瓊脂糖凝膠電泳完整整理版(已修改)
2025-05-12 02:21 本頁面
【正文】 分子生物學(xué)實驗技術(shù)專題 分子生物學(xué)實驗技術(shù)專題 凝膠電泳技術(shù) ? 瓊脂糖凝膠電泳 ? 聚丙烯酰胺凝膠電泳 分子雜交技術(shù) ? Southern blot ? Northern blot 質(zhì)粒提取、細(xì)菌總 DNA提取 電泳技術(shù)簡介 什么是電泳技術(shù)？ 電泳法，是指帶電荷的供試品（蛋白質(zhì)、核苷酸等）在 惰性支持介質(zhì) （如紙、醋酸纖維素、瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等）中，于電場的作用下，向其對應(yīng)的電極方向按各自的速度進(jìn)行泳動，使組分分離成狹窄的區(qū)帶，用適宜的檢測方法記錄其電泳區(qū)帶圖譜或計算其百分含量的方法。 電泳技術(shù)的分類 電泳法可分為自由電泳（無支持體）及區(qū)帶電泳（有支持體）兩大類。 自由電泳包括 Tiseleas式微量電泳、顯微電泳、等電聚焦電泳、等速電泳及密度梯度電泳。 區(qū)帶電泳則包括濾紙電泳（常壓及高壓）、薄層電泳（薄膜及薄板）、醋酸纖維薄膜電泳、非凝膠性支持體區(qū)帶電泳（支持體有：淀粉，纖維素粉，玻璃粉，硅膠等 )、 凝膠支持體區(qū)帶電泳 （瓊脂、瓊脂糖、淀粉膠、聚丙烯酰胺凝膠）等。 凝膠電泳技術(shù) 瓊脂糖凝膠電泳 聚丙烯酰胺凝膠電泳 瓊脂糖凝膠電泳：實驗原理 瓊脂糖是由瓊脂分離制備的鏈狀多糖。其結(jié)構(gòu)單元是 D半乳糖和 L半乳糖。許多瓊脂糖鏈依氫鍵及其它力的作用使其互相盤繞形成繩狀瓊脂糖束，構(gòu)成大網(wǎng)孔型凝膠。其本身不帶有電荷。因此該凝膠適合于免疫復(fù)合物、核酸與核蛋白的分離、鑒定及純化。 瓊脂糖凝膠電泳：實驗原理 DNA分子在堿性緩沖液中帶負(fù)電荷，在外加電場作用下向正極泳動。 DNA分子在瓊脂糖凝膠中泳動時，有電荷效應(yīng)與分子篩效應(yīng)。不同 DNA的分子量大小及構(gòu)型不同，電泳時的泳動率就不同，從而分出不同的區(qū)帶。 DNA 分子的遷移速度與相對分子質(zhì)量的對數(shù)值成反比關(guān)系。凝膠電泳不僅可分離不同相對分子質(zhì)量的 DNA ，也可以分離相對分子質(zhì)量相同，但構(gòu)型不同的 DNA 分子。 瓊脂糖與瓊脂的區(qū)別 瓊脂是由瓊脂糖（ agarose）和瓊脂果膠（ agaropectin）組成的。瓊脂糖的結(jié)構(gòu)單元是 D半乳糖和 L半乳糖；瓊脂果膠是由許多更小的分子組成
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