【正文】 些的效果較好）。圖 25復(fù)層扁平上皮剖面圖 變移上皮：取膀胱切片觀察。細(xì)胞的游離面具有纖毛，在細(xì)胞間還看到單細(xì)胞腺的分布。注意觀察該層上皮內(nèi)的杯狀細(xì)胞（呈大的空泡狀）。圖 22 單層立方上皮剖面圖 單層柱狀上皮：用小腸橫切片觀察。蛙皮膚的表皮，最外層是扁平細(xì)胞層；細(xì)胞扁平，呈不規(guī)則多邊形；核大，明顯，在細(xì)胞中央。二、實(shí)驗(yàn)?zāi)康耐ㄟ^實(shí)驗(yàn)，進(jìn)一步了解上皮組織和肌肉組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)特征，為今后學(xué)習(xí)動(dòng)物形態(tài)學(xué)、組織學(xué)和動(dòng)物生理學(xué)打下基礎(chǔ)。4. 末期：染色體到達(dá)兩極后，先形成螺旋狀的染色質(zhì)絲，然后變?yōu)轭w粒狀，最后恢復(fù)到原來的狀態(tài)，同時(shí)，兩新細(xì)胞核漸次形成，核仁核膜出現(xiàn)。2. 中期：染色體聚集在紡錘體的中央，排成一平面與紡錘絲的縱軸垂直，稱赤道板。 （三）細(xì)胞分裂取馬蛔蟲子宮切片觀察細(xì)胞的有絲分裂各期（請注意馬蛔蟲卵呈圓形，外周無色透明很厚的部分是卵殼，中央顏色很深的部分才是卵細(xì)胞）。3. 細(xì)胞核：在細(xì)胞的中央，呈圓形。（二）口腔上皮細(xì)胞裝片的制作和觀察取一張清潔的載玻片，用吸管滴一小滴生理食鹽水在載玻片中央；取消毒牙簽在自己口腔頰部內(nèi)壁，刮取少許粘膜（自色碎片），涂在載片上的生理鹽水中，并使其均勻分布；加上蓋玻片（一側(cè)接觸標(biāo)本傾斜蓋上）。 復(fù)原顯微鏡顯微鏡使用完畢，降下鏡臺(tái)至原處，轉(zhuǎn)動(dòng)鏡頭轉(zhuǎn)換器，使物鏡鏡頭轉(zhuǎn)離鏡臺(tái)孔，取下已觀察的玻片標(biāo)本。然后從目鏡中觀察，用粗調(diào)節(jié)器極其緩慢地向下調(diào)節(jié)至出現(xiàn)物像為止（注意切勿反向轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器，以免油鏡頭與載玻片相碰而損壞了鏡頭及玻片），再用細(xì)調(diào)節(jié)器調(diào)至物像清晰，此時(shí)還應(yīng)適當(dāng)增加光亮度。在高倍鏡下，將玻片中的被檢物按從前到后、從左到右的順序移動(dòng)、觀察，再由低倍鏡轉(zhuǎn)高倍鏡反復(fù)觀察幾次，以熟練高倍鏡的使用。如果觀察的目標(biāo)不在視野中央，可調(diào)節(jié)標(biāo)本移動(dòng)器，使之恰好位于視野中央（請思考玻片移動(dòng)方向與物像移動(dòng)方向的關(guān)系如何？若光線不適，可撥動(dòng)虹彩光圈的調(diào)節(jié)桿，調(diào)節(jié)光線至適宜）。 調(diào)焦光線調(diào)好后，將玻片標(biāo)本放在鏡臺(tái)上標(biāo)本移動(dòng)器的卡槽內(nèi)，并用標(biāo)本移動(dòng)器上的壓片夾卡緊，有蓋玻片的一面朝上，旋轉(zhuǎn)標(biāo)本移動(dòng)器調(diào)節(jié)螺旋將被檢材料移至鏡臺(tái)孔下的聚光器透鏡中央，然后調(diào)焦。配置內(nèi)置式電光源的顯微鏡可直接打開電源開關(guān)，并調(diào)節(jié)光量，使視野內(nèi)的亮度達(dá)到明暗適宜。2. 