【正文】 相近的歸為一類，性質(zhì)差別較大的歸入不同類，縮小主觀判斷所造成的誤差，具有較好的科學(xué)性和客觀性 [18]。每草果 100Kg，用食鹽 2Kg[14]。 《中華人民共和國(guó)藥典》 2020 年版 醋制 醋煮 [16] 《嵩崖尊生全書》 1 引 言 4 標(biāo)準(zhǔn)化研究中的一種新的思路。也就是說，要在力保數(shù)據(jù)信息丟失最少的原則下，對(duì)高維變量空間進(jìn)行降維處理。 在 HSGCMS 優(yōu)化 條件下， 通過 質(zhì)譜（ MS）對(duì)草果不同部位（ 果 、殼、仁、莖、葉、芽） 揮發(fā)性 成分進(jìn)行測(cè)定 ，采用峰面積歸一法計(jì)算各組分的相對(duì)含量，同時(shí)建立草果不同部位（果、殼、仁、莖 、葉、芽）、不同產(chǎn)地 （紅河 、楚雄、麗江、大理、玉溪、文山）、不同炮制方法（ 炒制 、鹽制、 姜制 、凈制、醋制）的 揮發(fā)性 GCMS 指紋圖譜 ，采用“ 中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng) 2020A 版 ”軟件對(duì)指紋圖譜進(jìn)行相似度計(jì)算，采用 SPSS 軟件對(duì)指紋圖譜進(jìn)行聚類分析、主成分分析 的 文章未見報(bào)道。由于中藥注射液的特殊性，我國(guó)決定先采用中藥指紋圖譜控制中藥中注射劑的質(zhì)量。國(guó)外有關(guān)指紋圖譜的報(bào)道無一例外地將指紋圖譜作為鑒別項(xiàng)，評(píng)價(jià)草藥的真實(shí)性以及產(chǎn)品質(zhì)量的一致性，韓國(guó)、日本、德國(guó)等，都比較重視對(duì)植物藥的開發(fā)和利用德國(guó)用指紋圖譜技術(shù)控制銀杏制劑的質(zhì)量，在國(guó)際上具有很強(qiáng)的競(jìng)爭(zhēng)力。目前，國(guó)外開展的植物制劑指紋圖譜研究 , 主要還是針對(duì)單味藥材提取物而言，在植物制劑的整體性作用和藥效相關(guān)性方面研究很少 。 ，吳江梅塞爾工業(yè)氣體有限公司 ） 氣相毛細(xì)管色譜柱 HPFFAP（ 30m ） 程序升溫 初始 溫度 80℃ ，保持 3min， 以 6℃ /min 速度升至 180℃ ，保持 2min 總運(yùn)行時(shí)間 MS 條件 離子源溫度 200℃ 接口溫度 220℃ 檢測(cè)器電壓 溶劑延遲時(shí)間 2min m/z 351000 直接 進(jìn)樣 條件 Cycle（ 循環(huán)） GCInj Syringe（ 針體積 ） 10uL Sample Volume（進(jìn)樣 體積 ） Air Volume（ 空氣體積） 0nL Pre cln slv1（ 進(jìn)樣前清洗 溶劑 1） 2 2 實(shí)驗(yàn)部分 10 續(xù)表 23 直接 進(jìn)樣 條件 Pre cln slv2（ 進(jìn)樣前 清洗 溶劑 2） 2 Pre cln spl（ 進(jìn)樣前清洗 樣品） 2 Fill Volume（ 排氣體積） Fill Speed（ 針桿速度） 5uL/s Fill Stokes（ 拉桿次數(shù)） 5 Pullup Del（ 補(bǔ)償時(shí)間） 300ms Inject to（進(jìn)樣 口 ） GCInj1（ 進(jìn)樣口 1） Inject Speed（ 進(jìn)樣速度） 50uL/s Pre Inj Del（ 進(jìn)樣前補(bǔ)償時(shí)間） 500ms Pst Inj Del（ 進(jìn)樣后補(bǔ)償時(shí)間） 500ms Pst Cln Slv1（ 進(jìn)樣后清洗 溶劑 1） 3 Pst Cln Slv2（ 進(jìn)樣后清洗 溶劑 2） 0 靜態(tài)頂空（ HS）條件 Cycle（ 循環(huán)） HSInj Syringe（ 進(jìn)樣針體積） Sample Volume（進(jìn)樣體積） 250uL Incubat Temp（振蕩箱溫度） 140℃（液體 ） 、 150℃（ 干粉） Incubat