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熒光原位雜交更新ppt課件(已修改)

2025-05-15 05:22 本頁面
 

【正文】 熒光原位雜交技術(shù) 簡 介 ? 原位雜交技術(shù) ( in situ hybridization, ISH) Gall和Pardue 1969年建立。 用標(biāo)記的 DNA或 RNA作為探針,對組織細胞內(nèi)的核酸或有絲分裂中期的染色體進行原位檢測和觀察。 ? 最初的探針大多以同位素 3H、 32P等標(biāo)記,但因同位素標(biāo)記探針對人體有放射損害、實驗周期長、放射自顯影的分辨率有限、環(huán)境污染等缺點,給研究及實際應(yīng)用帶來了諸多不便。 ? 熒光原位雜交技術(shù)( Fluorescence in situ hybridization , FISH) 利用 熒光物質(zhì)標(biāo)記探針 (直接或間接),再進行雜交,可通過熒光顯微鏡對靶序列進行 定性、定位和定量分析 ? FISH技術(shù)的應(yīng)用已經(jīng)證實或發(fā)現(xiàn)了用經(jīng)典細胞遺傳學(xué)方法無法證實或發(fā)現(xiàn)的腫瘤染色體改變,成為銜接細胞遺傳學(xué)和分子遺傳學(xué)之間的一座橋梁。開創(chuàng)了一個新的學(xué)科 —— 分子細胞遺傳學(xué)。 雜交流程 : 探針和靶序列 直接標(biāo)記和間接標(biāo)記 探針和靶序列成為單鏈 熒光基團的步驟 熒光標(biāo)記的 DNA探針 ( 200500
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