x5實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量監(jiān)測-wenkub
2023-05-22 03:10:34 本頁面
【正文】 ， 所以對亞系的監(jiān)測十分有用 。 DNA指紋技術(shù)經(jīng)過電泳后可獲得十幾到幾十條帶 ， 而這些帶型在個(gè)體之間或品系之間有差異 ， 如同人類的指紋在每個(gè)人都不同一樣 ， 因此而得名 。 2021/6/15 21 例如：小鼠第 16條染色體的 D16Mit4位點(diǎn) ，其 PCR產(chǎn)物的大小 （ bp） 在常用近交系中分別如下： C57BL/6132， DBA/2123， A/J147， C3H123， BALB/c149， AKR126，CBA132。 2021/6/15 20 2． 簡單序列長度多態(tài) (SSLP)技術(shù) 簡單序列長度多態(tài)位點(diǎn)是動(dòng)物基因內(nèi)廣泛存在的由 l～ 4個(gè)核苷酸組成的成串的重復(fù)序列 ，又稱為微衛(wèi)星 (micro satellite)。 通過 DNA電泳和 DNA探針分子雜交技術(shù) ， 即可觀察到不同帶型 。 2021/6/15 17 六、現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù) 傳統(tǒng)的遺傳監(jiān)測方法來源于過去研究者對哺乳動(dòng)物進(jìn)行遺傳分析時(shí)采用的研究手段 。 ?將年齡 、 性別 、 體重相當(dāng)?shù)拇笫蠡蛐∈筇幩篮?，分辨右下頜骨 ， 加以標(biāo)記 ， 在直角坐標(biāo)系上測量出多個(gè)形態(tài)特征參考點(diǎn)距離 。 可檢定生化標(biāo)記即同工酶或蛋白質(zhì) ， 常用的電泳介質(zhì)有乙酸纖維素膜 、 淀粉凝膠 、 聚丙烯酰胺凝膠 。 2021/6/15 12 （ 三 ） 淋巴組織移植 用供體的均質(zhì)淋巴器官 ， 如骨髓 、 脾 、 淋巴結(jié) 、 胸腺或胚胎肝臟制備出單細(xì)胞懸液 。 不需昂貴設(shè)備 ， 易對植皮成活情況進(jìn)行觀察和判斷 。 2021/6/15 10 二、免疫學(xué)標(biāo)記監(jiān)測 （ 一 ） 皮膚移植法 這是目前最常用和最靈敏的檢測亞系內(nèi)或亞系間組織相容性基因差異的方法 。 ?C57BL/6腫瘤發(fā)生率低， A系高。 ?不同遺傳背景與反應(yīng)特性的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，對同一刺激有時(shí)可引起不同質(zhì)和量的反應(yīng)。事實(shí)上， 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量往往成為制約性要素 ，影響整個(gè)實(shí)驗(yàn)的質(zhì)量和水平 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量監(jiān)測是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)的重要內(nèi)容，是確保實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量的必要手段。 2021/6/15 3 實(shí)驗(yàn)工作人員的健康和生命的保證 常見的人畜共患?。毫餍行猿鲅獰?、狂犬病、猴 B病毒、淋巴細(xì)胞脈絡(luò)叢腦膜炎病毒、利什曼原蟲等 2021/6/15 4 動(dòng)物生產(chǎn)和繁殖的保證 動(dòng)物一旦染上傳染病，則種群難以凈化，一些烈性傳染病如鼠痘、兔病毒性出血癥等可致動(dòng)物全軍覆沒，造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。 ?為了保存實(shí)驗(yàn)動(dòng)物品種品系特性。 ?BALB/c和 C3H小鼠對鼠傷寒沙門氏菌的敏感性存在顯著差異 ?SHR為自發(fā)性高血壓大鼠，心血管疾病發(fā)生率高 2021/6/15 9 一、群體管理 ?