【正文】 、脫臭 。 ② 化合物所含的 極性基團數(shù)目越多，極性越強 （葡萄糖極性強于鼠李糖）。 （ 2）溶劑極性降低，則 活性炭對溶質(zhì)的吸附能力也隨之降低。 故同為溶質(zhì)，極性強者將被優(yōu)先吸附。 如堿性氧化鋁吸附黃酮等酚酸性物質(zhì)。無選擇性，吸附與解吸附過程可逆，快速。10 5～ 179。 （ 3）加壓液相柱色譜（了解，不做重點掌握） 載體：多為顆粒直徑較小、機械強度及比表面積均大的球形硅膠微粒，如 Zipax類薄殼型或表面多孔型硅球以及 Zorbax類全多孔硅膠微球。 適用物質(zhì)：水溶性或極性 較大的成分，如生物堿、苷類、糖類、有機酸等化合物。 常用載體：硅膠、硅藻土及纖維素粉等。 酸性化合物 + 鈣鹽、鋇鹽、鉛鹽 → 沉淀 → H 2S氣體 → 純品 堿性化合物 + 苦味酸鹽、苦酮酸鹽等（有機酸鹽） → 先加入無機酸，再堿化 → 純品 磷鉬酸鹽、磷鎢酸鹽、 雷氏銨鹽 等（無機酸鹽） （二）根據(jù)物質(zhì)在兩相溶劑中的分配比（分配系數(shù)）不同進行分離 常見的方法有簡單的 液 液萃取法和液 液分配色譜（ LC或 LLC）等 。 酸提堿沉： 生物堿 等堿性成分。） 醇提水沉法： 在藥材濃縮的水提液中加入數(shù)倍量的乙醇稀釋。 單峰表示純化合物，雙峰表示不純的化合物。 （ 3）色譜法： 單一化合物用兩種以上溶劑系統(tǒng)或色譜條件進行檢測，均顯示 單一的斑點 。（ 單用或混用） 注意： 用于重結(jié)晶溶劑用量需適當，用量太大會增加溶解，析出晶體量少；用量太小在熱過濾時會提早析出結(jié)晶造成損失。 重結(jié)晶：從不純的結(jié)晶經(jīng)過進一步精制處理得到較純結(jié)晶的過程。 （ 3）夾帶劑的作用 夾帶劑（ entrainer）作為亞臨界組分 ,揮發(fā)度介于超臨界流體與被萃取溶質(zhì)之間，以液體形式和相對小的量加入超臨界流體中。 萃取選擇性的決定因素： 溫度、壓力、夾帶劑的種類及含量。 特點： ① 不會改變有效成分的化學(xué)結(jié)構(gòu)； ② 可縮短提取時間，提高提取效率。 適用成分： 游離羥基蒽醌類成分 ，一些 小分子香豆素類 ，有機酸類成分等。 總結(jié)： 方法 操作 優(yōu)點 缺點 適用藥物 煎煮 浸漬 滲漉 回流 連續(xù)回流 水蒸氣蒸餾法用于提取 具有揮發(fā)性的、能隨水蒸氣蒸餾而不被破壞，且難溶或不溶于水的成分。 優(yōu)點： 適用于遇熱不穩(wěn)定的成分，或含大量淀粉、樹膠、果膠、黏液質(zhì)的中藥。 優(yōu)點：簡便，適用于遇熱不穩(wěn)定的成分，或含大量淀粉、樹膠、果膠、黏 液質(zhì)的 中藥。 缺點： ① 需加熱，含 揮發(fā)性 成分及 加熱易破壞 的成分不宜使用。 2）溶劑 選擇的原則 （ 1）相似相溶，能最大限度地提取所需要的化學(xué)成分 （ 2）不與有效成分反應(yīng) （ 3）不溶共存雜質(zhì) （ 4）節(jié)約成本：價廉、安全、易得、濃縮方便。 作用原理：溶劑穿透入藥材原料的細胞膜，溶解可溶性 物質(zhì)，形成細胞內(nèi)外的濃度差，將其滲出細胞膜，達到提取目的。 。 。 。 ？ 