elisa檢測技術(shù)ppt課件(已修改)
2024-10-28 23:35 本頁面
【正文】 ELISA檢測技術(shù) ELISA 技術(shù) 酶聯(lián)免疫吸附測定 (Enzymelinked Immunosorbent Assay， ELISA)，是 利用抗體分子能與抗原分子特異性結(jié)合的特點(diǎn)，將游離的雜蛋白和結(jié)合于固相載體的目的蛋白分離，并利用特殊的標(biāo)記物對其定性或定量分析的一種檢測方法。 ELISA 技術(shù)的三個(gè)基本原理 ? 抗原或抗體能物理性地吸附于固相表面，并且保持其免疫活性； ? 抗原或抗體能與酶通過共價(jià)鍵形成酶結(jié)合物，同時(shí)保持各自的免疫活性和酶活性； ? 酶結(jié)合物與相應(yīng)的抗原或抗體結(jié)合后，能通過加入底物的顏色反應(yīng)來確定免疫反應(yīng)的發(fā)生，顏色反應(yīng)的深淺與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比。 ELISA 的分類、原理和操作 ? 競爭法 原理：通過 a組和 b組顯色的差異，來確定標(biāo)本中待測蛋白的量 加酶標(biāo)記抗原 加底物顯色 優(yōu)點(diǎn)： 待測抗原只需一個(gè)免疫結(jié)合位點(diǎn)，適合小分子抗原如激素和藥物之類； 操作步驟簡單快捷，只需一個(gè)保溫洗滌過程。 缺點(diǎn)： 酶標(biāo)記抗體的用量大； 定量檢測的靈敏度和重復(fù)性存在不足。 ? 雙抗夾心法 雙抗夾心法 改良雙抗夾心法 優(yōu)點(diǎn)：
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