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正文內(nèi)容

通風(fēng)設(shè)施專項(xiàng)檢查規(guī)定(已修改)

2025-04-20 05:28 本頁面
 

【正文】 目的依據(jù)《寄生蟲病檢測(cè)檢驗(yàn)技術(shù)》2005建立寄生蟲基本檢驗(yàn)技術(shù)檢驗(yàn)方法操作規(guī)程,保證測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性。 適用范圍 本法適用于常見寄生蟲檢驗(yàn)測(cè)定。 責(zé)任 使操作者熟悉本規(guī)程,并在具體樣品檢驗(yàn)中,嚴(yán)格遵照操作,確保檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確。內(nèi)容1一般檢查法1.1糞便的檢查糞便檢查是確定腸道寄生蟲病診斷的最主要的方法,也是屬于臨床化驗(yàn)室常規(guī)檢查的方法之一。1.1.1直接涂片法此法用于檢查蟲卵、滋養(yǎng)體和包囊。為了避免遺漏,一般需連續(xù)檢查三張涂片。此法的優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便,迅速。缺點(diǎn)是陽性率較低,視野中雜質(zhì)較多,蟲卵或原蟲少時(shí)不易查到。1.1.1.1生理鹽水涂片法:操作方法(1) 取潔凈的載玻片一張,于中央滴1~2滴生理鹽水。(2) 用便簽挑取約火柴頭大小的一塊糞便(),置鹽水中涂抹均勻,成半透明的混懸液,其厚薄以透過書上的鉛字為宜,如果太厚阻礙光線的透過,太薄則影響檢查效果(必要時(shí)加蓋玻片)。(3) 先用低倍鏡觀察,從邊緣開始來回順序推動(dòng)移動(dòng)器,仔細(xì)尋找蟲卵。(4) 找到蟲卵后,應(yīng)將蟲卵移至視野中央,辨認(rèn)是何蟲卵(必要時(shí)可換高倍鏡進(jìn)一步觀察)。注意事項(xiàng):(1) 檢查痢疾阿米巴原蟲時(shí),要挑取帶有膿血的糞便。(2) 檢查原蟲包囊時(shí),所取的糞便應(yīng)再少一些,糞膜涂的再薄一些,否則包囊不易找到。(3) 檢查原蟲滋養(yǎng)體時(shí),要注意保溫,避免化學(xué)藥品和尿的污染,影響滋養(yǎng)體偽足的運(yùn)動(dòng)。(4) 防止涂片變干,可隨時(shí)滴加生理鹽水。一般不用油鏡觀察。(5) 某些植物細(xì)胞很像蟲卵,是要加以鑒別,植物細(xì)胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu)不象蟲卵那樣規(guī)則,外形多扁平,用嘴輕吹時(shí),植物細(xì)胞往往易翻動(dòng)或變形。(6) 要注意蟲卵與人類酵母菌的區(qū)別,很易與包囊混淆,酵母菌為無色圓形或卵圓形小體,大小不一,內(nèi)含一個(gè)較大的透明體,其四周有狹窄的細(xì)胞漿,漿內(nèi)含有少數(shù)折光形小體和核,有時(shí)透明體偏于一邊。如用蒸餾水稀釋糞便涂片,酵母菌即被裂解消失,而原蟲包囊仍存在。(7) 只有雄性寄生蟲也無蟲卵,切勿隨意報(bào)告陰性結(jié)果。(8) 采集的標(biāo)本要新鮮,一般不宜超過一晝夜,否則原蟲或某些蟲卵易變形或者死亡,引起誤診;采集標(biāo)本的容器要清潔,避免與化學(xué)藥物或尿混合,否則原蟲滋養(yǎng)體很快死亡,影響檢出率。1.1.1.2碘液涂片法:用碘液代替生理鹽水,適用于腸道原蟲的檢查。方法(1) 檢查原蟲包囊時(shí)在干凈的載玻片上滴一滴碘液,然后取少許糞便,于碘液中,涂抹均勻,便可檢查。(2) 檢查原蟲活滋養(yǎng)體時(shí),可在用生理鹽水涂勻的糞膜附近滴一滴碘液,取少許糞便在碘液中涂勻,勿使兩塊糞膜相混合,蓋上蓋玻片,便可觀察。這樣的涂片一半染色,檢查包囊,另一半不染色,可以檢查活滋養(yǎng)體。試劑:碘液染色液:碘化鉀 4g碘 2g蒸餾水 100ml先將碘化鉀溶于少量水中,然后加碘溶解后,再加水到100ml。碘伊紅染色液碘液:碘化鉀5g溶于生理鹽水100ml,加碘至飽和。