沉淀反應(yīng)與凝集反應(yīng)yhl-wenkub
2023-05-21 20:20:16 本頁面
【正文】 M和 IgG,IgM的凝集作用比 IgG大數(shù)百倍。 第一節(jié) 凝集反應(yīng)的特點 二、反應(yīng)階段 抗原抗體的特異性結(jié)合 出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象 三、特點 該方法簡便、敏感度高，應(yīng)用廣泛。 在試管內(nèi)顆粒性抗原直接與抗體結(jié)合，在電解質(zhì)的作用下， 出現(xiàn)肉眼可見 的凝集現(xiàn)象。以出現(xiàn) 50％凝集以上 的 血清最大稀釋度 為該血清的凝集效價。如與相應(yīng)抗原接觸，即出現(xiàn)反向間接凝集反應(yīng)。 將待檢血清或抗原和致敏乳膠各滴一滴在玻片上，陽性者 5～ 10min即出現(xiàn)凝集。 未經(jīng)致敏的受檢者新鮮紅細胞 試劑： 抗人 O型紅細胞的單克隆抗體 臨床應(yīng)用 ： HIV檢測、 HBV檢測 第四節(jié) 自身紅細胞凝集試驗 自身紅細胞凝集試驗 抗球蛋白試驗又稱 Coombs試驗 第五節(jié) 抗球蛋白試驗 （一）直接 Coombs試驗 檢測紅細胞上抗體或不完全抗體 單價抗體只能與一方抗原的抗原決定簇結(jié)合，不產(chǎn)生凝集反應(yīng)，當(dāng)加入抗球蛋白抗體后，可以將兩個各連接一方抗原決定簇的單價抗體連接起來，出現(xiàn)凝集現(xiàn)象。 第二階段： 形成肉眼可見的大的免疫復(fù)合物。 + + + + + + + + + — 1/80 — — — — + + + — 最適比例方陣測定法 二、免疫濁度測定 當(dāng) 可溶性抗原 與相應(yīng)抗體特異結(jié)合， 二者比例合適時 ，在特殊的緩沖液中它們快速形成一定大小的抗原抗體復(fù)合物，使反應(yīng)液體出現(xiàn)濁度。 常用的凝膠有瓊脂、瓊脂糖、葡聚糖或聚丙烯酰胺凝膠。 ?技術(shù)要點： 將抗體混入 %瓊脂糖內(nèi)（ 50℃ ），未凝固前傾注成平板，凝固后打孔（直徑 3～ 5mm ），孔中加入抗原溶液和不同濃度的標準品，置濕盒內(nèi) 37℃,24 ～ 48h 觀察孔周圍是否出現(xiàn)沉淀環(huán)。 。 。 ? 沉淀線位于抗原抗體孔中間，說明兩者比例較適合。 3. 影響因素： ?瓊脂（無電滲或電滲很小的）影響火箭形狀不規(guī)則 。 火箭免疫電泳圖 ①②③④ 為標準抗原； ⑤⑥ 為標本 + 三、免疫電泳 一）原理： 區(qū)帶電泳＋雙向擴散 。 三）影響因素 ① 抗原抗體比例不當(dāng) ,需測抗原抗體最適比 。 思考題 。 ③ 電泳條件直接影響分辨率。
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