酶譜法檢測血清基質(zhì)金屬蛋白酶mmpmmp9的活性-wenkub
2023-01-21 09:42:31 本頁面
【正文】 形狀 ： 愈接近球形愈快 外因 ： ( U/L)： 電場強(qiáng)度越高電泳速度越快 pH (pH恒定 )： PH值決定帶電顆粒的解離程度 ， 決定物質(zhì)所帶凈電荷的多少 [I] 最適 : 緩沖液的離子強(qiáng)度越高 ， 電泳速度越慢 ： 液體對固體支持物的相對移動 ， 應(yīng)盡量避免選用有電滲作用的支持物 ? 按支持介質(zhì)的不同可分為： 紙電泳（ Paper electrophorisis） 醋酸纖維薄膜電泳（ Cellulose Acetate electrophoresis） 瓊脂凝膠電泳（ Agar Gel electrophoresis） 聚丙烯酰胺凝膠電泳（ Polyacrylamide Gelelectrophoresis） SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳（ SDSPAGE,十二烷基硫酸鈉 聚丙烯酰胺凝膠電泳法） ? 按支持介質(zhì)形狀不同可它為： 薄層電泳 板電泳 柱電泳 電泳設(shè)備 垂直電泳系統(tǒng) 水平電泳系統(tǒng) 聚丙烯酰胺凝膠電泳原理 聚丙烯酰胺凝膠是由單體丙烯酰胺 (acrylamide，簡稱 Acr)和交聯(lián)劑 N,N′甲叉雙丙烯酰胺(N,N ′ methylenebisacylamide,簡稱 Bis)在加速劑 N,N,N,N四甲基乙二胺 (N,N,N,Ntetramethyl ethylenedia mine，簡稱 TEMED)和催化劑過硫酸銨 (ammonium persulfate (NH4)2S2O3，簡稱 AP) 的作用下聚合交聯(lián)成三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的凝膠，以此凝膠為支持物的電泳稱為聚丙烯酰胺凝膠電泳 (polyacrylamide gel electrophoresis，簡稱 PAGE)。 ? 而 SDSPAGE僅根據(jù)蛋白分子量亞基的不同而分離蛋白。在樣品和凝膠中加入還原劑和 SDS后，分子被解聚成多肽鏈，解聚后的氨基酸側(cè)鏈和 SDS結(jié)合成蛋白 SDS膠束，所帶的負(fù)電荷大大超過了蛋白原有的蛋白量，這樣就消除了不同分子間的電荷差異和結(jié)構(gòu)差異。 ? 轉(zhuǎn)移的腫瘤細(xì)胞在原灶外存活和增殖，這是癌癥對人類生命的最大威脅。 Ⅳ 型膠原則主要存在于基底膜內(nèi)。一般惡性程度高的腫瘤細(xì)胞具有較強(qiáng)的蛋白水解作用，可侵蝕破壞包膜，促進(jìn)轉(zhuǎn)移。胞質(zhì)型 MMPs根據(jù)其作用底物的特異性、敏感性及氨基酸序列的同源性分為三大類： （ 1）間質(zhì)膠原酶，包括 MMP MMP MMP MMP13，其作用底物主要為間質(zhì)膠原 , 即 Ⅰ 、 Ⅱ 、 Ⅲ 和 Ⅶ 、 Ⅹ 型膠原 , 但不能降解明膠和 Ⅳ 型膠原； （ 2）明膠酶，包括 MMP2和 MMP9,其作用底物主要是 Ⅳ
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