chapter2蛋白質(zhì)-3-蛋白質(zhì)分離技術(shù)介紹-wenkub
2023-01-27 07:51:29 本頁(yè)面
【正文】 2．蛋白質(zhì)的純化方法 離子交換層析 這是一種 高效分離純化蛋白 的方法。 此法是利用 離子交換劑 作為柱層析支持物，將帶有不同電荷的蛋白質(zhì)進(jìn)行分離的方法。 （ 1）透析法（ dialysis) 凝膠過(guò)濾原理 當(dāng)不同大小的蛋白質(zhì)顆粒流經(jīng)凝膠柱時(shí)，比凝膠網(wǎng)孔大的分子不能進(jìn)入凝膠珠內(nèi)的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，而被排阻在凝膠珠外，隨著溶劑在凝膠珠之間的空隙向下移動(dòng)并最先流出柱外；比網(wǎng)孔小的分子能不同程度地自由出入凝膠珠的內(nèi)外。 (5)成品 加工 ：測(cè)定蛋白質(zhì)的性質(zhì)并干燥成成品。 (2)根據(jù)蛋白質(zhì)的特性，選擇不同的溶劑進(jìn)行抽提 。 研究蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)和功能，首先需要得到純的蛋白質(zhì)樣品。Chapter 2 蛋白質(zhì) Chapter 2 蛋白質(zhì) 蛋白質(zhì)的概念、重要性及分類(lèi) 氨基酸 蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu) 蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能的關(guān)系 蛋白質(zhì)的性質(zhì) 蛋白質(zhì)的提取、分離和純化 蛋白質(zhì)的分離、純化 研究一個(gè)新的蛋白質(zhì)首先要從它的 基本性質(zhì) 作為突破口，然后 根據(jù)它的基本性質(zhì)進(jìn)行分離純化 ，最終用 純品 對(duì)其進(jìn)行分析鑒定。 (1)蛋白質(zhì)來(lái)源：微生物細(xì)胞、動(dòng)物細(xì)胞和植物細(xì)胞； (2)分離和純化過(guò)程都必須 0－ 4℃ 的低溫 下進(jìn)行。 水溶性蛋白用 中性緩沖溶液 抽提； 酸性蛋白用 稀堿性溶液 抽提； 脂溶性蛋白用 表面活性劑 抽提等。 2．蛋白質(zhì)的純化方法 ? 透析是利用 蛋白質(zhì)分子不能透過(guò)半透膜 ，而使它與 其它小分子化合物 ，如無(wú)機(jī)鹽、單糖、雙糖、氨基酸、小肽以及水等分離。 大分子 小分子 凝膠顆粒 凝膠排阻示意圖解 凝膠過(guò)濾層析 蛋白質(zhì)分子一般有兩種形狀 ， 一種是 球形分子 ， 另一種是 線性分子 。 離子交換樹(shù)脂可以分為 陽(yáng)離子 交換樹(shù)脂（如羧甲基纖維素等）， 陰離子 交換樹(shù)脂（如二乙基氨基乙基纖維素等）。其原理 是不同的蛋白質(zhì)分子 對(duì)于固定化在載體上的 特殊配基 具有不同的
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