高倍鏡時,一定要從低倍鏡開始。要開大光闌。它包括:a. 鏡座與鏡柱鏡座是顯微鏡底部的承重部分,可降低顯微鏡重心,使之不易傾倒。鏡筒是安裝在鏡臂頂端的2個圓筒,其內安裝有目鏡鏡頭。鏡臺中央有1個圓孔,稱鏡臺孔,來自下方聚光器的光線可由此通過進入物鏡,觀察玻片標本之前,應將欲觀察的目標移至鏡臺孔處聚光器透鏡的中央。e.焦距調節(jié)器位于鏡柱的左右兩側,有粗、細兩個螺旋調節(jié)器,旋轉它們能使鏡臺升降,以調節(jié)物鏡和鏡臺上所觀察標本之間的距離,獲得清晰的圖像。 光學系統光學系統即成像系統,由目鏡和物鏡構成。物鏡主要參數包括:放大倍數、數值孔徑和工作距離。顯微鏡的總放大倍數等于物鏡和目鏡放大倍數的乘積。物鏡的工作距離與物鏡的焦距有關,物鏡的焦距越長,放大倍數越低,其工作距離越長。分辨力也叫分辨率或分辨本領。顯微鏡的分辨力的大小由物鏡的分辨力來決定的,而物鏡的分辨力又是由它的數值孔徑和照明光線的波長決定的。一般地。 光源系統光源系統由光源、聚光器和虹彩光圈構成。反光鏡的方向可以任意轉動調節(jié),以選擇適合的角度收集來自不同方向的光線。c.虹彩光圈虹彩光圈也稱可變光闌。. 檢查檢查顯微鏡各部件狀況,擦拭鏡身、鏡頭后方可開始操作。使用舊式顯微鏡應首先將虹彩光圈的孔徑調至最大,將聚光器升至最高點,再將低倍鏡對準鏡臺孔,鏡頭離載物臺約1cm。轉動粗調節(jié)器調節(jié)鏡臺與物鏡間的距離,從側面注視,以二者間距離約5mm為度。 高倍鏡觀察在低倍鏡將欲仔細觀察的目標移至視野外中央后,再轉動鏡頭轉換器,順次將高倍物鏡轉至工作位置。用高倍鏡觀察后,若有必要,可再換用油鏡觀察。如果鏡頭己提出香柏油而尚未見到物像時,應按上述過程重復操作。關閉光圈,降下聚光器至原位,關閉電源。在低倍鏡下觀察口腔上皮細胞的排列方式,細胞的形狀和結構,口腔上皮無色透明,因此光線不宜強,如仍看不清,可在蓋玻片一側,滴一滴甲基蘭液,在另一側用吸水紙將染料吸入蓋片中,標本著色后可選較完整而且不重迭的細胞,轉用高倍鏡觀察。結構較周圍的細胞質稠厚,反光較強,染色后顏色較深更容易識別。1. 初期:細胞核內的染色質,先形成細長的迂曲紐線(染色絲)然后縮短變粗為染色體。每個染色體的著絲點借紡錘絲與紡錘體相連接,著絲點開始分裂。細胞膜在細胞中央“赤道板”處產生一個橫縊,最后把細胞分割為兩個細胞。三、實驗材料和用品顯微鏡、蛙皮膚鋪片、蛔蟲橫切片、氣管橫切片、膀胱切片、平滑肌分離裝片和切片,橫紋肌縱橫切片,心臟肌縱切片,小腸橫切片等多種器官的上皮與肌肉組織的裝片,擦鏡紙、二甲苯。圖 21 單層扁平上皮剖面圖 單層立方上皮:取腎臟切片進行觀察,注意切片中呈圓形或橢圓形的小空泡――分泌泡是由一層整齊而呈方磚形的細胞圍成的。在低倍鏡下找到小腸腸腔的位置,認出從腸壁伸向腸腔的許多指狀突起――腸絨毛,單層柱狀上皮位于腸絨毛的表層?;紫x橫切片觀察蛔蟲腸管,它的腸壁是由一層柱狀細胞構成,細胞界限非常清楚,核在細胞外端基部(單層柱狀上皮在哪?)。圖24 假復層柱狀纖毛上皮剖面圖2.復層上皮 復層扁平上皮:用食道橫切片觀察。該上皮位于膀胱腔的內表面,注意細胞的層數常隨膀胱生理狀態(tài)變化而不同;當膀胱收縮時,細胞層次增多,一般有5至6層,表層細胞大,呈立方形;中層細胞呈倒梨形;基層細胞最小呈短柱狀。圖 28 橫紋肌縱A、橫B切面圖2. 心臟?。喝⌒呐K肌切片觀察,可以看到心肌纖維呈柱狀,并有分枝互相連接,橫紋不太明顯;細胞核呈圓形,在細胞中央,注意觀察在心肌細胞相連處有橫列色深的間板(閏盤)。二、實驗目的通過實驗,進一步了解結締組織和神經組織的形態(tài)結構特征,為今后學習動物形態(tài)學、組織學和動物生理學打下基礎。胞間質主要由基質和纖維組成。在紅細胞群中,分散有少數體積較大,成藍顏色的白細胞,白細胞具有明顯的核。網狀纖維很細,有很多分枝交織成網。一種顏色較深,纖維有分枝的是彈性纖維。核位于中央,染色較深。3. 軟骨組織軟骨組織由軟骨細胞、基質和纖維組成。軟骨細胞越到軟骨內面越大,軟骨外表面有軟骨膜。