elisa檢測(cè)技術(shù)ppt課件-wenkub
2022-10-31 23:35:08 本頁(yè)面
【正文】 物，同時(shí)保持各自的免疫活性和酶活性； ? 酶結(jié)合物與相應(yīng)的抗原或抗體結(jié)合后，能通過(guò)加入底物的顏色反應(yīng)來(lái)確定免疫反應(yīng)的發(fā)生，顏色反應(yīng)的深淺與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比。 ELISA 的分類(lèi)、原理和操作 ? 競(jìng)爭(zhēng)法 原理：通過(guò) a組和 b組顯色的差異，來(lái)確定標(biāo)本中待測(cè)蛋白的量 加酶標(biāo)記抗原 加底物顯色 優(yōu)點(diǎn)： 待測(cè)抗原只需一個(gè)免疫結(jié)合位點(diǎn)，適合小分子抗原如激素和藥物之類(lèi)； 操作步驟簡(jiǎn)單快捷，只需一個(gè)保溫洗滌過(guò)程。 ? 抑制性測(cè)定 ? 間接法測(cè)抗原 此方法操作簡(jiǎn)單、迅捷但重復(fù)性一般較差；通常用于抗體效價(jià)的測(cè)定和某些疾病的早期診斷。在提取樣品的過(guò)程中，裝入樣品研磨液的 Bf管應(yīng)置于冰浴中；上清應(yīng)置于 4℃ ，最多只能存放 4天 試劑的準(zhǔn)備 ELISA中用的蒸餾水或去離子水，包括用于洗滌的，應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的； 自配的緩沖液應(yīng)用 pH計(jì)測(cè)量較正； 從冰箱中取出的試驗(yàn)用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用； 最好現(xiàn)配現(xiàn)用。 在實(shí)驗(yàn)前，必須經(jīng)紫外射線照射 1~2小時(shí)后，其對(duì)免疫球蛋白的吸附性能增加 已包被抗原或抗體的固相載體在低溫（ 28℃ ）干燥的條件下一般可保存 6個(gè)月 。 加標(biāo)本
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