管理上人為的粗心最易引起遺傳上的混雜 ，所以對育種群進(jìn)行恰當(dāng)?shù)墓芾硎潜ＷC遺傳質(zhì)量的最有效方法。 在小鼠和大鼠中普遍采用的是尾部或背部皮膚移植法 。 能有效地測出新發(fā)生的 、 造成亞系變異的遺傳混雜和突變 。然后將適量活細(xì)胞通過靜脈或腹腔注射到受體動(dòng)物體內(nèi) ， 組織相容性由受體中存活者及脾增大者來確定 ， 也可以用放射學(xué)方法 。 每一種標(biāo)記系統(tǒng)做特異性染色 ，最后將得到的帶型與公布的生化遺傳圖式進(jìn)行比較 。 ?將所有測量的平均數(shù)作統(tǒng)計(jì)分析 ， 利用判別函數(shù)確定下頜骨形狀 。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展 ， 分子生物學(xué)技術(shù)有可能取代傳統(tǒng)的遺傳監(jiān)測方法 ， 其優(yōu)點(diǎn)是多態(tài)性高 ， 位點(diǎn)豐富 ， 實(shí)驗(yàn)技術(shù)成熟 ， 直接涉及生物的遺傳基礎(chǔ) ， DNA樣品容易保存和運(yùn)輸?shù)鹊?。 2021/6/15 19 例 如 ： 位 于 小 鼠 第 2號 染 色 體 補(bǔ) 體 5（ plement5） 位點(diǎn) (He)的 pC5探針 ， 當(dāng)用 HindⅢ 消化小鼠 DNA時(shí) ， C3H品系將產(chǎn)生一條 ， 而 AKP品系將產(chǎn)生 和 。 估計(jì)這樣的 DNA結(jié)構(gòu)在哺乳動(dòng)物基因組內(nèi)的數(shù)目多達(dá) 5萬～ 10萬個(gè) 。 SSLP測試技術(shù)比 RFLP技術(shù)簡便 ，多態(tài)性高 ， 需要的 DNA樣品較少 ， 引物容易獲得 ， 推廣應(yīng)用前景可觀 。 通常有兩種方法獲得 DNA指紋圖 。 但是 DNA指紋的結(jié)果因?yàn)殡娪編喽缓帽嬲J(rèn)和比較 。 該項(xiàng)技術(shù)首先將動(dòng)物目的基因組 DNA提純 、 酶切 ， 用含 10個(gè)堿基的隨機(jī)引物 ， 對 DNA進(jìn)行 PCR擴(kuò)增 ， 經(jīng)電泳 ， 便可在多個(gè)位點(diǎn)上得到擴(kuò)增產(chǎn)物 。 這種情況如發(fā)現(xiàn)得早 ， 在被檢查的性狀中至少可以觀察到一個(gè)以上基因標(biāo)記發(fā)生改變 ，出現(xiàn)雜合型 ， 或與遺傳概貌不符的其他表型；如果發(fā)現(xiàn)得較遲 ， 一些雜合基因可隨機(jī)地固定為單一的純合型 ， 但與原品系的遺傳概貌不一致 。 監(jiān)測時(shí)可以看到一個(gè)品系所有的動(dòng)物在 1～ 2個(gè)基因標(biāo)記上與原品系的遺傳概貌不符 ， 但表型一致又均為純合型 。 為了證實(shí)此點(diǎn) ， 往往需要根據(jù)動(dòng)物編號查詢該只動(dòng)物同窩兄妹或雙親的基因標(biāo)記表型 。 遺傳突變?nèi)鐭o特殊保留價(jià)值 ， 在剔除突變的個(gè)體后 ， 整個(gè)品系可以繼續(xù)保存；如有保存價(jià)值 ， 可將突變個(gè)體單獨(dú)培育成同源突變近交系 。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物被集中飼養(yǎng) ， 極易導(dǎo)致疾病的爆發(fā)與流行 。 4． 如動(dòng)物群發(fā)生疾病 ， 為了確證病原 ， 對患病動(dòng)物進(jìn)行病原學(xué)診斷 ， 積累對疾病的認(rèn)識(shí) ， 收集菌株和毒株 ， 進(jìn)一步研究病原 ，為診斷試劑和疫苗的制備提供菌株和毒株 。 檢測方法有：病毒分離與鑒定 ， 病毒顆粒 、 抗原或核酸的檢出 ， 潛在病毒的激活 ， 抗體產(chǎn)生試驗(yàn)等 。 對于泰澤菌 ， 由于不能在人工培養(yǎng)基上生長 ， 因此宜采用組織壓片 、鏡檢的方法進(jìn)行檢查 ，
環(huán)評公示相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1