x5實驗動物質量監(jiān)測-wenkub
2023-05-22 03:10:34 本頁面
【正文】 ， 所以對亞系的監(jiān)測十分有用 。 DNA指紋技術經過電泳后可獲得十幾到幾十條帶 ， 而這些帶型在個體之間或品系之間有差異 ， 如同人類的指紋在每個人都不同一樣 ， 因此而得名 。 2021/6/15 21 例如：小鼠第 16條染色體的 D16Mit4位點 ，其 PCR產物的大小 （ bp） 在常用近交系中分別如下： C57BL/6132， DBA/2123， A/J147， C3H123， BALB/c149， AKR126，CBA132。 2021/6/15 20 2． 簡單序列長度多態(tài) (SSLP)技術 簡單序列長度多態(tài)位點是動物基因內廣泛存在的由 l～ 4個核苷酸組成的成串的重復序列 ，又稱為微衛(wèi)星 (micro satellite)。 通過 DNA電泳和 DNA探針分子雜交技術 ， 即可觀察到不同帶型 。 2021/6/15 17 六、現(xiàn)代分子生物學技術 傳統(tǒng)的遺傳監(jiān)測方法來源于過去研究者對哺乳動物進行遺傳分析時采用的研究手段 。 ?將年齡 、 性別 、 體重相當?shù)拇笫蠡蛐∈筇幩篮?，分辨右下頜骨 ， 加以標記 ， 在直角坐標系上測量出多個形態(tài)特征參考點距離 。 可檢定生化標記即同工酶或蛋白質 ， 常用的電泳介質有乙酸纖維素膜 、 淀粉凝膠 、 聚丙烯酰胺凝膠 。 2021/6/15 12 （ 三 ） 淋巴組織移植 用供體的均質淋巴器官 ， 如骨髓 、 脾 、 淋巴結 、 胸腺或胚胎肝臟制備出單細胞懸液 。 不需昂貴設備 ， 易對植皮成活情況進行觀察和判斷 。 2021/6/15 10 二、免疫學標記監(jiān)測 （ 一 ） 皮膚移植法 這是目前最常用和最靈敏的檢測亞系內或亞系間組織相容性基因差異的方法 。 ?C57BL/6腫瘤發(fā)生率低， A系高。 ?不同遺傳背景與反應特性的實驗動物，對同一刺激有時可引起不同質和量的反應。事實上， 實驗動物質量往往成為制約性要素 ，影響整個實驗的質量和水平 實驗動物質量監(jiān)測是實驗動物科學的重要內容，是確保實驗動物質量的必要手段。 2021/6/15 3 實驗工作人員的健康和生命的保證 常見的人畜共患病：流行性出血熱、狂犬病、猴 B病毒、淋巴細胞脈絡叢腦膜炎病毒、利什曼原蟲等 2021/6/15 4 動物生產和繁殖的保證 動物一旦染上傳染病，則種群難以凈化，一些烈性傳染病如鼠痘、兔病毒性出血癥等可致動物全軍覆沒，造成巨大經濟損失。 ?為了保存實驗動物品種品系特性。 ?BALB/c和 C3H小鼠對鼠傷寒沙門氏菌的敏感性存在顯著差異 ?SHR為自發(fā)性高血壓大鼠，心血管疾病發(fā)生率高 2021/6/15 9 一、群體管理 ?管理上人為的粗心最易引起遺傳上的混雜 ，所以對育種群進行恰當?shù)墓芾硎潜ＷC遺傳質量的最有效方法。 在小鼠和大鼠中普遍采用的是尾部或背部皮膚移植法 。 能有效地測出新發(fā)生的 、 造成亞系變異的遺傳混雜和突變 。然后將適量活細胞通過靜脈或腹腔注射到受體動物體內 ， 組織相容性由受體中存活者及脾增大者來確定 ， 也可以用放射學方法 。 每一種標記系統(tǒng)做特異性染色 ，最后將得到的帶型與公布的生化遺傳圖式進行比較 。 ?將所有測量的平均數(shù)作統(tǒng)計分析 ， 利用判別函數(shù)確定下頜骨形狀 。隨著分子生物學技術的發(fā)展 ， 分子生物學技術有可能取代傳統(tǒng)的遺傳監(jiān)測方法 ， 其優(yōu)點是多態(tài)性高 ， 位點豐富 ， 實驗技術成熟 ， 直接涉及生物的遺傳基礎 ， DNA樣品容易保存和運輸?shù)鹊?。 2021/6/15 19 例 如 ： 位 于 小 鼠 第 2號 染 色 體 補 體 5（ plement5） 位點 (He)的 pC5探針 ， 當用 HindⅢ 消化小鼠 DNA時 ， C3H品系將產生一條 ， 而 AKP品系將產生 和 。 估計這樣的 DNA結構在哺乳動物基因組內的數(shù)目多達 5萬～ 10萬個 。 SSLP測試技術比 RFLP技術簡便 ，多態(tài)性高 ， 需要的 DNA樣品較少 ， 引物容易獲得 ， 推廣應用前景可觀 。 通常有兩種方法獲得 DNA指紋圖 。 但是 DNA指紋的結果因為電泳帶太多而不好辨認和比較 。 該項技術首先將動物目的基因組 DNA提純 、 酶切 ， 用含 10個堿基的隨機引物 ， 對 DNA進行 PCR擴增 ， 經電泳 ， 便可在多個位點上得到擴增產物 。 這種情況如發(fā)現(xiàn)得早 ， 在被檢查的性狀中至少可以觀察到一個以上基因標記發(fā)生改變 ，出現(xiàn)雜合型 ， 或與遺傳概貌不符的其他表型；如果發(fā)現(xiàn)得較遲 ， 一些雜合基因可隨機地固定為單一的純合型 ， 但與原品系的遺傳概貌不一致 。 監(jiān)測時可以看到一個品系所有的動物在 1～ 2個基因標記上與原品系的遺傳概貌不符 ， 但表型一致又均為純合型 。 為了證實此點 ， 往往需要根據(jù)動物編號查詢該只動物同窩兄妹或雙親的基因標記表型 。 遺傳突變如無特殊保留價值 ， 在剔除突變的個體后 ， 整個品系可以繼續(xù)保存；如有保存價值 ， 可將突變個體單獨培育成同源突變近交系 。 實驗動物被集中飼養(yǎng) ， 極易導致疾病的爆發(fā)與流行 。 4． 如動物群發(fā)生疾病 ， 為了確證病原 ， 對患病動物進行病原學診斷 ， 積累對疾病的認識 ， 收集菌株和毒株 ， 進一步研究病原 ，為診斷試劑和疫苗的制備提供菌株和毒株 。 檢測方法有：病毒分離與鑒定 ， 病毒顆粒 、 抗原或核酸的檢出 ， 潛在病毒的激活 ， 抗體產生試驗等 。 對于泰澤菌 ， 由于不能在人工培養(yǎng)基上生長 ， 因此宜采用組織壓片 、鏡檢的方法進行檢查 ，
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