艾滋病感染實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)(已修改)
2025-03-05 09:44 本頁(yè)面
【正文】 艾滋病感染實(shí)驗(yàn)室檢測(cè) 2022年 10月 12日浙江省艾滋病治療培訓(xùn)班 HIV相關(guān)檢測(cè)目的 ? ? ? 、高危人群監(jiān)測(cè) ? VCT ? ? ? 2022年 10月 12日浙江省艾滋病治療培訓(xùn)班 HIV感染的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法 – 常用 HIV病原學(xué)檢測(cè)方法 : – 1. 核酸檢測(cè) （ cDNA測(cè)定 PCR、 RNA測(cè)定 病毒載量 ） – 2. 病毒培養(yǎng)分離 – 3. P24抗原檢測(cè) – 常用 HIV抗體檢測(cè)方法 : – 初篩： ELISA： 第三代、第四代 – RT： 金標(biāo)、硒標(biāo) – PA: 明膠顆粒凝集 – 確證：免疫印跡法 WB:（ Western Blot） 、 RIBA – 其他相關(guān)檢測(cè)方法 : – 免疫功能測(cè)定： CD4/CD8檢測(cè) 2022年 10月 12日浙江省艾滋病治療培訓(xùn)班 （ 一） HIV核酸檢測(cè) ? 1. HIV核酸定性檢測(cè) ：通常使用 PCR或 RTPCR技術(shù)，用于 HIV感染的輔助診斷。 ? 2. HIV核酸定量檢測(cè) ：使用 RTPCR, NASBA, bDNA等技術(shù)，常用于監(jiān)測(cè) HIV感染者的病程進(jìn)展和抗病毒治療效果。 2022年 10月 12日浙江省艾滋病治療培訓(xùn)班 核酸檢測(cè)特點(diǎn)： ① 能夠用于常規(guī)不能培養(yǎng)和分離的病毒的檢測(cè) （ 如 HBV、HCV、 HIV等 ） ； ② 僅需少量標(biāo)本或標(biāo)本中僅含少量病毒也能檢測(cè)； ③ 在病毒感染的急性期抗體尚未出現(xiàn)之前 ， 病毒感染的診斷主要依靠 NAT， 適用于早期診斷； ④ 可對(duì)病毒進(jìn)行定量檢測(cè) ， 有助于療效監(jiān)測(cè)； ⑤ 可對(duì)病毒基因進(jìn)行基因分型 ， 比血清分型更有價(jià)值； ⑥ 通過對(duì)病毒耐藥基因的檢測(cè) ， 可預(yù)測(cè)或發(fā)現(xiàn)病毒的耐藥性； ⑦ 可用于先天性或圍產(chǎn)期獲得性病毒感染的診斷； ⑧ 靈敏度高 （ 可達(dá) ng甚至 fg水平 ， 理論上能檢出單個(gè)病毒基因 ） ， 特異性好 、 快速 、 簡(jiǎn)捷 。 2022年 10月 12日浙江省艾滋病治療培訓(xùn)班 定量 NASBA技術(shù)： 是由一對(duì)引物引導(dǎo)的 ， 連續(xù)均一的體外特異核苷酸序列的等溫?cái)U(kuò)增的酶促反應(yīng)過程 。 優(yōu)點(diǎn)：操作十分簡(jiǎn)單 ， 只需將制備好的模板直接加到反應(yīng)體系中 ， 恒溫 41℃ 培育 ～ 2小時(shí) ， 即可將模板擴(kuò)增 109倍 。 NASBA反應(yīng)體系包括 AMV反轉(zhuǎn)錄酶 、 RNA酶 H、T7RNA聚合酶 、 核糖核苷三磷酸 、 脫氧核糖核苷三磷酸 、 兩個(gè)特異的引物及適宜的緩沖液 。 NASBA的反應(yīng)分為兩相：循環(huán)相和非循環(huán)相 。 2022年 10月 12日浙江省艾滋病治療培訓(xùn)班 NASBA圖解 引物 1 逆轉(zhuǎn)錄酶 RNA酶 H 逆轉(zhuǎn)錄酶 引物 2 T7 RNA多聚酶 引物 2 逆轉(zhuǎn)錄酶 逆轉(zhuǎn)錄酶 RNA酶 H 引物 1 liniar phase amplification phase 2022年 10月 12日浙江省艾滋病治療培訓(xùn)班 PCR反應(yīng)圖解 2022年 10月 12日浙江省艾滋病治療培訓(xùn)班 bDNA信號(hào)擴(kuò)增技術(shù) 主要包括分枝 DNA檢測(cè) （ branched D
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