中藥化學(xué)研究內(nèi)容包括各類中藥的化學(xué)成分（主要是生理活性成分或藥效成分）的結(jié)構(gòu)特點、物理化學(xué)性質(zhì)、提取分離方法以及主要類型化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)鑒定等。此外，還涉及主要類型化學(xué)成分的生物合成途徑等內(nèi)容。 。 課程主要內(nèi)容： 內(nèi)容 總論 緒論 中藥化學(xué)成分的一般研究方法 ** 各 論 生物堿 ** 糖和苷 * 醌類 ** 香豆素和木脂素 * 黃酮 ** 萜類和揮發(fā)油 * 皂苷 ** 強心苷 * 主要動物藥化學(xué)成分 * 其他成分 各論學(xué)習(xí)思路： 學(xué)習(xí)方法： 各論。 第二節(jié) 中藥有效成分的提取與分離 一、中藥有效成分的提取 注意：在提取前，應(yīng)對所用材料的基源（如動、植物的學(xué)名）、產(chǎn)地、藥用部位、采集時間與加工方法等進行考查，并系統(tǒng)查閱文獻，以充分了解和利用前人的經(jīng)驗。 一般提取規(guī)律： ① 萜類、甾體等脂環(huán)類及芳香類化合物因為極性較小，易溶于三氯甲烷、乙醚等親脂性溶劑中； ② 糖苷、氨基酸等類成分則極性較大，易溶于水及含水醇中； ③ 酸性、堿性及 兩性化合物，因為存在狀態(tài)（分子或離子形式）隨溶液而異，故溶解度將隨 pH而改變，可用不同 pH的堿或酸提取。 常用親水性提取溶劑 溶劑 優(yōu)點 缺點 水 對細胞穿透力強，提取效率高 安全、價廉、易得 水雜質(zhì)多、易變 對含淀粉、粘液質(zhì)多的藥材不易過濾 乙醇 對藥材組織穿透力強，效率高 脂溶性雜質(zhì)較多 有選擇性，不同濃度極性不同 可防腐、沸點低，易除去、較便宜 可抑制酶活性、大部分可回收利用 有揮發(fā)性、易燃燒 甲醇 效率高于乙醇 毒性大、 較貴 提取方法 a、煎煮 b、浸漬法 c、滲漉法 d、回流 e、連續(xù)回流（索氏提取） 掌握不同提取方法原理、特點及適用的成分類型。 ② 多糖類 成分含量較高的中藥，用水煎煮后藥液黏度較大，過濾困難，不宜使用。 缺點： ① 出膏率低； ② 以水為溶劑時，提取液易發(fā)霉變質(zhì)。 （似浸漬法，但提取效率高于浸漬法） 缺點： ① 溶劑消耗量大； ② 耗時長，操作麻煩。 適用成分： 揮發(fā)性（ 100℃ 有一定蒸汽壓）； 對水穩(wěn)定； 不溶于水； 耐熱。 （如：樟木中的樟腦，茶葉中的咖啡因） 定義：采用超聲波輔助溶劑提取的方法。 定義：采用超臨界流體為溶劑對中藥材進行萃取的方法。 常用的提取物質(zhì)： C0 NH C2H C7H1 CCl2F N2O、 SF6等，實際最常用的為 C02。 作用： ① 改善或維持選擇性； ② 提高難揮發(fā)溶質(zhì)的溶解度。 原理：要分離物質(zhì)在熱的溶劑中溶解達到飽和，冷卻時由于溶解度的降低，溶液因過飽和而析出晶體。一般可比需要量多加 20%左右 。常用的有紙色譜、紙上電泳和薄層色譜。 在溶液中加入另一種溶劑以改變混合物的極性，使一部分物質(zhì)沉淀析出，從而實現(xiàn)分離。 （沉淀除去樹脂、葉綠素等水不溶性雜質(zhì)。 堿提酸沉： 黃酮、蒽醌類 等酸性成分。 