顯微鏡的使用方法 安放顯微鏡打開鏡箱（或鏡柜），右手緊握鏡臂，左手平托鏡座，將顯微鏡輕放桌上距離桌子邊緣幾厘米處，讓目鏡對著觀察者。上下移動(dòng)聚光器側(cè)面的調(diào)節(jié)桿（或旋轉(zhuǎn)旋鈕），可升高或降低聚光器的高度，調(diào)節(jié)聚光效果。平面鏡反光較弱，用于光線較強(qiáng)的情況；凹面鏡反光較強(qiáng)，用于光線較弱的情況。一般有幾種倍數(shù)不同的目鏡可供選配，分別標(biāo)有等放大倍數(shù)（請思考如何計(jì)算顯微鏡的放大倍數(shù)？）。NA ——物鏡的數(shù)值孔徑例如：，可見光波長范圍為400—700nm ，取其平均波長550 nm，則d=270 nm，約等于照明光線波長一半。顯微鏡的分辨距離越小，即表示它的分辨力越高，也就是表示它的性能越好。物鏡的作用是將標(biāo)本作第一次放大，它是決定顯微鏡性能的最重要的部件——分辨力的高低。③ 工作距離是指當(dāng)所觀察的標(biāo)本最清楚時(shí)物鏡的前端透鏡下面到標(biāo)本的蓋玻片上面的距離。例：放大倍數(shù)為100，指的是長度是1μm的標(biāo)本，放大后像的長度是100μm，要是以面積計(jì)算，則放大了10,000倍。每臺(tái)昱顯微鏡均備有幾個(gè)倍數(shù)不同的物鏡，放大40以下的為低倍鏡，一般有10；放大40及以上的為高倍鏡，放大100的一般為油鏡。粗調(diào)節(jié)器螺旋中央直徑較小的螺旋是細(xì)調(diào)節(jié)器，旋轉(zhuǎn)它時(shí)鏡臺(tái)升降距離較小，能精確地對焦，獲得更清晰的物像，主要在高倍鏡觀察時(shí)調(diào)節(jié)焦距。圖 11 標(biāo)準(zhǔn)光學(xué)顯微鏡構(gòu)造圖d．鏡頭轉(zhuǎn)換器鏡頭轉(zhuǎn)換器是鏡筒下端1個(gè)可旋轉(zhuǎn)的圓盤，其上裝有數(shù)個(gè)不同放大倍數(shù)的物鏡鏡頭，轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器可換用不同倍數(shù)的物鏡。 c．鏡臺(tái)與標(biāo)本移動(dòng)器鏡臺(tái)亦稱載物臺(tái)，是放置玻片標(biāo)本的平臺(tái)。鏡臂的頂端安裝有鏡筒和鏡頭轉(zhuǎn)換器。 機(jī)械系統(tǒng)機(jī)械系統(tǒng)主要對光學(xué)系紡和光源系統(tǒng)起支持和調(diào)節(jié)作用。在高倍鏡下只能用細(xì)調(diào)焦點(diǎn)，不能用粗調(diào)焦器。做顯微照相時(shí)，還必須調(diào)中心（即調(diào)聚光器中心）。對顯微鏡的了解和熟練使用，是作為一個(gè)生命科學(xué)研究者應(yīng)具各的最基本的技能之一。四、實(shí)驗(yàn)操作及觀察:（一）顯微鏡的基本構(gòu)造與使用方法利用顯微鏡對生物體的結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察和研究,標(biāo)志著對生命的研究從宏觀領(lǐng)域進(jìn)入到微觀領(lǐng)域。制作口腔上皮細(xì)胞裝片并進(jìn)行染色觀察。線條要均勻一致，不要有接痕。（4）繪圖時(shí)先把標(biāo)本放在一個(gè)適宜的位置，能展現(xiàn)出圖中要求表示的各個(gè)部分。4. 繪圖注意事項(xiàng)（1）生物繪圖以科學(xué)性為主，首先從理論上對所繪標(biāo)本有一定了解，認(rèn)真觀察標(biāo)本，掌握其各種特征，再嚴(yán)謹(jǐn)繪圖。