【正文】 態(tài)，綜合分析能力較強(qiáng)。 （ 2）英文摘要尚需進(jìn)一步的推敲斟酌。選題針對(duì)性 較 強(qiáng)，依據(jù)充分，具有一定的科學(xué)意義和應(yīng)用價(jià)值。 影響高粱蚜大發(fā)生的主要條件是什么？ 答： 主要是受空氣濕度和溫度影響，根據(jù)前人相關(guān)報(bào)道， 自 6 月中旬至 7 月中旬，平均氣溫在 2229℃，旬平均 相對(duì)濕度在 55%75%，溫度系數(shù)（旬雨量 /旬平均氣溫）大多在 1 以下，是大發(fā)生的主要條件。 指導(dǎo)教師意見(jiàn)： 論文以測(cè)定利用 SSR標(biāo)記對(duì)高粱重組自交系進(jìn)行抗蚜性鑒定為題，立題依據(jù)較充分，具有一定的 理論和實(shí)用 價(jià)值。 統(tǒng)計(jì)分析： 首先利用 EXCEL 表統(tǒng)計(jì)田間表型觀察結(jié)果以及實(shí)驗(yàn)室鑒定結(jié)果，然后用 Mapmaker對(duì)分析結(jié)果進(jìn)行計(jì)算 , 用 Kosambi 函數(shù)將重組值轉(zhuǎn)換為遺傳圖距。 （ 5）去掉乙醇后室溫下風(fēng)干 DNA，加入 50ul 的 dd H2O 使之完全溶解。 1） CTAB 提取緩沖液（ 2%CTAB， 1M ， ， mmol/L NaCl， 2％β 巰基乙醇）， 65℃提前水浴；剪取高粱葉片于研缽中加入 800ulCTAB提取液研磨，將研磨液轉(zhuǎn)入 離心管中 65℃水浴 40min。頭水進(jìn)地要及時(shí) ,避免高粱受旱 ,防蚜效果更佳。在感蚜蟲(chóng)前 ,抗蚜品系及其雜交種可溶性糖含量顯著高于感蚜品系 ,接蟲(chóng)后感蚜品系可溶性糖含量升高顯著。結(jié)果表明 ,高粱抗蚜品系葉片表面較感蚜品系的細(xì)胞排列整齊、致密、表皮細(xì)胞直徑較感蚜品系小、葉片薄、葉片表面光滑、葉片顏色淺感蟲(chóng)后各品系過(guò)氧化物酶 (POD)、多酚氧化酶 (PPO)活性均有升高 ,與蚜蟲(chóng)的誘導(dǎo)存在相關(guān)性 ,但不同品系感蚜前后均不存在趨勢(shì)性變化 。 潘景芳等 (1996) 報(bào)道 ,從 1986 年開(kāi)始 ,利用抗蚜源 TAM428 等與非抗蚜材料雜交 ,從分離后代中選育出 11份恢復(fù)系 ,并利用這些恢復(fù)系與 6個(gè)不育系選配一批雜交種 ,又通過(guò)人工接蚜鑒定、產(chǎn)量鑒定和主要農(nóng)藝性狀鑒定 ,從中篩選出幾個(gè)較為優(yōu)良的抗蚜恢復(fù)系及其高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、多抗雜交種。中感的 441 份 ,占總數(shù)的 %。 目的意義： 高粱蚜蟲(chóng)嚴(yán)重危害高粱，通過(guò)對(duì)高粱抗蚜的研究可以有效控制田間高粱蚜蟲(chóng)。 請(qǐng)按相關(guān)要求完成畢業(yè)論文任務(wù)。 專家簽字： 2021 年 5 月 10 日 學(xué)院意見(jiàn) : 院長(zhǎng)： 年 月 日 農(nóng)學(xué) 學(xué)院 農(nóng)學(xué) 專業(yè) 陳再軍 學(xué)生 現(xiàn)把 20212021 學(xué)年，第 2 學(xué)期的畢業(yè)論文安排下達(dá)給你，你本學(xué)期承擔(dān)的畢業(yè)論文任務(wù)如下： 依據(jù)本任務(wù)書(shū)中論文題目、目 的意義、可行性分析的內(nèi)容完成開(kāi)題報(bào)告。 進(jìn)度安排： 2021 年 56 月：查閱資料，設(shè)計(jì)試驗(yàn) 內(nèi)容 ， 選擇大豆品種 。