天然藥物化學成分提取分離鑒定方法與技術(shù)色譜法-wenkub
2023-01-28 20:03:28 本頁面
【正文】 利 用 混合 物 中各 成 分在 固 定相 和 移動 相中 吸附 、 分配 及其親和 力 的差 異 而達 到 分離 。 色譜的三要素 固定相 移動相 被分離 物質(zhì) 5 三 者 相互 關(guān) 系 ？ 按 原 理不 同 可分 為 ： ? 吸 附 色譜 法* ? 分 配 色譜 法* ? 離子 交換色 譜法 ? 凝 膠 濾過 色 譜法 （ 分子 篩 濾過 色 譜） ? 大孔 吸附樹 脂法 ? 高 效 液相 色 譜法 （ 自學 ） ? 氣相 色譜法 （自學 ） 6 三、分類： 吸附色譜法 * （Adsorption Chromatography ) 1 ）原理 ： 利 用 吸 附 劑 對混 合 物中 各 成 分分 子 吸附能力 的差 異 而達 到 分離 的 色譜 法 。 聚 酰 胺 3）吸附色譜的三要素 固定相（ 吸 附劑 ） 移動相（ 溶劑 ） 被分離 物質(zhì) 9 溶 解 能 力 流動相 溶質(zhì) 吸附 劑 吸附作用 競爭 在液固吸附色譜中 ， 溶質(zhì)的保留和分離選 擇性 決 定于 下 列三 個 因素 ： 10 吸附作用 11 ? 硅 膠：適 用 于 中 性和 酸 性成 分 ? 氧 化 鋁 ： 適 用 于 中 性和 堿 性成 分 ? 活 性 炭 ： 非 極 性 吸 附劑 ? 聚 酰 胺 ： 高 分 子 聚 合物, 氫 鍵吸 附 極 性 吸 附 劑 a 、吸附劑（固定相） 12 ? 硅膠 （silica ） SiO2 ? XH2O 酸 性 、親 水 性吸 附 劑。 有 酸 性 、 堿 性 和 中 性 三 種 規(guī) 格 。 影響吸附強弱的因素 ： 1 、 流 動 相 ： 水 ＞ 甲 醇 或 乙 醇 ＞ 丙 酮 ＞ 氯 仿＞ 稀 氨水 ＞ 甲酰 胺。 化合物結(jié)構(gòu)對聚酰胺吸附作用的影響 形成氫鍵的數(shù)目 成鍵基團位置 雙鍵的數(shù)目 分子內(nèi)氫鍵 17 課本第33 頁 ? 活性炭 （activated carbon ） 非 極 性 吸 附 劑 ， 對 非 極 性 物 質(zhì) 具 有 較 強的親和力 ， 在 水中對溶質(zhì)表現(xiàn)出強的吸附能力 。 c、被分離物質(zhì) 遵 循 “相 似 相溶 ” 及“ 相 似者 易 吸附 ” 原理 ： 對 于 極 性 吸 附 劑 而 言 ： 被 分 離 成 分 極 性 大 ， 吸 附 牢 ， 難 以 洗 脫 ； 被 分 離 成 分 極 性 小 ， 吸 附 力 弱 ， 容 易 洗 脫 。 21 常用的硅膠吸附劑 粒徑：200300 目 種 類 ：硅 膠G —— 硅膠+ 粘 合 劑煅 石 膏 硅膠GF254 —— 含 有 熒光 物 質(zhì) 硅膠H —— 不含 粘 合劑 煅 石膏 硅膠HF254 —— 含 有 熒光 物 質(zhì) 22 常用的展開 劑 正 己 烷 、 環(huán) 己 烷 、 四 氯 化 碳 、 甲 苯 、 氯 仿 、乙 酸 乙 酯 、 正 丁 醇 、 丙 酮 、 乙 醇 、 甲 醇 、 水 23 理 想 的溶 劑 應(yīng)能 使 混合 物 分離 后 各組 分 的Rf值 相 差盡 可 能大 ， 且盡 量 之間。 硅膠 105 ℃110 ℃ 3060min 氧 化 鋁 105 ℃110 ℃ 30min 26 操作技術(shù) ——點樣 定量微升毛細管 薄層點樣毛細管 ? 配 制 樣 品 的 溶劑 具 高 度 揮 發(fā) 性 和 盡 可 能 非 極 性 ， 否則易 使 斑 點 擴 展 。 ? 多 數(shù) 采 用 直 線 形 上 行 展 開 ， 薄 層 板 水 平 角 度 以75? 為 最 佳 。 ? 取 出 薄 層 板 預(yù)飽和中 展開中 30 預(yù)防 邊 緣 效應(yīng) 操作技術(shù)——顯色 顯色噴霧瓶 三用紫外燈 ? 本 身 帶 有 顏 色 ? 本 身 無 顏 色 ? 含 有 熒 光 劑 的 薄 層 板 有 色 斑 點 顯 色 劑 顯 色 暗 色 斑 點 觀 察 方 法 ： 日 光 、 熒 光 、 顯 色 。 柱色譜* 35 ? 其原 理、吸 附劑及 洗脫劑 的選擇 與薄層 色譜法 相 同。 37 a 、 干法 b 、 濕法： 因濕法裝柱容易趕走硅膠內(nèi)的氣泡 ，故 一 般以 濕 法裝 柱 較好 。 ① 梯度洗脫：洗脫劑極性從小到大 。 ⑤ 無色成分則采用等分收集 。 一、基本原理 利用被分離成分在固定相和流動相中的 溶解度不同。 流 動 相： 與
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