【正文】 實驗診斷學(xué)實驗診斷緒論一、臨床檢驗與實驗診斷的關(guān)系檢驗醫(yī)學(xué) (Laboratory medicine) 臨床檢驗（ Clinical Laboratory Science） 實驗診斷（ Laboratory diagnosis） 臨床檢驗：標(biāo)本 → 檢測 → 客觀資料（結(jié)果、數(shù)據(jù)、 信息）以檢驗方法的研究和改進(jìn)為重點。實驗診斷：客觀資料 → 分析和思維 → 客觀依據(jù) （診療、研究、保健 )以檢驗信息的臨床應(yīng)用為 重點。二、實驗診斷學(xué)的發(fā)展簡史l （一）最早和最原始的實驗診斷l(xiāng) Hippoerates希臘名醫(yī)。l 時間：公元前 400年l 方法：感官直視法（色、嗅、味等）l 標(biāo)本：尿液（二）臨床血液學(xué)檢驗系統(tǒng)地科學(xué)地研究血細(xì)胞從 16世紀(jì)末至 17世 紀(jì)初顯微鏡發(fā)明和改良開始。方法學(xué)變化 傳統(tǒng)的方法：以手工操作，顯微鏡，計數(shù)板為標(biāo)志 現(xiàn)代方法：以血細(xì)胞自動分析儀為主要標(biāo)志血細(xì)胞研究及檢驗方法發(fā)展簡史發(fā)展史的簡要過程： 顯微鏡 → RBC→WBC→PLT→ 計數(shù) → 染色 → 血細(xì)胞功能 → BM穿刺針 → 血細(xì)胞分析儀（電 阻 → 激光 → 光學(xué)、電學(xué)、染色相結(jié)合） 手工分析 → 儀器分析（三）臨床化學(xué)檢驗發(fā)展簡史19世以前觀察人體化學(xué)組成變化↓1918年 Lichtwitz提出 “臨床化學(xué) ”名詞↓1931年 Peter 等出版 《 臨床化學(xué) 》 專著↓19世紀(jì)末顯量分析和容量分析↓20世紀(jì)初； Folin比色分析↓50年代酶活力測定↓80年代自動化分析（超微量）（四）臨床微生物學(xué)檢驗發(fā)展簡史17世紀(jì)末顯微鏡觀察微生物↓19世紀(jì)年代創(chuàng)巴氏消毒法（ Pasteur）↓Lister創(chuàng)建無芯外科手術(shù)↓Koch 證明微生物是傳染病的致病因子↓細(xì)胞培養(yǎng)與染色技術(shù)↓1900年后病原微生物分離證實↓1929年 Fleming發(fā)現(xiàn)青霉素↓分子微生物檢驗微生物↓病原微生物↓抗生素↓殺滅病原微生物（變異）（五）臨床免疫學(xué)檢驗發(fā)展簡史天花（公元 713~741唐代）↓預(yù)防天花（人痘苗、牛痘苗）↓細(xì)胞免疫↓體液免疫↓1901年 “免疫學(xué) ”名詞提出↓血清學(xué)（抗體：抗原）↓1958年 Bar克隆選擇學(xué)說↓T細(xì)胞亞群↓抗體分子結(jié)構(gòu)↓1975年單克隆抗體制備↓Ig基因重排↓細(xì)胞因子（受體、基因、活性）↓分子免疫學(xué)免疫學(xué)實驗診斷細(xì)胞免疫檢驗： ICC， 淋巴細(xì)胞亞群分類與功 能檢測。體液免疫檢驗： Ag， Ab， C等檢測（六）實驗診斷學(xué)發(fā)展可發(fā)現(xiàn)以下特點：從簡單到復(fù)雜，從形態(tài)到功能，從手工到儀器（自動化）技術(shù)創(chuàng)新，方法創(chuàng)新，觀念創(chuàng)新是發(fā)展的動力臨床應(yīng)用與實驗技術(shù)相互促進(jìn)，共同提高。三、實驗診斷學(xué)的現(xiàn)狀與展望（一）自動化（例舉 10種）自動血細(xì)胞分析儀 自動細(xì)胞鑒定儀自動生化分析儀 自動血鏡養(yǎng)儀自動化子發(fā)光分析儀 自動尿液分析儀自動放免分析儀 自動染色體分析儀自動酶免分析儀 流式細(xì)胞儀（二）試劑商品化（ 1） FDA、 SDA認(rèn)可試劑（ 2）與儀器配套試劑（ 3）質(zhì)優(yōu)價廉試劑（自評）（三）方法學(xué)的標(biāo)準(zhǔn)化國際標(biāo)準(zhǔn)化國內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)化區(qū)域內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)化原則：精密、準(zhǔn)確、簡便、快速（四） POCT（ Point of care