在對(duì)高粱抗蚜田間觀察中，發(fā)現(xiàn)具有抗蚜性基因的植株明顯比不具有抗蚜性基因的植株受到危害小，因此可以利用分子標(biāo)記對(duì)高粱的抗蚜基因進(jìn)行定位，從而指導(dǎo)田間育種工作，前人也曾利用分子標(biāo)記對(duì)高粱 蚜基因進(jìn)行定位并取得突破性的成果，因此本實(shí)驗(yàn)是可行的。 通過(guò)對(duì)高粱抗蚜基因的鑒定，可以大大縮減田間育種的年限，對(duì)育種工作具有指導(dǎo)性的意義。 在抗蚜基因的研究可以從生物自身抵御高粱蚜蟲(chóng)，可以避免化學(xué)藥劑抗蚜蟲(chóng)造成的環(huán)境污染。 預(yù)期結(jié)果 通過(guò)利用凝膠電泳對(duì)一些與抗蚜相關(guān)的 SSR 標(biāo)記進(jìn)行多態(tài)性分析，篩選出 6 對(duì)具有多 態(tài)性的引物，并對(duì)高粱品種―“河農(nóng) 16”和“千三”的 F8 重組自交系進(jìn) 行 SSR多態(tài)性分析，從而觀察篩選出的 6 對(duì)具有多態(tài)性引物在群體中的抗感情況，通過(guò)對(duì)群體電泳條帶的觀察，并結(jié)合對(duì)群體抗感表型的調(diào)查來(lái)找到與目的性狀相連鎖的基因。 2021 年 612 月 ： 撰寫(xiě)課程論文，開(kāi)展試驗(yàn)內(nèi)容，完成試驗(yàn)內(nèi)容。 按照開(kāi)題報(bào)告的要求按期完成畢業(yè)論文各項(xiàng)工作的實(shí)施。 教師簽字： 2021 年 5 月 4 日 河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 本科畢業(yè)論文開(kāi)題報(bào)告 題 目 ： 利用 SSR 標(biāo)記對(duì)高粱重組自交系進(jìn)行抗蚜性鑒定 學(xué) 院： 農(nóng)學(xué)院 學(xué)生姓名： 陳再軍 專 業(yè)： 農(nóng)學(xué) 班級(jí) 學(xué)號(hào)： 2021014010215 指導(dǎo)教師姓名： 常金華 指導(dǎo)教師職稱 ： 教授 二零一二年六月五日 學(xué)生姓名 陳再軍 專業(yè)班級(jí) 農(nóng)學(xué) 0902 班 學(xué) 號(hào) 2021014010215 指導(dǎo)教師 常金華 職 稱 教授 所在學(xué)院 農(nóng)學(xué)院 論文名稱 利用 SSR 標(biāo)記對(duì)高粱重組自交系進(jìn)行抗蚜性鑒定 選題依據(jù) 理論依據(jù)： 高粱具有抗蚜性的基因，對(duì)蚜蟲(chóng)表現(xiàn)為抗蚜和感蚜兩種性狀。 通過(guò)對(duì)高粱抗蚜基因的鑒定，可以大大縮減田間育種的年限，對(duì)育種工作具有指導(dǎo)性的意義。其余 %的高粱資源對(duì)蚜蟲(chóng)的為害都很敏感。 19962021 年 ,在田間采用人工接菌法進(jìn)行高粱抗病性鑒定和利用田間自然發(fā)生的害蟲(chóng)種群與人工輔助接蟲(chóng)相結(jié)合的方法進(jìn)行高粱抗蟲(chóng)性鑒定 ,對(duì) 1282 份高粱種質(zhì)資源進(jìn)行了高粱絲黑穗病、高粱靶斑病、高粱蚜蟲(chóng)和玉米螟等 4 種病蟲(chóng)害的抗性同步鑒定。苯丙氨酸解氨酶 (PAL)酶活性感蟲(chóng)前在抗蟲(chóng)的河農(nóng) 16 及雜交種中具有高水平表達(dá) ,并與其他感蚜品系存在顯著差異 。 1997 年進(jìn)行大面積藥效試驗(yàn) ,70%高巧拌種即可有效控制蚜蟲(chóng)在高粱抽穗期 (即為害盛期 )的為害 ,結(jié)果表明 70%高巧干種衣劑對(duì)高粱出苗期 、出苗率及生育期無(wú)不良影響 , 且有一定的壯苗促長(zhǎng)作用。 1982 年，徐守珍等于田間和室內(nèi)鑒定了 500 余份國(guó)內(nèi)外種質(zhì)資源的抗蚜性 , 從中發(fā)現(xiàn) TAM428 和 Dubor 2 高抗高粱蚜。 （ 2）將離心管取出冷卻至室溫，加入等體積的氯仿 :異戊醇（ 24:1），充分混勻，配平后 10,000 rpm 離心 10 min，將上清液轉(zhuǎn)移到另一離心管中。 （ 6）紫外分光分度 計(jì)檢測(cè) DNA 濃度， 1%瓊脂糖凝膠檢測(cè) DNA 完整性。 進(jìn)度安排： 2021 年 56 月：查閱資料，設(shè)計(jì)試驗(yàn) 內(nèi)容 ， 選擇高粱品 種并進(jìn)行田間種植 。試驗(yàn)方案 設(shè)計(jì)合理， 科學(xué)可行， 進(jìn)度安排合適， 預(yù)期結(jié)果明確，同意開(kāi)題 ，并進(jìn)入下一階段試驗(yàn)內(nèi)容 。 審核小組評(píng)語(yǔ)： 選題依據(jù) 比較 充分，試驗(yàn) 安排 合理，研究方法可行，同意開(kāi)題并進(jìn)入下一階段試驗(yàn)工作。試驗(yàn)設(shè)計(jì) 安排 合理， 技術(shù)路線 可行，工作量較大，符合本科 畢業(yè) 論文要求。 （ 3） 文中表格注意采用三線表。 論文難度 及工作量 14 難度較大，工作量大。 答辯報(bào)告 10 能簡(jiǎn)明扼要、重點(diǎn)突出地闡述論文或設(shè)計(jì) 的主要內(nèi)容，有新見(jiàn)解，結(jié)論明確；時(shí)間掌握恰當(dāng)。在論文答辯過(guò)程中重點(diǎn)突出，回答問(wèn)題基本正確。 geic analysis 0 引言 【本實(shí)驗(yàn)意義】高粱作為世界上最重要的糧食作物之一，其產(chǎn)量和質(zhì)量受到世界的關(guān)注和研究，它具有抗旱、耐澇及抗鹽堿等不良環(huán)境的特性?！厩叭搜芯窟M(jìn)展介紹】 2021 年，常金華 [2]等人通過(guò)對(duì)抗蚜的河農(nóng) 16 和感蚜品系 Tx623B、 Tx622B、 Tx3197B、千三、晉五及雜交種的物理特性、組織結(jié)構(gòu)、生理生化特性的對(duì)比分析 ,研究了不同基因型高粱理化特性與抗蚜性的相關(guān)性。結(jié)果表明 , 52 對(duì)SSR 引物在 3%瓊脂糖凝膠上共檢測(cè)出 277 個(gè)等位變異 ,平 均每個(gè)位點(diǎn)有 53 個(gè)等位變異。簡(jiǎn)單序列重復(fù) ( Simple sequence repeat , SSR) 又稱微衛(wèi)星 ( Microsatellite) , 它是基于 PCR 基礎(chǔ)上的一種分子標(biāo)記 , 最早在人類基因組研究中發(fā)現(xiàn) , 而后被應(yīng)用于植物、動(dòng)物等研究中。 近年來(lái)隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展和科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步 ,高粱的利用價(jià)值被逐步發(fā)掘出來(lái) , 廣泛用于飼料 , 燃料乙醇 , 制糖等產(chǎn)業(yè)。其目的在于：了解高粱抗蚜性的遺傳鑒定方法，充分了解高粱抗蚜性的遺傳特點(diǎn)，建立一套適合高粱蚜抗性的 SSR 體系找到與高粱蚜抗性基因連鎖的分子標(biāo)記，為最終掌握高粱蚜抗性遺傳規(guī)律，克隆高粱蚜抗性基因奠定基礎(chǔ)。 藥品：硝酸銀、氫氧化鈉、 mmol/L NaCl， 2% CTAB， 1M ， PH ， mmol/L NaCl，氯仿 :異戊醇（ 24:1）、無(wú)水乙醇、 70％乙醇等。 （ 4）加 1 mL 70％乙醇進(jìn)行洗滌， 10,000rpm 離心 5 min，重復(fù)本步驟 2 次。 