儀器分析紫外-可見分光光度法(已修改)
2025-05-14 06:27 本頁面
【正文】 第一章 紫外 可見分光光度法 ? 掌握 紫外 可見分光光度法的基本原理 及其方法應(yīng)用； ? 熟悉 紫外 可見分光光度計的結(jié)構(gòu)； 教學(xué)目標(biāo) （一）、知識目標(biāo) ? 熟練操作各種型號的 紫外 可見分光光度計； ? 能應(yīng)用 紫外 可見分光光度法進(jìn)行樣品的 定性、定量分析。 （二）、能力目標(biāo) 利用物質(zhì)對 紫外 可見光 的 選擇性吸收 ，用 紫外 可見分光光度計 測定物質(zhì)對紫外 可見光的吸收程度并進(jìn)行 定性、定量 分析。 紫外 可見分光光度法簡介 光的波粒二象性 波動性 粒子性 一、光的基本性質(zhì) 波長 ? ：兩個相鄰波峰或波谷間的距離（ nm） 頻率 ? ：單位時間里通過一固定點(diǎn)處波的數(shù)目（ S1） 光的波動性 光以波的形式傳播，可用波長、頻率來表示。 ? = c/? c = 3 1010 cm/s 返回 △ E = h? = hc/? h為普朗克常數(shù) 光的粒子性 光由光子組成，具有能量。 E越大 ， ?越小 。 E越小 ， ?越大 。 根據(jù) E=hc/? 可知 能 量 小 大 紫、藍(lán)、青、綠、黃、橙、紅 可見光波長范圍 400760nm 波 譜 分 區(qū) 書上 P5 光 譜 分 區(qū) 能 量 小 200nm 400nm 760nm 大 波 長 光譜區(qū)域 紫外光區(qū) 可見光區(qū) 中紅外 分析方法 紫外 可見分光光度法 25um 紅外光譜法 紫、藍(lán)、青、綠、黃、橙、紅 各種可見光的波長 顏 色 波 段（ nm） 紫 藍(lán) 青藍(lán) 青 綠 黃綠 黃 橙 紅 400~450 450~480 480~490 490~500 500~560 560~580 580~600 600~650 650~760 單色光、復(fù)合光與光的互補(bǔ) 復(fù)合光： 由不同波長的單色光按一定比例 組成的光，如白光。 單色光 ：具有單一波長的光。 若兩種光可組成白光 ， 則它們?yōu)榛パa(bǔ)光 。 光的互補(bǔ)： 互 補(bǔ) 光 示 意 圖 藍(lán)450 480紫400 450紅650 750青藍(lán)480 490青490 500綠500 580黃580 600橙600 650白光 物質(zhì)對光的吸收過程 （ P7） 二、溶液對光的選擇性吸收 物質(zhì)對光的吸收具有選擇性 完全吸收 完全透過 吸收黃色光 光譜示意 表觀現(xiàn)象示意 復(fù)合光 溶液對光的吸收與溶液顏色的關(guān)系 1） 若溶液透明 、 均勻 ， 人眼看到的溶液顏色是 由透射光的波長決定的 。 2） 當(dāng)入色光為白光（復(fù)合光），溶液吸收的光與透射的光互補(bǔ)。 光的互補(bǔ)：藍(lán) ?? 黃 結(jié)論： 溶液的顏色 （透射光） 吸收光 顏 色 波 段（ nm） 黃綠 黃 橙 紅 紫紅 紫 藍(lán) 青藍(lán) 青 紫 藍(lán) 青藍(lán) 青 綠 黃綠 黃 橙 紅 400~450 450~480 480~490 490~500 500~560 560~580 580~600 600~650 650~760 ?溶液顏色與吸收光顏色和波段的關(guān)系 三、紫外 可見分光光度法的基本原理 ? 朗伯 — 比耳定律（光吸收定律） ? 布格 (Bouguer)和朗伯 (Lambert)先后于 1729年和 1760年闡明了光的吸收程度和吸收層厚度的關(guān)系。 A ∝ b ? 1852年比耳 (Beer)又提出了光的吸收程度和吸收物濃度之間也具有類似的關(guān)系。 A ∝ c ? 二者的結(jié)合稱為朗伯 — 比耳定律。 ? T透過率 ?A吸光度 ? b液層厚度（光程長度） ?c被測物濃度 ?k吸光系數(shù) 吸光度 A
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