伊紅液:伊紅飽和于生理鹽水中。應(yīng)用時(shí)將上述兩液等量混合。注意事項(xiàng):(1) 碘易升華,放置數(shù)日變淡、均以原液瓶底有碘片沉集,每日取少量上清液使用為宜。(2) 碘液過濃,易使標(biāo)本沉集成塊且使原蟲染色過深,而致構(gòu)造不大明顯,故在使用時(shí),注意調(diào)節(jié)碘液量。(3) 碘、伊紅染色時(shí)背景較深,不如使用碘液時(shí)背景清楚。1.1.1.3快速染色法快速染色法用于腸道原蟲的快速診斷。固定液的配制丙酮 50ml冰醋酸 50ml甲醛溶液 10ml邵氏液 890ml?;旌弦簯?yīng)貯存于棕色玻璃瓶中,嚴(yán)密封口,二個(gè)月后染液仍穩(wěn)定,染色結(jié)果不變。操作方法(1) 用棉簽將糞便在玻片上涂成薄層。(2) 用滴管將混合液滴在糞涂片上,并將糞膜完全蓋住,使之染色并固定。(3) 將載玻片在酒精燈上慢慢加熱,待蒸汽出現(xiàn)后,即可緩慢地在火焰上經(jīng)過2~3次。(4) 立即用自來水輕輕沖洗。(5) 分別依次放置于50%及70%酒精中,每次各需時(shí)30秒鐘。然后放在95%及純酒精中,各15秒鐘,最后置于二甲苯中透明1分鐘。(6) 封固于香膠中,即能做鏡檢。用此法染成的標(biāo)本外觀與蘇木素染色法相同,呈藍(lán)紫色,核的微細(xì)構(gòu)造與擬染色體特別明顯,不需要特殊的技巧,而且保存液與固定液混合于染液中。染色標(biāo)本可保存兩個(gè)月,染色的特征上都沒有明顯的改變。1.1.1.4煌焦油藍(lán)、伊紅染色法:此種染色法是一種活體濕片快速染色法,不影響阿米巴原蟲的活力,著色不明,便于檢出蟲體和鑒定蟲種。試劑的配制甲液:煌焦油藍(lán) 氯化鈉 枸櫞酸鈉 飽和氯化鈉溶液 蒸餾水 100ml乙液水溶性金紅 蒸餾水 100ml用時(shí)將甲、乙兩液等量混合。操作方法:(1) 在干凈的載玻片上加一滴生理鹽水。(2) 用便簽挑取少許糞便的粘液部分,與生理鹽水混合,涂成適當(dāng)?shù)募S膜。(3) 加上述混合染色液一滴,混合之,覆置蓋玻片。(4) 先用低倍鏡找到,然后換高倍鏡鑒定。1.1.1.5加藤氏法1.1.1.:復(fù)合染液1瓶 20毫升/瓶定量板 100片刮片 100片尼龍網(wǎng) 100張玻璃紙 100張(22毫米*30毫米)載璃片 100片1.1.1.:將尼龍絹片置于待檢糞樣上,用塑料刮片在其上輕刮,使細(xì)糞渣透過尼龍絹孔上,取過濾后的糞便。 將定量板放在載玻片中部,然后把刮片上的細(xì)糞渣填入定量板的圓孔內(nèi),使其填滿全孔并抹平、小心移走定量板,使糞樣留在玻片上。取1張浸泡好的親水玻璃紙,抖掉多余的透明液,蓋在糞樣上,用一塊較厚的載玻片輕壓,使糞便均勻地展開于玻璃紙下。 將制備好的加藤片放于標(biāo)本盒內(nèi)(內(nèi)墊吸水紙)。 編號(hào)后置室溫25℃、濕度75%時(shí)約1小時(shí)或30~36℃溫箱中約半小時(shí)后鏡檢。1.1.1.:鏡檢:將透明好的加藤片置光學(xué)顯微鏡的載物臺(tái)上,在低倍鏡(10)下鏡檢。鏡檢仔細(xì)檢查每一個(gè)視野,并特別注意與未受精蛔蟲卵的鑒定。計(jì)數(shù)全片蟲卵(計(jì)數(shù)原則:數(shù)上不數(shù)下,數(shù)左不數(shù)右)。加藤片的蟲卵計(jì)數(shù):以鏡檢每片檢出的蟲卵數(shù)的24倍數(shù)(一糞一檢),即為每克糞便蟲卵數(shù)(EPG)。計(jì)算3張加藤片的血吸蟲卵數(shù)分別為A、B、C,每克糞便蟲卵數(shù)(EPG)為:(A+B+C) 8(一糞三檢)。 1.1.1.:每份糞樣需做三張涂片(一糞三檢,以提高檢出率)裁好的玻璃紙要捻開一片片放入透明液中,切忌整疊放入,以免內(nèi)部浸不透,而影響透明效果;浸泡時(shí)間不能少于24小時(shí)。 對(duì)薄殼蟲卵,如鉤蟲卵等的透明時(shí)間最長(zhǎng)不能超過2小時(shí),避免因透明過度而漏檢。糞便過硬時(shí),加少許清水或透明液浸泡片刻,再行刮取。定
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