同源重組的應(yīng)用專題講義(已修改)
2025-03-04 10:16 本頁面
【正文】 同源重組的應(yīng)用09生工夏章傳同源重組概述同源重組（ homologous rebination）◆ 即一般重組，是染色體之間進(jìn)行遺傳信息的方式之一，幾乎所有生物都發(fā)生同源重組?！?如真核生物減數(shù)分裂中染色體的交換，細(xì)菌結(jié)合、轉(zhuǎn)化、普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)的遺傳重組都屬于同源重組?！?同源重組要求兩個(gè) DNA分子的序列同源，同源區(qū)越長(zhǎng)越有利于重組；同源區(qū)太短，則難于發(fā)生重組。因?yàn)樗蕾囉诖蠓秶鶧NA同源順序的聯(lián)會(huì)，負(fù)責(zé) DNA配對(duì)和重組的蛋白質(zhì)因子無堿基序列特異性，只要兩條 DNA序列相同或相近，重組便可以在聯(lián)會(huì)部分的任何位置發(fā)生。當(dāng)然，也存在重組熱點(diǎn)，即某些序列發(fā)生重組的概率高于其它序列?！?同源重組也是對(duì)損傷 DNA修復(fù)的一種重要途徑，即重組修復(fù)。同源重組的應(yīng)用◆ 同源重組的應(yīng)用價(jià)值 主要是用于基因敲除（ knockout）和基因敲進(jìn) (knockin)? ① 研究基因功能? ② 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的制備? ③ 用于藥物篩選的動(dòng)物模型? ④ 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物可作為 “生物反應(yīng)器 ”生產(chǎn)藥物基因敲進(jìn)和敲進(jìn)◆ 基因敲除（ knock out of gene） :是基因打靶技術(shù)的一種，指外源 DNA與受體細(xì)胞基因組中序列相同或相近的基因發(fā)生同源重組，從而代替受體細(xì)胞基因組中的相同或相似的基因序列，整合入受體細(xì)胞的基因組中。◆ 基因敲進(jìn)（ knock in of gene）：利用基因同源重組，將外源有功能的基因轉(zhuǎn)入基因組中不存在或已失活的細(xì)胞中與其基因組中同源序列進(jìn)行同源重組，在細(xì)胞內(nèi)獲得表達(dá)，這一技術(shù)稱為基因敲進(jìn)?！?基因敲除和敲進(jìn)的原理都是同源重組，即同源雙交換，用克隆的外源基因取代基因組中野生型等位基因。◆ 兩者不同點(diǎn)在于，基因敲除導(dǎo)入的外源基因是失活的、無功能的基因，基因敲進(jìn)導(dǎo)入的是有活性和功能的基因。因而兩者的具體用途有所不同?！?基因敲除和敲進(jìn)都可用于基因功能的研究，基因敲進(jìn)則也可用于突變基因的修復(fù)?！? 基因敲除是自 80年代末以來發(fā)展起來的一種新型分子生物學(xué)技術(shù)，是通過一定的途徑使機(jī)體特定的基因失活或缺失的技術(shù)。通常意義上的基因敲除主要是應(yīng)用 DNA同源重組原理，用設(shè)計(jì)的同源片段替代靶基因片段，從而達(dá)到基因敲除的目的。隨著基因敲除技術(shù)的發(fā)展，除了同源重組外，新的原理和技術(shù)也逐漸被應(yīng)用，比較成功的有基因的插入突變和
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1