【正文】 本指南由中國(guó)疾病預(yù)防控制中心性病艾滋病預(yù)防控制中心艾滋病參比實(shí)驗(yàn)室組織有關(guān)專家撰寫，由中國(guó)疾病預(yù)防控制中心批準(zhǔn)執(zhí)行。編寫主持人：蔣巖編寫人員： 潘品良 蔣巖 李敬云 鐘平 尚紅 李太生審核咨詢專家及技術(shù)人員：邵一鳴 康來儀 朱效科 王佑春 汪寧 朱紅 郭志宏 季陽(yáng) 劉海林 肖瑤 邱茂鋒 馬春濤編寫單位：中國(guó)疾病預(yù)防控制中心性病艾滋病預(yù)防控制中心 參編單位：中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院上海市疾病預(yù)防控制中心中國(guó)醫(yī)科大學(xué)北京協(xié)和醫(yī)院技術(shù)顧問： , 美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院 過敏及傳染病研究所 . 美國(guó) 大學(xué)醫(yī)學(xué)中心實(shí)驗(yàn)室克林頓基金中國(guó)艾滋病防治項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)室專家 . 美國(guó)華盛頓大學(xué)新英格蘭研究所 . 加拿大公共衛(wèi)生局疾病預(yù)防控制中心國(guó)家免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)室前 言隨著病毒載量檢測(cè)在艾滋病臨床輔助診斷和抗病毒治療監(jiān)測(cè)以及艾滋病科研工作中的廣泛應(yīng)用，我國(guó)開展該項(xiàng)檢測(cè)工作的實(shí)驗(yàn)室日益增多。自年艾滋病實(shí)驗(yàn)室首次引進(jìn)病毒載量檢測(cè)技術(shù)，截至年底，全國(guó)已經(jīng)配備了近臺(tái)病毒載量檢測(cè)儀，覆蓋了疾控、醫(yī)院、檢疫、軍隊(duì)等系統(tǒng)。目前，雖然許多實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)將病毒載量檢測(cè)納入艾滋病相關(guān)輔助診斷和治療監(jiān)測(cè)工作，但大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室開展工作的時(shí)間較短，經(jīng)驗(yàn)不足，因此，急需加強(qiáng)該領(lǐng)域的培訓(xùn)和質(zhì)量控制工作，以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。為了加強(qiáng)質(zhì)控和保證檢測(cè)質(zhì)量，并得到國(guó)際上的認(rèn)可，艾滋病參比實(shí)驗(yàn)室年開始參加美國(guó)組織的病毒載量檢測(cè)能力驗(yàn)證工作。在通過考核和積累經(jīng)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，年啟動(dòng)了國(guó)內(nèi)病毒載量檢測(cè)能力驗(yàn)證工作。在積極組織實(shí)驗(yàn)室能力驗(yàn)證的同時(shí)，艾滋病參比實(shí)驗(yàn)室也對(duì)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員進(jìn)行培訓(xùn)，積極開展室內(nèi)質(zhì)控。這些工作對(duì)提高病毒載量的檢測(cè)技術(shù)，保證質(zhì)量起到了重要作用。為了進(jìn)一步規(guī)范艾滋病實(shí)驗(yàn)室病毒載量檢測(cè)，建立標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)量控制程序，準(zhǔn)確開展各項(xiàng)檢測(cè)及質(zhì)量控制工作，特制定本指南。本指南是根據(jù)各種病毒載量檢測(cè)方法的技術(shù)要求，結(jié)合現(xiàn)行的國(guó)內(nèi)外相關(guān)技術(shù)規(guī)范而制定。本指南針對(duì)病毒載量檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)室設(shè)置、樣品管理、檢測(cè)技術(shù)、質(zhì)量控制、生物安全等方面提出指導(dǎo)。本指南自年初正式開始編寫，性病艾滋病預(yù)防控制中心多次組織了有國(guó)內(nèi)外專家參加的指南編寫專項(xiàng)技術(shù)咨詢會(huì)，與會(huì)專家對(duì)指南提出了很多建設(shè)性意見和建議，美國(guó)病毒載量檢測(cè)質(zhì)量保證實(shí)驗(yàn)室專家多次對(duì)指南進(jìn)行仔細(xì)的審閱和具體指導(dǎo)。指南編寫過程中，也仔細(xì)聽取了實(shí)驗(yàn)室一線檢測(cè)人員的具體需求和建議，并補(bǔ)充了大量的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，包括病毒載量檢測(cè)值的穩(wěn)定性、凍融影響實(shí)驗(yàn)與不同檢測(cè)方法之間比較的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)等。在此基礎(chǔ)上，經(jīng)過多次修訂、補(bǔ)充和審定，于年月完成《病毒載量檢測(cè)及質(zhì)量保證指南》的最后定稿。由于國(guó)內(nèi)外還沒有可作為參考的病毒載量檢測(cè)及質(zhì)量控制的相關(guān)指南，因此本指南主要提出一些原則上的參考建議，其中定有不妥之處，希望廣大同仁提出意見，以便不斷完善。