觀察若不精確，繪圖不可能精確。（4）嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)進(jìn)行工作：除明確目的，注意實(shí)驗(yàn)提示外，需認(rèn)真按實(shí)驗(yàn)操作要求一步步進(jìn)行觀察、解剖，包括示范標(biāo)本的觀察及小實(shí)驗(yàn)等。3. 學(xué)生如何進(jìn)行實(shí)驗(yàn)（1）每次實(shí)驗(yàn)前應(yīng)仔細(xì)閱讀實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)及教科書的有關(guān)章節(jié)，明確實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、?nèi)容和操作步驟。（4）每次的實(shí)驗(yàn)報(bào)告應(yīng)在教師指定時(shí)間內(nèi)完成。2. 實(shí)驗(yàn)課的要求（1）學(xué)生應(yīng)按規(guī)定時(shí)間進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。保持實(shí)驗(yàn)室的安靜，不得進(jìn)行與實(shí)驗(yàn)無關(guān)的活動(dòng)。（5）實(shí)驗(yàn)結(jié)束，在離開實(shí)驗(yàn)室前，應(yīng)清理好自己的實(shí)驗(yàn)桌，要輪流打掃實(shí)驗(yàn)室，保持實(shí)驗(yàn)室的整潔衛(wèi)生。把必需的實(shí)驗(yàn)用品準(zhǔn)備好，并帶到實(shí)驗(yàn)室?？偟膶?shí)驗(yàn)?zāi)康闹?，在于培養(yǎng)學(xué)生的獨(dú)立工作能力，因此每位學(xué)生在實(shí)驗(yàn)中著重鍛煉自己獨(dú)立操作、獨(dú)立思考，培養(yǎng)創(chuàng)新意識(shí)。繪圖是生物實(shí)驗(yàn)中一項(xiàng)重要的工作，也是基本技術(shù)之一，每位學(xué)生應(yīng)認(rèn)真對待。（2）只在紙的一面繪圖，鉛筆應(yīng)經(jīng)常保持尖銳，制面力求整潔。先測量或估量一下標(biāo)本的大小、長寬比例，確定應(yīng)放大或縮小的倍數(shù)，在開始繪圖。以點(diǎn)點(diǎn)表示標(biāo)本上的凹凸、深淺、層次、結(jié)構(gòu)的立體感等，要將筆垂直于圖紙繪成圓點(diǎn)。觀察細(xì)胞的基本結(jié)構(gòu)和細(xì)胞的分裂。隨著個(gè)類對生物體結(jié)構(gòu)和生命現(xiàn)象認(rèn)識(shí)的不斷深入，人們對生命本質(zhì)的微觀世界進(jìn)行探索的動(dòng)力也越來越高。實(shí)驗(yàn)提示必須按實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)了解顯微鏡的各部分結(jié)構(gòu)、性能及使用方法。使用高倍鏡時(shí)，一定要從低倍鏡開始。要開大光闌。它包括：a. 鏡座與鏡柱鏡座是顯微鏡底部的承重部分，可降低顯微鏡重心，使之不易傾倒。鏡筒是安裝在鏡臂頂端的2個(gè)圓筒，其內(nèi)安裝有目鏡鏡頭。鏡臺(tái)中央有1個(gè)圓孔，稱鏡臺(tái)孔，來自下方聚光器的光線可由此通過進(jìn)入物鏡，觀察玻片標(biāo)本之前，應(yīng)將欲觀察的目標(biāo)移至鏡臺(tái)孔處聚光器透鏡的中央。e．