液 — 液萃取法的原理： K值 溶質(zhì)在任意不相混溶的兩溶劑中的分配系數(shù) K： K=CU/CL K：分配系數(shù)； CU：溶質(zhì)在上相溶劑中的濃度； CL：溶質(zhì)在下相溶劑中的濃度 （ K在一定的溫度及壓力下為一常數(shù)） 例： 假定 A、 B兩種溶質(zhì)用三氯甲烷及水進行分配， A、 B均為 ， KA=10， KB=，兩相溶劑體積比VCHCl3/VH2O=1，則一次振搖分配平衡后： 水的密度小于三氯甲烷，故水為上相，三氯甲烷為下相 A： KA=CH20/CCHCl3=10 則 90%以上的溶質(zhì) A將分配到水中，不到 10%分配到三氯甲烷中 B： KB=CH20/CCHCl3= 則不到 10%的溶質(zhì) B將分配到水中， 90%以上的分配到三氯甲烷中 分離因子 β 表示 分離的難易 β =KA/KB（注： KA﹥ KB） 分離難易判定： β≥100 ，僅作一次簡單萃取就可實現(xiàn)基本分離（如上例）； 100＞ β≥10 ，通常需萃取 10～ 12 次； β≤2 ，需萃取 100次以上； β≌1, 即 KA/KB≌1 ，則無法分離 pH 以酸性物質(zhì)（ HA）為例，其在水中的解離平衡及解離常數(shù) K可用下式表示： 酸性越強， Ka越大， pKa值越小。 常用反相硅膠填料有： RP2（ C2H5）、 RP8（ C8H17）、 RP18（ C18H37） （ 1）正相色譜：固定性極性 流動相極性 被分離物質(zhì)極性越大（親水性越強），越不易洗脫。 （ 2）反相色譜：固定性極性 流動相極性 被分離物質(zhì)極性越小（親脂性越強），越不易洗脫。 快速色譜（ flash chromatography，約 179。105Pa ）及高壓液相色譜（ HPLC， 179。 如硅膠、氧化鋁、活性炭吸附。 半化學(xué)吸附： 介于物理吸附與化學(xué)吸附之間，力量較弱。 （ 2） 溶劑極性越弱，則吸附劑對溶質(zhì)將表現(xiàn)出越強的吸附能力；溶劑極性增強，則吸附劑對溶質(zhì)的吸附能力即隨之減弱。故從活性炭上洗脫被吸附物質(zhì)時，洗脫溶劑的洗脫能力將隨溶劑極性的降低而增強。 ③ 所含 極性基團相同時，非極性基團越多，極性越弱 （如高級脂肪酸極性弱）。 注意：有時擬除去的色素不一定是親脂性的，故活性炭脫色不一定總能收到良好的效果。 用量：一般為樣品量的 30～ 60倍。 （ 2）拌樣及裝樣 硅膠、氧化鋁吸附柱色譜，應(yīng)盡可能選用極性小的溶劑裝柱和溶解樣品，以利樣品在吸附劑柱上形成狹窄的原始譜帶。 注意：一般，混合溶劑中強極性溶劑的影響比較突出，故不可隨意將極性差別很大的兩種溶劑混合在一起使用。 基本原理： 氫鍵吸附。 聚酰胺色譜的分離機理：一般認為是 “ 氫鍵吸附 ” ，即聚酰胺的吸附作用是通過其 酰胺羰基與酚類、黃酮類化合物的酚羥基，或酰 胺鍵上的游離胺基與醌類、脂肪羧酸上的羰基形成氫鍵締合而產(chǎn)生吸附 。 吸附強弱通常在含水溶劑中大致有下列規(guī)律： ① 形成氫鍵的基團數(shù)目越多，則吸附能力越強 ② 成鍵位置對吸附力也有影響。 ② 可用于生物堿、萜類、甾體、糖 類、氨基酸等其他極性與非極性化合物的分離。 （ 1）吸附原理： ① 選擇性吸附 （由于范德華引力或產(chǎn)生氫鍵的結(jié)果） ② 分子篩性能 （由其本身的多孔性網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)決定） （ 2）影響吸附的因素： ① 大孔樹脂本身的性質(zhì)（比表面積、表面電性、極性、能否形成氫鍵等）。 （ 3）大孔吸附樹脂的應(yīng)用： 主要用于天然化合物的分離和富集 預(yù)處理方法：用高濃度乙醇濕法裝柱，繼續(xù)用乙醇在柱上流動清洗，不時檢查流出的乙醇液，至流出的乙醇液與 水混合不呈現(xiàn)白色乳濁現(xiàn)象，然后以大量的蒸餾水洗去乙醇即可。 練習(xí)題 最佳選擇題 大孔吸附樹脂吸附的物質(zhì)用水充分洗脫后，再用丙酮洗脫，被丙酮洗下的物質(zhì)是 [答疑編號 5630010301] 【正確答案】 D （四）根據(jù)物質(zhì)分子大小差別進行分離 超濾法 —— 利用不同分子量化合物擴散速度不同而分離 超速離心法 —— 離心作用 （凝膠過濾色譜、分子篩過濾、排阻色譜） （ 1）分離原理：分子篩作用， 根據(jù)凝膠的孔徑和被分離化合物分子的大小而達到分離的目的。 利用一種用天然或人工合成的膜，以外界能量或化學(xué)位差為推動力，對雙組分或多組分的溶質(zhì)和溶劑進行分離、分級、提純和富集的方 法。 按照孔徑大小，可將透析膜分為： 微濾膜（ ～ 14μm ）；超濾膜（ ～ ）；反滲透膜（ ～ ）；納米膜（約2nm） 應(yīng)用：精制藥用酶時，用透析法脫無機鹽。 網(wǎng)孔大小用交聯(lián)度（即加入交聯(lián)劑的百分比）表示，交聯(lián)度越大，則網(wǎng)孔越小，質(zhì)地越緊密，在水中越不易膨脹；交聯(lián)度越小，則網(wǎng)孔越大，質(zhì)地疏松，在水中易于膨脹。如揮發(fā)油和一些液體生物堿的提取分離常采用分餾法。常用的有紙色譜（ PC）、紙上電泳和薄層色譜（ TLC）。 高分辨質(zhì)譜（ HRMS） 可將物質(zhì)的質(zhì)量精確到小數(shù)點后第 3位（一般質(zhì)譜只精確到小數(shù)點后第 1位），這可為確定化合物分子組成的重要依據(jù)。1 峰， （ 3）場解吸質(zhì)譜（ FDMS） 適用于難氣化和熱穩(wěn)定性差的固體樣品，但碎片離子峰較少 （ 4）快原子轟擊質(zhì)譜（ FABMS）和液體二次離子質(zhì)譜（ LSIMS） 除得到分子離子峰外，還可得到糖和苷元的結(jié)構(gòu)碎片峰。 （二）紅外光譜（ IR） 可確定其分子中的官能團的種類及其大致的周圍化學(xué)環(huán)境。 適用對象： 含有共軛雙鍵、 α ， β 不飽和羰基（醛、酮、酸、酯）結(jié)構(gòu)化合物，及芳香化合物。 峰面積： 判斷每個信號的氫質(zhì)子。完全消除了 1H對 13C的影響， 13C的信號在圖譜上均作為單峰出現(xiàn)，便于判斷 13C信號的化學(xué)位移。 （五）質(zhì)譜 質(zhì)譜可用于確定分子量 以及求算分子式和提供其他結(jié)構(gòu)信息。 一般來說，除氨基酸、氨基糖、肽類、蛋白質(zhì)、核酸、核苷酸以及含氮維生素等動、植物體必需的含氮有機化合物外，其他含氮有機化合物均可視為生物堿。 三、生物堿的分類及結(jié)構(gòu)特征 （一）吡啶類生物堿 此類生物堿多來源