test）：意譯： 床邊檢驗 即刻檢驗特點：操作簡便、試劑穩(wěn)定、快速、儀器設(shè)備簡單適用：急診室、診所、家庭檢測等缺點：標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)矩化、質(zhì)檢等較差（五）影響因素與質(zhì)量保證（六）循證檢驗醫(yī)學(xué)(evidence based laboratory medicine， EBLM）四、臨床應(yīng)用：疾病診斷（病因、鑒別） 療效觀察預(yù)后判斷 預(yù)防保健科學(xué)研究 結(jié)果解釋(1)(2)同一疾病不同結(jié)果 同一結(jié)果不同疾病 — 結(jié)合臨床五、學(xué)習(xí)的重點與方法 方法：掌握共性知識（先）：概念性、普通性、 實用性 注意個性知識（后）：特殊性、專業(yè)性、 復(fù)雜性 重點： 掌握各項檢驗的適應(yīng)證與選用原則 掌握參考及其臨床意義 了解原理、方法、影響因素等第一章 血液檢查一、血液檢查的相關(guān)知識血液的基本功能（ 1）參與新陳代謝（ 2）參與各種功能調(diào)節(jié)（ 3）維持內(nèi)、外環(huán)境的相對平衡參與機(jī)體的每一個功能活動血液的組成血液成分改變與疾病的關(guān)系血液成分改變 ← → 疾?。ㄙ|(zhì)與量） （組織、器官、細(xì)胞）血液常規(guī)檢驗的概念變化（ 1）傳統(tǒng)血常規(guī)： RBC、 Hb、 WBC、 DC（ 手工法）（ 2）現(xiàn)代血常規(guī)： 二分類、三分類、五分類全自動 血細(xì)胞分析儀 十多次參數(shù)至幾十項參數(shù)血細(xì)胞分析儀簡介血細(xì)胞分析儀發(fā)展簡史：1953年 第一名血細(xì)胞分析儀由 Coulter發(fā)明問世60年代 血細(xì)胞分析用于 RBC、 Hb、 WBC、 MCV、 MCH、 MCHC、 HCT測定70年代 增加 Pet測定80年代 增加 DC、 RDW、 PCV等新項目90年代 增加 Ret， 計數(shù)及分類計數(shù)等成為醫(yī)學(xué)檢 驗領(lǐng)域的重要儀器之一。血細(xì)胞分析儀功能特點（ 1）多參數(shù)分析 20或 40多項（ 2）精確度高 CV：＜ 5%~10%（ 3） 速度快 50~120T/h（ 4） 用血量少 ＜ 250ml（ 個別＜ 6ul）（ 5） 結(jié)果簡明 參數(shù)、含義報告、直方圖式或散點圖（ 6）質(zhì)檢可靠 配套質(zhì)控品、全國或全世界質(zhì)控網(wǎng)絡(luò)監(jiān)測（ 7）自動清洗 各標(biāo)本間互染率＜ 1%（ 8）報警功能 異常結(jié)果自動報警（ 9）有效篩查 三分類復(fù)檢＜ 30%，五分類＜ 15%，提示 異常細(xì)胞血細(xì)胞分析儀的報告方式（ 1）三分類報告 (參數(shù)、含義報告、直方圖 )（ 2）五分類儀器（增加散點圖）l DF2F單核細(xì)胞， G淋巴細(xì)胞， H中性粒細(xì)胞， I血小板l DF1： A單核細(xì)胞， B淋巴細(xì)胞， C中性粒細(xì)胞，D嗜性粒細(xì)胞， E血小板。在 DF1中由于淋巴細(xì)胞或小單核細(xì)胞與嗜堿性細(xì)胞分布有重疊，故不能直接觀察。只有在 VCS三維圖中才能區(qū)分第二種散點圖l 各分類區(qū)細(xì)胞分別與血涂片中的白細(xì)胞類型相對應(yīng)： ① 噪聲、 ② 幼紅細(xì)胞、 ③ 聚集血小板、 ④ 淋巴與嗜堿粒細(xì)胞、⑤ 大的未染色細(xì)胞（ LUC）， 原始細(xì)胞的光散射比 LUC更強(qiáng)、 ⑥ 單核細(xì)胞、 ⑦ 中性粒細(xì)胞、 ⑧ 嗜酸性粒細(xì)胞二、紅細(xì)胞計數(shù)和血紅蛋白測定紅細(xì)胞起源，演化和發(fā)育 HIV ↓ EPOTHSC→BFUE→CFUE→ 原紅 → 早紅 → 中紅 → 晚紅 → 成熟紅 IL3 2448hBM:←72h→|←→ bloodl 紅細(xì)胞分化發(fā)育成熟： 5天l 35次分裂l 原紅 →→→→→ RBC(816個 )l Hb開始合成階段：早幼紅l 調(diào)節(jié)： EPO/IL3/睪丸激素 /神經(jīng)體液 /晚幼紅l 紅細(xì)胞數(shù)量動態(tài)平衡l 120l RBC生成 ←←→→ RBC破壞l （ BM）