焦距調(diào)節(jié)器位于鏡柱的左右兩側(cè)，有粗、細(xì)兩個(gè)螺旋調(diào)節(jié)器，旋轉(zhuǎn)它們能使鏡臺(tái)升降，以調(diào)節(jié)物鏡和鏡臺(tái)上所觀察標(biāo)本之間的距離，獲得清晰的圖像。 光學(xué)系統(tǒng)光學(xué)系統(tǒng)即成像系統(tǒng)，由目鏡和物鏡構(gòu)成。物鏡主要參數(shù)包括：放大倍數(shù)、數(shù)值孔徑和工作距離。顯微鏡的總放大倍數(shù)等于物鏡和目鏡放大倍數(shù)的乘積。物鏡的工作距離與物鏡的焦距有關(guān)，物鏡的焦距越長，放大倍數(shù)越低，其工作距離越長。分辨力也叫分辨率或分辨本領(lǐng)。顯微鏡的分辨力的大小由物鏡的分辨力來決定的，而物鏡的分辨力又是由它的數(shù)值孔徑和照明光線的波長決定的。一般地。 光源系統(tǒng)光源系統(tǒng)由光源、聚光器和虹彩光圈構(gòu)成。反光鏡的方向可以任意轉(zhuǎn)動(dòng)調(diào)節(jié)，以選擇適合的角度收集來自不同方向的光線。c．虹彩光圈虹彩光圈也稱可變光闌。. 檢查檢查顯微鏡各部件狀況，擦拭鏡身、鏡頭后方可開始操作。使用舊式顯微鏡應(yīng)首先將虹彩光圈的孔徑調(diào)至最大，將聚光器升至最高點(diǎn)，再將低倍鏡對準(zhǔn)鏡臺(tái)孔，鏡頭離載物臺(tái)約1cm。轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器調(diào)節(jié)鏡臺(tái)與物鏡間的距離，從側(cè)面注視，以二者間距離約5mm為度。 高倍鏡觀察在低倍鏡將欲仔細(xì)觀察的目標(biāo)移至視野外中央后，再轉(zhuǎn)動(dòng)鏡頭轉(zhuǎn)換器，順次將高倍物鏡轉(zhuǎn)至工作位置。用高倍鏡觀察后，若有必要，可再換用油鏡觀察。如果鏡頭己提出香柏油而尚未見到物像時(shí)，應(yīng)按上述過程重復(fù)操作。關(guān)閉光圈，降下聚光器至原位，關(guān)閉電源。在低倍鏡下觀察口腔上皮細(xì)胞的排列方式，細(xì)胞的形狀和結(jié)構(gòu)，口腔上皮無色透明，因此光線不宜強(qiáng)，如仍看不清，可在蓋玻片一側(cè)，滴一滴甲基蘭液，在另一側(cè)用吸水紙將染料吸入蓋片中，標(biāo)本著色后可選較完整而且不重迭的細(xì)胞，轉(zhuǎn)用高倍鏡觀察。結(jié)構(gòu)較周圍的細(xì)胞質(zhì)稠厚，反光較強(qiáng)，染色后顏色較深更容易識(shí)別。1. 初期：細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)，先形成細(xì)長的迂曲紐線（染色絲）然后縮短變粗為染色體。每個(gè)染色體的著絲點(diǎn)借紡錘絲與紡錘體相連接，著絲點(diǎn)開始分裂。細(xì)胞膜在細(xì)胞中央“赤道板”處產(chǎn)生一個(gè)橫縊，最后把細(xì)胞分割為兩個(gè)細(xì)胞。三、實(shí)驗(yàn)材料和用品顯微鏡、蛙皮膚鋪片、蛔蟲橫切片、氣管橫切片、膀胱切片、平滑肌分離裝片和切片，橫紋肌縱橫切片，心臟肌縱切片，小腸橫切片等多種器官的上皮與肌肉組織的裝片，擦鏡紙、二甲苯。圖 21 單層扁平上皮剖面圖 單層立方上皮：取腎臟切片進(jìn)行觀察，注意切片中呈圓形或橢圓形的小空泡――分泌泡是由一層整齊而呈方磚形的細(xì)胞圍成的。在低倍鏡下找到小腸腸腔的位置，認(rèn)出從腸壁伸向腸腔的許多指狀突起――腸絨毛，單層柱狀上皮位于腸絨毛的表層?