色譜分析中國藥科大學(xué)第4章-第7節(jié)檢測方法-wenkub
2023-01-21 23:17:48 本頁面
【正文】 (4) 峰抑制（ peak suppression） 如果兩個化合物在色譜圖中并未完全分開，但他們的吸收光譜卻有很大差別。 Ⅱ）吸收比法（比率色譜法） 對于純物質(zhì)來說，兩個特定波長處的吸收比應(yīng)為一常數(shù)，與濃度無關(guān)，所以吸收比可以用作色譜峰純度的檢查指標(biāo)。 ② 在色譜分離期間，對每個色譜峰的指定位置實時記錄吸收光譜圖，并計算其最大吸收波長。為了適應(yīng)這種特點，所以它在結(jié)構(gòu)和光路安排上與普通的色散型紫外－可見光檢測器有重要區(qū)別。 優(yōu)點：既可提供色譜圖，又可提供紫外吸收光譜圖，既可進行定量，又可進行定性。 （三） 多波長紫外檢測器 光源：氘燈、氫燈或中壓汞燈 波長： 200nm～ 400nm 特點：靈敏度要比單波長式 UV254 檢測器略低，選擇性比 UV254 高。如果溶液濃度單位采用 mol/L， b 的單位為 cm，則相應(yīng)的吸光系數(shù)為摩爾吸光系數(shù)（ molar absorptivity）或摩爾消光系數(shù)，單位為 L/(mol?cm)，用符號 ε 表示，則 A bc?? 由上式可見，吸光度與吸光系數(shù)、溶液濃度和光路長 度成直線關(guān)系，當(dāng)紫外檢測器樣品的光路長度一定時， ε 值越大，靈敏度越高。第七節(jié) 檢測方法 一、理想檢測器的特征 ① 靈敏度高 ② 對所有溶質(zhì)都有快速反應(yīng) ③ 相應(yīng)對流動相流量和溫度變化都不敏感 ④ 不引起柱外譜帶擴展 二、檢測器的性能指標(biāo) ① 檢測器的靈敏度：單位樣品量（或濃度）進入檢測器時所給出的響應(yīng)值。而 ε 的數(shù)值大小取決于波長和樣品物質(zhì)的性質(zhì)，它表明物質(zhì)分子對特定波長輻射的吸收能力。 （四） 紫外 /可 見分光式檢測器 光源：氘燈（紫外區(qū)） /鎢燈（可見區(qū)）。 缺點：停流掃描中斷了色譜信息，也會導(dǎo)致色譜峰展寬。樣品與光柵的相對位置正好相反的結(jié)構(gòu)，經(jīng)常被稱為“倒光學(xué)”（ reversed optics）系統(tǒng)。 ③ 在色譜運行期間可以逐點進行光譜掃描，得到時間－波長－吸收值三維圖形。純物質(zhì)色譜峰各點處的濃度不同，因而吸收光譜振幅大小不一，但吸收比應(yīng)當(dāng)相等。通過選擇適當(dāng)?shù)臏y定波長、參比波長和帶寬，使一種化合物的色譜峰被完全抑制，提高選擇性，實現(xiàn)未分離峰的準(zhǔn)確 定量分析。熒光檢測器就是在樣品的激發(fā)波長處測量發(fā)射光的強弱。 ③ 線性范圍較寬，約 104
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