核酸、染色體及基因(已修改)
2025-01-31 02:43 本頁(yè)面
【正文】 Chapter 2 核酸、染色體及基因 Nucleic acid， Chromosome and Gene 核酸 (Nucleic Acids) ?DNA和 RNA，是核苷酸的聚合體 ?核苷酸由含氮堿基、五碳糖和磷酸組成 堿基 ?嘌呤（ purine）：雙環(huán)結(jié)構(gòu) ? 腺嘌呤（ adenine） ? 鳥嘌呤（ guanine） ?嘧啶（ pyrimidine）：?jiǎn)苇h(huán)結(jié)構(gòu) ? 胞嘧啶（ cytosine） ? 尿嘧啶（ uracil） RNA ? 胸腺嘧啶（ thymine） 核苷及核苷酸 ? 堿基共價(jià)結(jié)合于戊糖的 1’位構(gòu)成核苷， RNA中的戊糖為核糖，而 DNA中為 2’脫氧核糖。 ? 核糖與堿基的結(jié)合位臵嘧啶為 1位，嘌呤為 9位。 ? 核苷與一個(gè)或多個(gè)磷酸分子連接便成稱為核苷酸。 堿基配對(duì) 氫鍵 鏈的延伸 DNA單鏈的延伸 5’端 3’端 ? ? ? ? ? ? DNA雙螺旋結(jié)構(gòu) ? 帶有負(fù)電的磷酸－戊糖骨架在分子外側(cè) ? 堿基平面堆積于螺旋內(nèi)部 ? 由于骨架雙鏈在螺旋軸上的間距不相等，因而在分子表面形成寬窄不等的大溝和小溝 ? 雙鏈之間對(duì)應(yīng)的堿基以氫鍵作用形成堿基對(duì) ? DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)中每一匝螺旋含有約 10個(gè)堿基對(duì) ? 兩條鏈反向排列 DNA的分子結(jié)構(gòu) （ B型） A型、 B型及 Z型螺旋 ?生物體內(nèi) DNA結(jié)構(gòu)是基本一致的，即所謂的 B型螺旋（最穩(wěn)定） ?在低溫條件下， DNA分子可以變構(gòu)形成 A型螺旋，結(jié)構(gòu)更加緊密、更寬，螺旋重復(fù)每匝為 11個(gè)堿基對(duì) ?左旋 DNA為 Z型 DNA，屬于異常螺旋形式，外觀呈 Z字型，每匝 12堿基對(duì)，不是體內(nèi) DNA的主要形式 A B Z A B Z ZDNA的磷酸核糖骨架是扭曲的 核酸的理化性質(zhì) 酸效應(yīng) ? 在強(qiáng)酸和高溫下 ,核酸可以完全水解為堿基、核糖（脫氧核糖）和磷酸 ? DNA化學(xué)測(cè)序法就是以此為基礎(chǔ)的 堿效應(yīng) ? 直接影響堿基之間作用力，導(dǎo)致 DNA雙鏈的解離變性 OH 5’OH 強(qiáng)堿 2,3 環(huán)磷酸二脂 ? RNA在強(qiáng)堿條件下會(huì)水解成 2,3 環(huán)磷酸二脂等 化學(xué)變性 ? 一些化學(xué)物質(zhì)，比如尿素（ Urea ）、甲酰胺（ Formamide ）能破壞堿基堆積力，從而使 DNA變性。 ? 這些化學(xué)變性劑廣泛地使用在變性 PAGE、 Souternblot、 Northernbolt上 。 黏 性 ? DNA分子具有高軸比（ axial ratio） ? 寬 2nm,長(zhǎng)達(dá) μm、 mm級(jí)，甚至某些真核長(zhǎng)達(dá)幾 cm ? DNA是比較剛性（ relatively stiff）的分子 核酸的光譜學(xué) ? DNA 與 RNA 的最大吸收波長(zhǎng)為 260 nm； ? 紫外線的吸收能力： ssRNA ssDNA dsDNA；這種雙鏈ＤＮＡ的吸收值減少的現(xiàn)象稱為“減色效應(yīng)”。 ? 核酸定量 吸光值（ Extinction coefficient ） ? 1 mg/ml dsDNA: A260 =20 ? 1 mg/ml ssDNA amp。 RNA: A260 =25 ? ＤＮＡ純度 常用 260nm與 280nm處的吸光值來(lái)確定： ? 純的 dsDNA的 A260／ A280為 ? 純 RNA的 A260／ A280為 ? 若樣品的 A260／ A280,則表明有 RNA污染 ? 若樣品的 A260／ A280,則表明有蛋白質(zhì)污染 ＤＮＡ超螺旋 ? 所有天然的ＤＮＡ分子整體都呈負(fù)超螺旋（ negatively supercoiling ） ? 超螺旋ＤＮＡ分子一般比松弛的ＤＮＡ分子具有更高的能量，結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，便于控制復(fù)制及轉(zhuǎn)錄的起始 ? 細(xì)胞中存在拓?fù)洚悩?gòu)酶（ Topoisomerases ）控制ＤＮＡ分子的超螺旋狀態(tài) 環(huán)狀 線性 正超螺旋：DNA扭曲方向與雙螺旋方向相同； 負(fù)超螺旋： DNA扭曲方向與雙螺旋方向相反 I型拓?fù)洚悩?gòu)酶 纏繞數(shù)以 177。 1變
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