time（振蕩時(shí)間） 20min（液體 ） 、 10min（ 干粉） Agi Speed（振蕩速度） 250rpm Agi on Time（振 蕩開啟 時(shí) 間） 5s Agi off Time（ 振蕩停止時(shí)間 ） 2s Syringe Temp（進(jìn)樣 針溫度 ） ℃ Fill Speed（針 桿速度 ） 200ul/s Pullup Del（ 補(bǔ)償時(shí)間 ） 1s Inject to（ 進(jìn)樣口 ） GC Inj1（ 進(jìn)樣口 1） Inject Speed（進(jìn)樣速度） 500ul/s Syr Flushing（氣體吹針時(shí)間） 120s GCRuntime（氣相運(yùn)行時(shí)間） 紅河學(xué)院本科畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)） 11 實(shí)驗(yàn)步驟 樣品的預(yù)處理 將草果 不同部位（殼、仁 、果 、莖、葉、芽）、不同產(chǎn)地 （紅河、 楚雄、 麗江 、大理、文山、玉溪）、不同炮制方法 （凈制 、炒制、鹽制、姜 制 、醋制） 的草果 于萬(wàn)能中藥粉碎機(jī) 中粉碎 ， 過 100 目 中藥篩，并儲(chǔ)存在密封袋中，貼上標(biāo)簽。 數(shù)據(jù)處理 采用中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng) 2020A 版、 Microsoft Office 20 中文版、 SPSS 中文版進(jìn)行 數(shù)據(jù) 處理。所以 分流比為 20:1 時(shí)草果提取 的揮發(fā)性成分多，而且準(zhǔn)確。 由 圖 3 36 可以看出，在 色譜柱 Rtx5MS、 DB170、 HPFFAP 中，色譜柱 HPFFAP 出峰 最多 ， 所以 色譜柱為 HPFFAP 時(shí)草果提取 的揮發(fā)性成分 最 多 。 3 結(jié)果與討論 18 圖 37 不同振 蕩溫度 對(duì) 草果 超聲提取頂空 進(jìn)樣 揮發(fā)性 成分 影響 的 GCMS 圖譜 注 ：從下往上 振 蕩溫度分別為 120℃、 130℃、 140℃、 150℃ 圖 38 不同振 蕩溫度 對(duì) 草果 超聲提取頂空 進(jìn)樣 揮發(fā)性 成分 影響 的 時(shí)間、 信號(hào)三維圖譜 紅河學(xué)院本科畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)） 19 圖 39 不同振 蕩 時(shí)間對(duì) 草果 超聲提取頂空 進(jìn)樣 揮發(fā)性 成分 影響 的 GCMS圖譜 注 ：從 下往上 振 蕩 時(shí)間 分別為 10min、 15min、 20min、 25min 圖 310 不同振 蕩 時(shí)間對(duì) 草果 超聲提取頂空 進(jìn)樣 揮發(fā)性 成分 影響 的 時(shí)間 、信號(hào)三維圖譜 3 結(jié)果與討論 20 由 圖 3 39 和 3 310 可以 看出 ， 草果 超聲提取頂空 進(jìn)樣 揮發(fā)性 成分的HS 振 蕩溫度為 140℃ ， 振 蕩時(shí)間為 20min 時(shí) ， GCMS 圖譜 出峰較多 、 重疊 峰 少、雜 峰少、峰形對(duì) 稱 、 分離效果 好 、節(jié)省 時(shí)間 ，因此 以下 干粉 頂空進(jìn)樣 實(shí)驗(yàn) 采用此HS 條件 為草果揮發(fā)性成分 測(cè)定 、 GCMS 指紋圖譜建立的 最佳 條件。 紅河學(xué)院本科畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)） 23 圖 315 不同提取 進(jìn)樣方式對(duì)草果 揮發(fā)性 成分 影響 的 GCMS 圖譜 注 ：從下往上 提取 進(jìn)樣方式分別為超聲提取直接進(jìn)樣、超聲提取頂空進(jìn)樣 、干粉頂空進(jìn)樣 圖 316 不同提取 進(jìn)樣方式對(duì)草果 揮發(fā)性 成分 影響 的 時(shí)間 、信號(hào)三維圖譜 由 圖 315 可以 看出， 在 同樣的 實(shí)驗(yàn) 、儀器條件下， 草果 干粉頂空進(jìn)樣提取的 揮發(fā)性 成分 最 多， 說明 對(duì)于揮發(fā)性成分 提取 而言，頂空提取比超聲提取消耗少，提取 效率高。 