；紫x橫切片觀察蛔蟲腸管，它的腸壁是由一層柱狀細(xì)胞構(gòu)成，細(xì)胞界限非常清楚，核在細(xì)胞外端基部（單層柱狀上皮在哪？）。圖24 假復(fù)層柱狀纖毛上皮剖面圖2．復(fù)層上皮 復(fù)層扁平上皮：用食道橫切片觀察。該上皮位于膀胱腔的內(nèi)表面，注意細(xì)胞的層數(shù)常隨膀胱生理狀態(tài)變化而不同；當(dāng)膀胱收縮時(shí)，細(xì)胞層次增多，一般有5至6層，表層細(xì)胞大，呈立方形；中層細(xì)胞呈倒梨形；基層細(xì)胞最小呈短柱狀。圖 28 橫紋肌縱A、橫B切面圖2. 心臟肌：取心臟肌切片觀察，可以看到心肌纖維呈柱狀，并有分枝互相連接，橫紋不太明顯；細(xì)胞核呈圓形，在細(xì)胞中央，注意觀察在心肌細(xì)胞相連處有橫列色深的間板（閏盤）。二、實(shí)驗(yàn)?zāi)康耐ㄟ^實(shí)驗(yàn)，進(jìn)一步了解結(jié)締組織和神經(jīng)組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)特征，為今后學(xué)習(xí)動(dòng)物形態(tài)學(xué)、組織學(xué)和動(dòng)物生理學(xué)打下基礎(chǔ)。胞間質(zhì)主要由基質(zhì)和纖維組成。在紅細(xì)胞群中，分散有少數(shù)體積較大，成藍(lán)顏色的白細(xì)胞，白細(xì)胞具有明顯的核。網(wǎng)狀纖維很細(xì)，有很多分枝交織成網(wǎng)。一種顏色較深，纖維有分枝的是彈性纖維。核位于中央，染色較深。3. 軟骨組織軟骨組織由軟骨細(xì)胞、基質(zhì)和纖維組成。軟骨細(xì)胞越到軟骨內(nèi)面越大，軟骨外表面有軟骨膜。每個(gè)哈氏管的外圍有呈同心圓排列的骨板環(huán)繞，便形成了哈氏系統(tǒng)。（二）神經(jīng)組織1. 神經(jīng)綱胞：細(xì)胞體多為橢圓形或多角形，具有多個(gè)分枝的樹突和單一的軸突（軸突在片子上不易看到）。 有髓鞘神經(jīng)纖維：在神經(jīng)膜內(nèi)有一層很厚的髓鞘（片子上髓鞘顏色較深），髓鞘內(nèi)的神經(jīng)稱軸索。3. 神經(jīng)末梢：神經(jīng)纖維分枝到組織內(nèi)的末端部分叫神經(jīng)末梢。五、作業(yè)1. 繪制疏松結(jié)締組織、一個(gè)哈氏系統(tǒng)。為學(xué)習(xí)多細(xì)胞動(dòng)物打下必要的胚胎學(xué)基礎(chǔ)知識(shí)。精原細(xì)胞是由曲精小管上皮內(nèi)的原始生殖上皮細(xì)胞，經(jīng)過多次有絲分裂產(chǎn)生的。精細(xì)胞經(jīng)過變態(tài)形成有鞭毛的精子，在曲精小管的中央。 初級卵母細(xì)胞：由卵原細(xì)胞長大而成。（二）蛙的胚胎發(fā)育觀察蛙的胚胎發(fā)育各期玻片標(biāo)本和模型。以后繼續(xù)縱橫交替進(jìn)行卵裂，到外形似桑椹時(shí)，稱桑椹期。4. 原腸胚：動(dòng)物極細(xì)胞分裂快，向下移動(dòng)包圍植物極細(xì)胞，同時(shí)，背唇處的細(xì)胞開始內(nèi)褶不斷深入，原腸腔逐漸擴(kuò)大，囊胚腔不斷縮小，消失，內(nèi)褶的裂縫由新月形擴(kuò)展為馬蹄形，最后形成一個(gè)環(huán)形胚孔（原口）。注意原腸從初期到晚期的形成過程，囊胚腔被原腸腔排擠的情況。后端胚孔閉塞，形成尾部，肛門由腹側(cè)外胚層內(nèi)陷形成，觀察模型注意內(nèi)部結(jié)構(gòu)。標(biāo)注各個(gè)部位的名稱。