輸血科操作規(guī)程(已修改)
2024-11-04 12:41 本頁面
【正文】 第一篇：輸血科操作規(guī)程目錄輸血前檢測實驗程序改良低離子聚凝胺法實驗操作規(guī)程ABO 血型鑒定Rh（D）血型鑒定抗體篩選和鑒定試驗輸血前檢測實驗程序?qū)嶒炓笱搴脱獫{都可以用于交叉實驗和抗體檢測，最好是血清標(biāo)本，標(biāo)本使用限制在 3 天內(nèi)，含有肝素等抗凝標(biāo)本可以用凝血酶或硫酸魚精蛋白處理使其凝集析出血清。允許通過靜脈輸液口采集標(biāo)本，但必須丟棄受殘留靜脈輸液影響的 5ml標(biāo)本。一般不允許使用溶血標(biāo)本，對急性溶血性貧血和燒傷病人的溶血標(biāo)本，在實驗前后必須做溶血程度的比較。標(biāo)本和輸血申請單上的所有資料必須填寫清楚并完全符合，否則應(yīng)重抽標(biāo)本。對所有用過的獻血員和受血者標(biāo)本必須在 16℃冰箱至少保存 7 天，所有實驗都必須保證觀察和記錄同時進行，且記錄和資料都必須至少保存 5 年。血型檢測要求完成病人 ABO 正反定型、Rh（D）。交叉試驗 受血者交叉配血時所用的標(biāo)本必須是輸血前 3 天之內(nèi)的。 配血時要逐項核對輸血申請單、受血者和供血者血樣，復(fù)查受血者和供血者ABO 血型（正、反定型），并常規(guī)檢查患者 Rh（D）血型（急診搶救患者緊急輸血時 Rh（D）檢查除外），正確無誤時可進行交叉配血。 凡是輸注全血、濃縮紅細胞、紅細胞懸液、洗滌紅細胞、冰凍紅細胞、濃縮紅細胞、手工分離濃縮血小板等患者，應(yīng)該進行交叉配血試驗。機器單采濃縮血小板、冷沉淀、新鮮血漿應(yīng)與 ABO 血型同型輸注。 按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》要求完成凝聚胺交叉試驗和檢測不完全抗體的交叉試驗（聚凝胺法、抗人球蛋白法）。除緊急輸血和自身輸血外，所有輸入紅細胞的其他制品均要求做血交叉試驗。 另外必須開展的試驗有抗人球蛋白試驗，抗體篩選實驗。改良低離子聚凝胺法實驗操作規(guī)程目的：減少交叉配血試驗的假陽性。適用范圍：交叉配血、血型鑒定、抗體篩檢血型血清學(xué)試驗。試劑來源：(臺資)珠海貝索生物技術(shù)有限公司采集與處理： 靜脈采血 34ml，并觀察是否溶血、乳糜血，如有此現(xiàn)象應(yīng)再留標(biāo)本并做記錄。 檢查留樣試管、標(biāo)簽、標(biāo)號、姓名、血型是否齊全，如有遺漏應(yīng)拒收。 將血標(biāo)本試管放 37℃水浴中 10 分鐘，離心。標(biāo)準(zhǔn)操作： 主（次）管加入受（供）血者血清 2 滴，加供（受）血者 4%紅細胞鹽水懸液 1 滴。 各管加 ，混勻，靜置 1 分鐘，各管加 Polybrene Reagent 1 滴，混勻，3000轉(zhuǎn)/分離心 15 秒，倒出上清液（殘留約 ），輕搖，肉眼可見明顯的凝集狀（如無凝集須重做），加假凝集清除液 1 滴于管底，輕搖，凝集 1 分鐘內(nèi)消失呈均勻混懸液，為陰性，凝集 1 分鐘內(nèi)不能被消除，即為陽性。結(jié)論：陽性表示受（供）血者血清中含供（受）者紅細胞血型 Ag 相應(yīng)的 Ab（IgG、IgM），供受血者不相容，陰性表示供受血者相容。注意事項： 操作者須嚴(yán)格按照操作說明進行試驗，紅細胞濃度、血清滴量、反應(yīng)時間、離心速度等均可影響試驗結(jié)果。 若為弱凝集結(jié)果，本試劑盒按下述試驗操作方法，還可進一步提高試驗靈敏度。試驗操作方法如下： 檢測管中加試驗血清 2 滴，4%紅細胞鹽水懸液 1 滴。 加 ，混勻，靜置 1 分鐘，各管加Polybrene 2 滴混勻，3000 轉(zhuǎn)/分離心 15 秒，倒出上清液（殘留約 01ml），輕搖，肉眼可見明顯的凝集狀（如無凝集須重做），加假凝集清除液 1 滴于管底，輕搖，凝集 1 分鐘內(nèi)消失呈均勻混懸液，為陰性，凝集1分鐘內(nèi)不能被消除，即為陽性。 檢測標(biāo)本應(yīng)為非抗凝血，如標(biāo)本中含抗凝成分的含量過高明顯干擾凝集反應(yīng)，可適當(dāng)調(diào)加 Promoter 的滴量，以中和抗凝成分的干擾。 試驗溫度以 2030℃為宜，若為寒冷凝集，37℃水浴5分鐘，在此溫下觀察，凝集消失，說明冷凝集素存在。 肉眼直觀判斷的結(jié)果應(yīng)確保與顯微鏡下觀察結(jié)果一致，直觀不能明確判斷的可疑結(jié)果須鏡檢，鏡下：陰性結(jié)果應(yīng)該是單個 RBC 均勻分布，有 RBC 凝集狀散在的即為弱陽性。 試驗質(zhì)量檢驗：取自身血清與自身紅細胞用本試劑盒試驗方法作自身陰性對照試驗，取 IgG 抗 D 血清與 RhD（+）RBC 用本試劑盒試驗方法作陽性對照實驗，對照實驗符合，試劑有效。 疑難結(jié)果以抗人球蛋白實驗（AGT）作最終判斷試驗，試驗操作參照經(jīng)典AGT（在AGT中， 37℃孵育時間可縮短至 10 分鐘）。 本試劑盒適宜大多數(shù)血型抗體的檢測，但對 kell 血型系統(tǒng)抗體（主要存在白種人群）檢測效果較差，由于我國黃種人群中 kell 血型系統(tǒng)抗體陽性者罕見，因此適合在國內(nèi)推廣?？裳a充抗人球蛋白試驗，以提高對 kell 血型系統(tǒng)抗體的檢出率。ABO 血型鑒定測定原理根據(jù)紅細胞上有或無 A 抗原或／和 B 抗原，將血型分為 A 型、B 型、AB 型及O 型 4 種?？衫眉t細胞凝集試驗，通過正、反定型準(zhǔn)確鑒定 ABO 血型。所謂正定型，是用已知抗—A 和抗—B 分型血清來測定紅細胞上有無相應(yīng)的 A 抗原或／和 B 抗原；所謂反定型，是用已知 A 細胞和 B 細胞來測定血清中有無相應(yīng)的抗—A或／和抗—B。標(biāo)本種類及收集要求 受檢者血清； 枸緣酸鈉抗凝血或未稍取血，受檢者血液制成 5 ％紅細胞鹽水懸液使用。 標(biāo)本出現(xiàn)中度溶血者，為不合格標(biāo)本，不能用于檢測。操作步驟 、試管法 取潔凈小試管(內(nèi)徑 10mm60mm)3 支，分別標(biāo)明抗—A、抗—B 和抗—A十 B，用滴管分別加抗—A、抗—B 和抗—A 十 B 分型血清各 l 滴（約 50
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