致 謝在本指南的編寫過程中，世界衛(wèi)生組織、克林頓基金中國(guó)艾滋病防治項(xiàng)目和美國(guó)等國(guó)際組織與機(jī)構(gòu)給予了大力支持，全國(guó)病毒載量檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室一線操作人員提出了許多建設(shè)性的意見和具體需求，艾滋病參比實(shí)驗(yàn)室工作人員毛瑋、陶曉霞進(jìn)行了大量的補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)和文字編輯工作，才保證本指南的編寫順利完成，在此一并向他們表示真誠(chéng)的感謝。中國(guó)疾病預(yù)防控制中心性病艾滋病預(yù)防控制中心主任吳尊友研究員在本指南編寫過程中提出了重要的修改意見，在此特別致謝。病毒載量檢測(cè)及質(zhì)量保證指南（版）目錄第一章 總則第二章 實(shí)驗(yàn)室設(shè)置第三章 樣品的采集、處理、保存、運(yùn)輸?shù)谒恼?常用病毒載量檢測(cè)方法簡(jiǎn)介第五章 室內(nèi)質(zhì)量控制第六章 外部質(zhì)量控制第七章 實(shí)驗(yàn)室生物安全附表 常見問題分析和處理附表 病毒載量檢測(cè)樣品送檢及接收單附表 病毒載量檢測(cè)能力驗(yàn)證樣品接收專用單附表 病毒載量檢測(cè)報(bào)告單附表 病毒載量能力驗(yàn)證結(jié)果專用報(bào)告單（)附表 病毒載量能力驗(yàn)證結(jié)果專用報(bào)告單（)參考文獻(xiàn)縮略語(yǔ)第一章 總 則意義 病毒載量是艾滋病防治工作中一項(xiàng)重要的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)指標(biāo)。檢測(cè)病毒載量可以監(jiān)控和預(yù)測(cè)病程，指導(dǎo)艾滋病患者的抗病毒治療，包括確定治療時(shí)機(jī)、選擇治療方案、評(píng)價(jià)治療效果；結(jié)合疾病臨床癥狀和其它實(shí)驗(yàn)指標(biāo)，可作為早期感染診斷的輔助手段；還可用于嬰兒早期感染的輔助診斷以及采供血機(jī)構(gòu)樣品的窗口期檢測(cè)。為了準(zhǔn)確地檢測(cè)病毒載量，必須對(duì)開展病毒載量檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行規(guī)范化管理和質(zhì)量控制，才能保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。目的 指導(dǎo)病毒載量檢測(cè)工作，規(guī)范實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制與管理。適用范圍 適用于我國(guó)開展病毒載量檢測(cè)工作的所有實(shí)驗(yàn)室。第二章 實(shí)驗(yàn)室設(shè)置各種病毒載量檢測(cè)方法需要相應(yīng)的輔助設(shè)備才能完成檢測(cè)。以下為病毒載量檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室不同分區(qū)內(nèi)必備的輔助設(shè)備及耗材。樣品處理區(qū)：：二級(jí)（320XXg，可離心 管子）：4℃，20℃，80℃：℃（μ、μ、μ），為專用設(shè)備（無(wú)和酶）：震動(dòng)頻率可調(diào) 一次性工作服、帽、口罩、無(wú)粉手套、鞋套試劑準(zhǔn)備區(qū)：（或密閉工作臺(tái)）（μ、μ、μ），為專用設(shè)備（18000g，可離心 管子）：4℃，20℃ 計(jì)時(shí)器，震動(dòng)頻率可調(diào)（無(wú)、酶） 管子（無(wú)和酶）和 試管架、帽、口罩、無(wú)粉手套、鞋套擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)： 病毒載量檢測(cè)儀（μ、μ、μ）：4℃，20℃ ( 41℃ )：震動(dòng)頻率可調(diào)（無(wú)、酶）、帽、口罩、無(wú)粉手套、鞋套 病毒載量檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室設(shè)備分布示意圖病毒載量檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室設(shè)備分布示意圖病毒載量?jī)x,加樣器離心機(jī)冰箱，4℃水浴箱洗手池紫外燈擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)生物安全柜加樣器離心機(jī)冰箱，20℃冰箱水浴箱洗手池紫外燈樣品處理區(qū)超凈工作臺(tái)加樣器漩渦振蕩器冰箱，4℃實(shí)驗(yàn)臺(tái)紫外燈試劑準(zhǔn)備區(qū)：各區(qū)獨(dú)立、控制風(fēng)向、因地制宜、方便工作。具體來說： ，有條件各區(qū)內(nèi)可分別設(shè)置緩沖間，以保證不同區(qū)之間始終完全分隔開。 試劑準(zhǔn)備區(qū)和樣品處理區(qū)可保持低度正壓（或常壓）狀態(tài)，使空氣流向始終由室內(nèi)向外，以避免擴(kuò)增污染物進(jìn)入此區(qū)域。 擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)可保持低度負(fù)壓狀態(tài)，使空氣流向始終由室外向內(nèi)，以防止擴(kuò)增產(chǎn)物造成其他區(qū)域的交叉污染?？砂惭b排風(fēng)扇或其他排風(fēng)裝置。，即工作流向只能從試劑準(zhǔn)備區(qū)開始，到樣品處理區(qū)，然后再到擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。第三章 樣品的采集、處理、保存和運(yùn)輸 樣品采集、處理、保存和運(yùn)輸，按照所使用檢測(cè)方法的要求嚴(yán)格執(zhí)行。用于病毒載量檢測(cè)的樣品推薦采用抗凝血漿。 樣品的采集 采樣