高中生物專題2課題1微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)練習(xí)新人教版選修1(已修改)
2024-12-24 20:14 本頁面
【正文】 課題 1 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng) 一、培養(yǎng)基 1． 概念 人們按照微生物對 營養(yǎng)物質(zhì) 的不同需求，配制出供其 生長繁殖 的營養(yǎng)基質(zhì)。 2． 種類 按照培養(yǎng)基的 物理狀態(tài) 劃分為 液體 培養(yǎng)基和 固體 培養(yǎng)基。 3． 營養(yǎng)要素 各種培養(yǎng)基一般都含有水、 碳源 、 氮源 、 無機(jī)鹽 ， 此外還要滿足微生物生長對 pH、 特殊營養(yǎng)物質(zhì) 以及 氧氣 的要求。 二、無菌技術(shù) 1． 獲得純凈培養(yǎng)物 關(guān)鍵是防止 外來雜菌 的入侵 ， 具體操作如下： (1)對實(shí)驗(yàn)操 作的 空間 、操作者的衣著和手進(jìn)行 清潔 和 消毒 。 (2)將用于微生物培養(yǎng)的 器皿 、 接種用具 和 培養(yǎng)基 等器具進(jìn)行滅菌。 (3)為避免周圍環(huán)境中 微生物 的污染 ， 實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在 酒精燈火焰附近 進(jìn)行。 (4)實(shí)驗(yàn)操作時應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與 周圍的物品 相接觸。 2． 消毒和滅菌 (1)消毒是指使用較為 溫和 的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或 內(nèi)部一部分 微生物 (不包括芽孢和孢子 )。常用的方法有 煮沸 消毒法和 化學(xué)藥劑 消毒法。 (2)滅菌是指使用 強(qiáng)烈 的理化因素殺死物體內(nèi)外 所有 的微生物 (包括芽孢和孢子 )。常見的方法有： 灼燒 滅菌、 干熱 滅菌、 高壓蒸汽 滅菌。 三、大腸桿菌的純化培養(yǎng) 1． 制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基 ?????最常用的細(xì)菌培養(yǎng)基： 牛肉膏蛋白胨 固體培養(yǎng)基配制步驟：計(jì)算 → 稱量 → 溶化 → 滅菌 → 倒平板 2． 純化大腸桿菌 (1)純化培養(yǎng)方法：在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上純化大腸桿菌 ， 最常用的方法有 平板劃線 法和稀釋涂布平板 法。 (2)純化培養(yǎng)的原理：想方設(shè)法在培養(yǎng)基上得到由一個細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的 菌落 ， 即獲得較純的菌種。 (3)平板劃線法：通過 接種環(huán) 在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù) 劃線 的操作 ， 將聚集的菌種逐步 稀釋 分散到培養(yǎng)基的表面。其具體操作是： ① 將 接種環(huán) 放在火焰上燃燒 ， 直到接種環(huán) 燒紅。 ②在火焰旁冷卻 接種環(huán) ， 并打 開棉塞。 ③ 將試管口通過 火焰 。 ④ 將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中 ， 沾取一環(huán)菌液。 ⑤ 將試管口通過火焰 ， 并塞上棉塞。 ⑥ 左手將皿蓋打開一條縫隙 ， 右手將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi) ， 劃三到五條 平行線 ， 蓋上皿蓋。注意不要劃破培養(yǎng)基。 ⑦ 灼燒 接種環(huán) ， 待其冷卻后 ， 從第一區(qū)域劃線的末端開始往第二區(qū) 域內(nèi)劃線。重復(fù)以上操作，在三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。注意不要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連。 ⑧將平板 倒置 放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 (4)稀釋涂布平板法：將菌液進(jìn)行一系列的梯度 稀釋 ， 然
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