PCR 體系（ 10μ l） 模板 DNA l 引物 l 10 Buffer 1μ l DNTP l Taq酶 l dd 水 μ l 反應(yīng)循環(huán)參數(shù)參照劉國(guó)慶 [7]的方法，略作改動(dòng)： PCR 反應(yīng)程序?yàn)椋?95℃預(yù)變性 5min, 循環(huán) 95℃變性 30s、退火 1min、 72℃延伸 2min, 共 35 個(gè)循環(huán) , 最后在 72℃延伸 10min。結(jié)果表明，高粱的抗蚜基因?qū)Ω醒粱虮憩F(xiàn)顯性，受主效單基因控制 [8]。 數(shù)據(jù)結(jié)果統(tǒng)計(jì) 株系編號(hào) sb6m3174 sb6m3500 sb6m3610 sb6rj2776 sb6rj2880 引物G5Q5 表型調(diào)查 鑒定結(jié)果 1 0 0 0 2 0 0 A A 2 0 0 0 0 0 0 B B 3 1 1 1 1 1 1 A A 4 0 2 * 0 0 0 A A 5 0 0 0 2 * 0 A A 6 0 0 0 0 0 0 B B 7 0 0 0 0 1 1 A A 8 1 1 * 1 1 1 B A 9 2 2 0 2 2 0 A A 11 1 1 1 1 1 1 B A 12 2 2 0 2 2 0 B A 13 0 0 0 2 0 0 B A 14 1 0 * 1 1 1 B A 15 0 1 0 0 0 0 A A 16 0 1 0 0 0 0 A A 圖 1：親本引物條帶電泳結(jié)果 17 0 0 0 0 0 0 B B 18 0 0 0 0 0 0 A B 19 1 1 1 1 1 1 A A 20 1 1 1 1 1 1 B A 21 0 0 0 0 0 0 A B 22 0 2 0 2 0 0 B A 23 0 0 0 2 0 0 A A 24 2 2 0 2 2 2 B A 25 1 1 0 1 1 0 A A 26 0 0 0 0 0 0 A B 27 0 0 0 0 0 0 B B 28 1 1 1 1 1 1 A A 29 2 1 2 2 1 2 A A 30 1 1 1 1 1 1 B A 31 0 0 0 2 0 0 B A 32 2 2 0 2 2 0 A A 33 1 1 1 1 1 1 A A 34 1 1 1 1 1 1 A A 35 0 0 0 2 0 0 A A 36 0 0 0 2 0 0 B A 37 1 1 1 1 1 2 B A 38 1 1 1 1 1 1 A A 39 0 0 0 0 0 0 A B 40 0 0 0 0 0 0 A B 41 0 0 0 0 0 0 B B 42 0 0 0 2 0 0 B A 43 1 1 1 1 1 1 A A 44 0 0 0 2 0 0 A A 45 1 0 1 1 1 0 B A 46 1 0 1 2 2 0 B A 47 2 0 * 2 * 0 A A 48 1 1 1 1 1 0 A A 49 2 0 0 2 0 0 B A 50 0 0 0 0 0 0 A B 51 0 2 0 2 0 0 B A 52 0 0 0 0 0 0 B B 53 0 0 0 0 0 0 B B 54 2 1 0 2 1 0 A A 56 0 0 0 0 0 0 B B 57 1 1 0 0 0 0 A A 58 0 0 0 0 0 0 B B 59 0 0 0 0 0 0 A B 60 1 * * 1 1 1 A A 61 0 0 0 0 0 0 B B 62 1 0 * 1 1 1 A A 63 0 0 0 0 0 0 B B 64 2 1 0 0 0 0 B A 65 0 1 0 0 0 0 B A 66 0 1 0 0 0 0 A A 67 0 * * 1 * * B A 68 0 0 0 0 0 0 B B 69 0 0 0 1 * 0 B A 70 1 0 1 1 * 1 A A 71 1 1 0 0 0 0 B A 72 0 1 0 0 * 0 A A 73 0 0 0 0 0 0 B B 74 0 0 0 0 0 0 A B 75 0 0 0 0 0 0 A B 76 1 1 1 1 1 1 B A 77 2 0 0 2 2 0 A A 78 1 1 1 1 1