外文翻譯----關(guān)于柑橘青果病的兩種韌皮部桿菌的pcr檢測-wenkub
2023-05-19 11:43:12 本頁面
【正文】 MgCl 17 mM (NH4)2SO 10 mM β 巰基乙醇、 % W1 去垢劑、200μ g/mlBSA（ Gibco 公司生產(chǎn)）還有 的 Taq 聚合酶（ Gibco 公司生產(chǎn)） 。這樹脂轉(zhuǎn) 變成圓 柱體 ，然后用 2ml 80%的異丙醇洗滌兩次 ，接著加入 50ul 熱水（ 80℃）， 1min 后，這個(gè) Eppendorf離心管的圓狀物在 16000g 情況下離心 30s。 PCR 既可以直接在 10 折至 100 折的稀釋的懸浮液上完成，也可以在 懸浮液以 16000g離心 5min 后形成的沉淀物 和 用 100ul 滅菌水的稀釋液上進(jìn)行 。 提 取 植物中的 DNA 使用 默里和湯普生提出的 常規(guī) CTAB（十六烷基三甲基溴化銨）法來 抽 提 DNA。在這篇論文里， 我們研究最初細(xì)菌的特異性，必須要求 擴(kuò)增從柑橘葉片中抽提的韌皮部桿菌屬的 rDNA。雜交化驗(yàn)法的靈敏度和電子顯微鏡相近，這是一種適用于早期的檢測方法。 這種可以被定義但難以培養(yǎng)的屬名稱為韌皮部桿菌屬，默里和肖勒夫把它定義為難培養(yǎng)的有機(jī)體，并且歸屬于細(xì)菌類。 在這篇論文里，我們通過 PCR 方法擴(kuò)增 16SrDNA1160bp 序列片段，來檢測柑橘樹上的兩種病菌，分辨出兩者之間的差別和 獲得擴(kuò)增后的提取物 。 本科畢業(yè)論文 （或設(shè)計(jì)） 外文翻譯 中文 7100 字 本科畢業(yè)論文 (設(shè)計(jì) ) 外文翻譯 題 目 關(guān)于柑橘青果病的兩種韌皮部桿菌的 PCR 檢測 本科畢業(yè)論文 （或設(shè)計(jì)） 外文翻譯 1 關(guān)于柑橘青果病的兩種韌皮部桿菌的 PCR 檢測 原 文 來 源 ： Sandrine Jagoueix,Joseph Maric Bove,Monique detection of two‘Candidatus’liberobacter species associated with greeing disease of and Cellular Probes,1996,10:43～ 50 桑德里 .喬格 ，約瑟夫 .瑪麗波維 ，莫里庫 .卡利 （ 法國 波爾多第二大學(xué) 國家農(nóng)業(yè)研究院 細(xì)胞分子生物實(shí)驗(yàn)室 ） 摘 要 ： 青果病是 柑橘上一種嚴(yán)重的并且廣泛傳播的病害，在世界范圍內(nèi)有兩個(gè)主要柑橘生產(chǎn)區(qū)域亞洲和非洲。 關(guān)鍵詞： 柑橘青果病，韌皮部桿菌， 16SrDNA,PCR 診斷 前 言 青果病 是柑橘樹上危 害 嚴(yán)重和廣泛傳播的 病 害，分布在東亞（從巴基斯坦到中國），南非和東非，阿拉伯半島和 印度洋海域的 留尼旺島 ，毛里求斯和 馬達(dá)加斯加 。我們也發(fā)現(xiàn) 亞洲韌皮部桿菌和非洲韌皮部桿菌屬于兩種不同的菌系 ：亞洲菌系和非洲菌系。 用兩種不同的探針來檢測兩種不同的韌皮部桿菌很有必要（韌皮部桿菌在阿拉伯半島和 留尼旺島 ，毛里求斯島這些地方都相繼發(fā)現(xiàn)過） 實(shí)際上，抽 提 DNA 進(jìn)行圓點(diǎn)印跡 法能讓我們在很短時(shí)間內(nèi)迅速的進(jìn)入下一 步驟 。上面的擴(kuò)增片段中，可以用擴(kuò)增 DNA 的限制性內(nèi)切酶來區(qū)分不同的韌皮部桿菌的種類。 提取柑橘葉片研磨液，準(zhǔn)備 PCR。 方法 2： 取葉片中脈（大約 至 ） ，用刀片切成細(xì)小的碎片放在一個(gè)碟狀的可使用的研缽中，加入 1ml 的 TE 緩沖液（ 10mM Tris PH ,400 mM EDTA,1%SDS） ,另外加入 蛋白酶 K。重復(fù)該步驟，取出 100ul 清液（導(dǎo)出液） ，取兩個(gè) 10ul 的導(dǎo)出液 分別用作 PCR。 溫度循環(huán)器 可以調(diào)成以下系列步 驟來進(jìn)行 PCR： 92℃ 30s、 54℃ 30s 和 72℃ 60s，循環(huán) 35 次，以 fD1/rP1為 引 物； 92℃ 40s（變性）和 72℃ 90s（退火和延伸），循環(huán) 35次，以 OI2c/OI1, OI2c/OA1 或者 OI2c/OI1/OA1 為 引 物。 本科畢業(yè)論文 （或設(shè)計(jì)） 外文翻譯 3 在越南和毛里求斯 島 的不同的果園里采集 帶 有青果病癥狀的或不 帶 有癥狀的柑橘葉片， 把 這些樣品 用 塑料 袋 裝好 ， 放入通氣 的 箱子中， 然后 放在冰箱中處理或 由 郵件寄給波爾多 市 （交貨時(shí)間 一般為 4872h）。圖片 1 結(jié)果顯示 1160bp 片段的擴(kuò)增現(xiàn)象，在提取感染亞洲菌系（ 泳道 37）的甜橙樹苗樣品的 DNA一樣會(huì)出現(xiàn)。 當(dāng)普通 引 物（圖像 2， 泳道 1， 2， 4， 6， 8， 10，12 和 14）或特異引 物（圖像 2， 泳道 3， 5， 7， 9， 11， 13， 15 和 16） 在 100 折
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