抗體制藥pappt課件-wenkub
2023-01-23 04:50:50 本頁(yè)面
【正文】 質(zhì)分 1. DNA 文庫(kù) 2. cDNA 文庫(kù) ㈡ 按抗體基因的來(lái)源分 1. 天然抗體庫(kù)（ native antibodu library） 2. 免疫抗體庫(kù) 3. 半合成抗體庫(kù) 4. 全合成抗體庫(kù) 第五節(jié) 抗體工程 噬菌體展示技術(shù)的原理 第五節(jié) 抗體工程 噬菌體展示技術(shù)是將各種多肽或蛋白質(zhì)以融合蛋白的形式表達(dá)并展示在噬菌體表面，同時(shí)將其遺傳密碼包含于噬菌體內(nèi)部，這使得蛋白質(zhì)的功能與其基因密碼有機(jī)的連接在一起。 第五節(jié) 抗體工程 淘篩的基本過(guò)程是：抗原固相化后，對(duì)噬菌粒群的吸附、洗滌和洗脫后在感染擴(kuò)增 ，與輔助噬菌體超感染獲得大容量次級(jí)文庫(kù) ，在反復(fù)與抗原吸附，經(jīng)幾輪淘篩后，淘汰了非目的克隆，是目的克隆大量地?cái)U(kuò)增。 三、以 1994年 Winter以基因工程方法制備抗體為代 表 四、 1994年 Winter創(chuàng)建了噬菌體抗體庫(kù)技術(shù) 第五節(jié) 抗體工程 抗體分類(lèi) ? 多克隆抗體 免疫動(dòng)物 ? 單克隆抗體 雜交瘤技術(shù) ? 基因工程抗體 噬菌體抗體庫(kù)技術(shù) 第五節(jié) 抗體工程 一、噬菌體抗體庫(kù)技術(shù)的基本方法 二、噬菌體抗體庫(kù)技術(shù)的特點(diǎn) 三、基因工程抗體的表達(dá) 第五節(jié) 抗體工程 一般都是從提取 RNA經(jīng)反轉(zhuǎn)錄 PCR獲取抗體某一特定基因區(qū)段，如重鏈和輕鏈可變區(qū)（ VH、 VL）基因?？贵w基因的組合形式多為單鏈抗體。 第五節(jié) 抗體工程 目的克隆經(jīng)過(guò)鑒定后，再導(dǎo)入感受態(tài)菌株，進(jìn)行可溶性表達(dá)，其產(chǎn)物用 Western blot分析確定后，完成全過(guò)程。 第五節(jié) 抗體工程 選擇方式： 淘選（ Panning） 而不是 篩選（ Screening） 第五節(jié) 抗體工程 第五節(jié) 抗體工程 第五節(jié) 抗體工程 第五節(jié) 抗體工程 第五節(jié) 抗體工程 第五節(jié) 抗體工程 第五節(jié) 抗體工程 第五節(jié) 抗體工程 第五節(jié) 抗體工程 一、噬菌體抗菌庫(kù)的構(gòu)建 第五節(jié) 抗體工程 第五節(jié) 抗體工程 第五節(jié) 抗體工程 篩選流程 第五節(jié) 抗體工程 第五節(jié) 抗體工程 二、噬菌體抗體庫(kù)技術(shù)的特點(diǎn) 基因型和表型相統(tǒng)一 選擇能力和擴(kuò)增能力相結(jié)合 第五節(jié) 抗體工程 噬菌體展示技術(shù)最關(guān)鍵的優(yōu)勢(shì)有三： 第一，淘選的高效率使得在極低的存在水平下，挑選 到高親和力噬菌體成為可能； 第二，所挑選到的噬菌體可在微量存在的情況下，通 過(guò)感染細(xì)菌得到富集； 第三，展示的多肽或蛋白質(zhì)與其包含在噬菌體內(nèi)部的 基因密碼的連
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1