每個哈氏管的外圍有呈同心圓排列的骨板環(huán)繞,便形成了哈氏系統。(二)神經組織1. 神經綱胞:細胞體多為橢圓形或多角形,具有多個分枝的樹突和單一的軸突(軸突在片子上不易看到)。 有髓鞘神經纖維:在神經膜內有一層很厚的髓鞘(片子上髓鞘顏色較深),髓鞘內的神經稱軸索。3. 神經末梢:神經纖維分枝到組織內的末端部分叫神經末梢。五、作業(yè)1. 繪制疏松結締組織、一個哈氏系統。為學習多細胞動物打下必要的胚胎學基礎知識。精原細胞是由曲精小管上皮內的原始生殖上皮細胞,經過多次有絲分裂產生的。精細胞經過變態(tài)形成有鞭毛的精子,在曲精小管的中央。 初級卵母細胞:由卵原細胞長大而成。(二)蛙的胚胎發(fā)育觀察蛙的胚胎發(fā)育各期玻片標本和模型。以后繼續(xù)縱橫交替進行卵裂,到外形似桑椹時,稱桑椹期。4. 原腸胚:動物極細胞分裂快,向下移動包圍植物極細胞,同時,背唇處的細胞開始內褶不斷深入,原腸腔逐漸擴大,囊胚腔不斷縮小,消失,內褶的裂縫由新月形擴展為馬蹄形,最后形成一個環(huán)形胚孔(原口)。注意原腸從初期到晚期的形成過程,囊胚腔被原腸腔排擠的情況。后端胚孔閉塞,形成尾部,肛門由腹側外胚層內陷形成,觀察模型注意內部結構。標注各個部位的名稱。四、實驗操作及觀察:(一)綠眼蟲的觀察先用培養(yǎng)的綠眼蟲活體制片(注意培養(yǎng)液是什么顏色,這種顏色是否均勻分布。表膜上具有細而規(guī)則的斜紋。5. 伸縮泡:位于儲蓄泡附近,能收集體內的代謝廢物和多余水分并注入儲蓄泡。8. 葉綠體:是細胞質內的綠色橢圓形細胞器。(二)變形蟲的觀察用吸管從變形蟲培養(yǎng)液底部的泥沙表面或雜物中取1至2滴放在載玻片上,加上蓋玻片,用低倍鏡觀察,一般變形蟲體形較小,且?guī)缀跬该?,在低倍鏡下呈淺色,當變形蟲緩慢移動時,身體不斷地改變形狀,根據這兩個特點,在鏡下仔細尋找(將光線調暗些較好)。內質又分為外面的凝膠質和內面的溶膠質。5. 細胞核:呈扁平橢園形,較內質略為稠密。用高倍鏡觀察其構造:1. 表膜:是體表一層具有彈性的簿膜??跍蟽染哂休^長較密的纖毛。7. 食物泡:是蟲體內大小不一,位置不定的泡伏體。8. 伸縮泡:在蟲體前后端各有一個伸縮泡,它周圍有6至11條作輻射排列的收集管,收集管又與內質網相通,將體內多余的水分和代謝廢物收集起來,注入伸縮泡,再借伸縮泡的收縮,通過固定的孔道排出體外,請注意觀察前后兩個伸縮泡是否交替進行伸縮運動。2. 草履蟲的接合生殖,在環(huán)境條件發(fā)生變化時,兩個草履蟲以口溝相對,表膜互相粘合、溶解,細胞質相互溝通,互相交換核物質后分開,各自進行橫裂繁殖。4. 喇叭蟲:下端有柄固著,越到上端越粗大,形似喇叭,大核呈念珠狀。五、作業(yè)1. 繪制眼蟲形態(tài)結構圖,并注明各部分的名稱。三、實驗材料和用品水螅的整體裝片、水螅的縱切片、桃花水母、海蜇浸制標本、藪枝螅裝片、??茦吮?、紅珊瑚模型、石珊瑚骨骼、海綿浸制標本、毛壺骨針片以及球櫛水母浸制標本,顯微鏡、放大鏡或雙筒解剖鏡。2. 口:位于身體的前端,口周圍的隆起部分,稱為垂唇?;铙w上看不清,可用整體裝片在顯微鏡下觀察。(二)水??v切面的觀察取水螅縱切玻片標本,先在低倍鏡下觀察,注意水螅體內外胚層的位置和結構,然后換高倍鏡觀察。其中主要是內皮肌細胞,前端有鞭毛,能激動水流,有的前端變成偽足攝取食物顆粒,在細胞質內形成食物泡;其次是脲腺細胞,較短小,細胞染色深,頂端常聚集許多細小分泌顆粒。兩種個體外面都有透明的鞘包圍。3. 海蜇:屬缽水母綱,傘呈半球形,中膠質很厚,口腕發(fā)達,下部縱裂成數個小腕,并多皺褶和附屬物,均可食用;加工后傘部叫蜇皮。個體的觸手和腔腸內隔膜各為八個。8. 穿貝海綿:屬尋常海綿綱,具有分解碳酸鈣的能力,寄生在軟體動物的貝殼上,當貝殼被穿蝕后,里面的動物即被殺死。骨針有兩種,一
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