以下 實(shí)驗(yàn)采取此優(yōu)化條件進(jìn)行 。 紅河學(xué)院本科畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)） 25 表 31 草果不同 部位揮發(fā)性成分的測(cè)定結(jié)果 序號(hào) 保留 時(shí)間（ min） 化合物 名稱 分子式 結(jié)構(gòu)式 相對(duì) 百分含量（ %） 果 殼 仁 莖 葉 芽 1 2正丁基呋喃 2butylfuran C8H12O — — — — 2 4甲基 1戊醇4methyl1 pentanol C6H14O — — — — — 3 1戊烯 3醇 1penten3ol C5H10O — — — — — 4 α水芹烯 αphellandrene C10H16 5 松油烯 terpilene C10H16 — 6 2庚酮 2heptanone C7H14O — — — — — 7 庚醛 heptanal C7H14O — 8 檸檬烯 limonene C10H16 — — 9 1,8桉葉素 1,8cineole C10H18O 10 青葉醛 leaf aldehyde C6H10O — — — — 11 2正戊基呋喃 2pentyl furan C9H14O — — 12 萜品烯 terpinene C10H16 3 結(jié)果與討論 26 續(xù)表 31 序號(hào) 保留 時(shí)間 （ min） 化合物 名稱 分子式 結(jié)構(gòu)式 相對(duì) 百分含量（ %） 果 殼 仁 莖 葉 芽 13 （ E)β羅勒烯 (E)βocimene C10H16 — — — — — 14 對(duì) 傘花烴 pcymene C10H14 — 15 萜品油烯 terpinolene C10H16 — — — — — 16 2辛酮 2octanone C8H16O — — — — 17 辛醛 octanal C8H16O 18 乙偶姻 acetoin C4H8O2 — — — 19 丙酮醇 acetol C3H6O2 20 甲基庚烯酮 methylheptenone C8H14O 21 正己醇 hexyl alcohol C6H14O — 22 2壬酮 2nonanone C9H18O — — — — 23 壬醛 nonanal C9H18O 24 反 2辛烯醛 (E)2octenal C8H14O 紅河學(xué)院本科畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)） 27 續(xù)表 31 序號(hào) 保留 時(shí)間 （ min） 化合物 名稱 分子式 結(jié)構(gòu)式 相對(duì) 百分含量（ %） 果 殼 仁 莖 葉 芽 25 2,4二甲基苯乙烯 2,4dimethyl styrene C10H12 — — — — — 26 蘑菇醇 mushroom alcohol C8H16O — — — 27 α 蓽澄茄油烯 α cubebene C15H24 — 28 醋酸 glacial acetic acid C2H4O2 — 29 水合檜烯 sabinene hydrate C10H18O — — — 30 乙酸辛酯 octyl acetate C10H20O2 — — — — — 31 糠醛 furfural C5H4O2 — — 32 香茅醛 citronellal C10H18O — — — — 33 可巴烯 copaene C15H24O — — 34 癸醛 decanal C10H20O 35 2壬醇 2nonanol C9H20O — — — — — 36 蟻酸 formic acid CH2O2 — — — — — 3 結(jié)果與討論 28 續(xù)表 31 序號(hào) 保留 時(shí)間 （ min） 化合物