四、實(shí)驗(yàn)操作及觀察:（一）綠眼蟲的觀察先用培養(yǎng)的綠眼蟲活體制片（注意培養(yǎng)液是什么顏色，這種顏色是否均勻分布。表膜上具有細(xì)而規(guī)則的斜紋。5. 伸縮泡：位于儲(chǔ)蓄泡附近，能收集體內(nèi)的代謝廢物和多余水分并注入儲(chǔ)蓄泡。8. 葉綠體：是細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的綠色橢圓形細(xì)胞器。（二）變形蟲的觀察用吸管從變形蟲培養(yǎng)液底部的泥沙表面或雜物中取1至2滴放在載玻片上，加上蓋玻片，用低倍鏡觀察，一般變形蟲體形較小，且?guī)缀跬该?，在低倍鏡下呈淺色，當(dāng)變形蟲緩慢移動(dòng)時(shí)，身體不斷地改變形狀，根據(jù)這兩個(gè)特點(diǎn)，在鏡下仔細(xì)尋找（將光線調(diào)暗些較好）。內(nèi)質(zhì)又分為外面的凝膠質(zhì)和內(nèi)面的溶膠質(zhì)。5. 細(xì)胞核：呈扁平橢園形，較內(nèi)質(zhì)略為稠密。用高倍鏡觀察其構(gòu)造：1. 表膜：是體表一層具有彈性的簿膜?？跍蟽?nèi)具有較長較密的纖毛。7. 食物泡：是蟲體內(nèi)大小不一，位置不定的泡伏體。8. 伸縮泡：在蟲體前后端各有一個(gè)伸縮泡，它周圍有6至11條作輻射排列的收集管，收集管又與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相通，將體內(nèi)多余的水分和代謝廢物收集起來，注入伸縮泡，再借伸縮泡的收縮，通過固定的孔道排出體外，請注意觀察前后兩個(gè)伸縮泡是否交替進(jìn)行伸縮運(yùn)動(dòng)。2. 草履蟲的接合生殖，在環(huán)境條件發(fā)生變化時(shí)，兩個(gè)草履蟲以口溝相對，表膜互相粘合、溶解，細(xì)胞質(zhì)相互溝通，互相交換核物質(zhì)后分開，各自進(jìn)行橫裂繁殖。4. 喇叭蟲：下端有柄固著，越到上端越粗大，形似喇叭，大核呈念珠狀。五、作業(yè)1. 繪制眼蟲形態(tài)結(jié)構(gòu)圖，并注明各部分的名稱。三、實(shí)驗(yàn)材料和用品水螅的整體裝片、水螅的縱切片、桃花水母、海蜇浸制標(biāo)本、藪枝螅裝片、?？茦?biāo)本、紅珊瑚模型、石珊瑚骨骼、海綿浸制標(biāo)本、毛壺骨針片以及球櫛水母浸制標(biāo)本，顯微鏡、放大鏡或雙筒解剖鏡。2. 口：位于身體的前端，口周圍的隆起部分，稱為垂唇?；铙w上看不清，可用整體裝片在顯微鏡下觀察。（二）水螅縱切面的觀察取水?？v切玻片標(biāo)本，先在低倍鏡下觀察，注意水螅體內(nèi)外胚層的位置和結(jié)構(gòu)，然后換高倍鏡觀察。其中主要是內(nèi)皮肌細(xì)胞，前端有鞭毛，能激動(dòng)水流，有的前端變成偽足攝取食物顆粒，在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)形成食物泡；其次是脲腺細(xì)胞，較短小，細(xì)胞染色深，頂端常聚集許多細(xì)小分泌顆粒。兩種個(gè)體外面都有透明的鞘包圍。3. 海蜇：屬缽水母綱，傘呈半球形，中膠質(zhì)很厚，口腕發(fā)達(dá)，下部縱裂成數(shù)個(gè)小腕，并多皺褶和附屬物，均可食用；加工后傘部叫蜇皮。個(gè)體的觸手和腔腸內(nèi)隔膜各為八個(gè)。8. 穿貝海綿：屬尋常海綿綱，具有分解碳酸鈣的能力，寄生在軟體動(dòng)物的貝殼上，當(dāng)貝殼被穿蝕后，里面的動(dòng)物即被殺死。骨針有兩種，一