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生物技術(shù)實踐專題二(已修改)

2025-01-28 18:22 本頁面
 

【正文】 商南 縣 鹿城中學(xué) 朱建國 專題 2 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 微生物與人類的關(guān)系極為密切。目前,微生物已經(jīng)在醫(yī)療、環(huán)保、工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)等許多領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用,形成了大規(guī)模的發(fā)酵工程,為人類創(chuàng)造出了巨大的財富。本專題在必修課基礎(chǔ)上,引導(dǎo)學(xué)生學(xué)習(xí)微生物培養(yǎng)的基本技術(shù),以增進學(xué)生對微生物的 了解。 二、技術(shù)要項 本專題圍繞微生物技術(shù)展開,主要技術(shù)歸納如下。 。 。 。 。 (課題 和課題 3)。 三、設(shè)備條件 完成本專題需要配置 高壓蒸汽滅菌鍋 、 干熱滅菌箱 以及培養(yǎng)微生物的常規(guī)材料用具,如 培養(yǎng)皿、接種環(huán)、涂布器等。 課題 1 微生物的實驗室培養(yǎng) 一、課題目標 了解有關(guān)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)知識,進行無菌技術(shù)的操作,進行微生物的培養(yǎng)。 二、課題重點與難點 課題重點:無菌技術(shù)的操作。 課題難點:無菌技術(shù)的操作。 (一)培養(yǎng)基 知識要點: ,指出培養(yǎng)基可分為液體和固體兩大類; ; ,但是其基本成分都包括水、碳源、氮源和無機鹽。 二)無菌技術(shù) 知識要點: ; ,接種環(huán)灼燒滅菌的方法。 課題成果評價 (一)培養(yǎng)基的制作是否合格 如果未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫 1~ 2 d后無菌落生長,說明培養(yǎng)基的制備是成功的,否則需要重新制備。 (二)接種操作是否符合無菌要求 如果培養(yǎng)基上生長的菌落的顏色、形狀、大小基本一致,并符合大腸桿菌菌落的特點,則說明接種操作是符合要求的;如果培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落,則說明接種過程中,無菌操作還未達到要求,需要分析原因,再次練習(xí)。 (三)是否進行了及時細致的觀察與記錄 培養(yǎng) 12 h與 24 h后的大腸桿菌菌落的大小會有明顯不同,及時觀察記錄的同學(xué)會發(fā)現(xiàn)這一點,并能觀察到其他一些細微的變化。這一步的要求主要是培養(yǎng)學(xué)生良好的科學(xué)態(tài)度與習(xí)慣。 答案和提示 來微生物污染外,還有什么目的? 答:無菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。 。如果需要,請選擇合適的方法。 ( 1) 培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿 ( 2) 玻棒、試管、燒瓶和吸管 ( 3) 實驗操作者的雙手 答:( 1)、( 2)需要滅菌;( 3)需要消毒。 (二)倒平板操作的討論 ,需要冷卻到 50 ℃ 左右時,才能用來倒平板。你用什么辦法來估計培養(yǎng)基的溫度? 提示:可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶,感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時,就可以進行倒平板了。 ? 答:通過灼燒滅菌,防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。 ,為什么要將平板倒置? 答:平板冷凝后,皿蓋上會凝結(jié)水珠,凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高,將平板倒置,既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染。 ,如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位,這個平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎?為什么? 答:空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生,因此最好不要用這個平板培養(yǎng)微生物。 (三)平板劃線操作的討論 ?在劃線操作結(jié)束時,仍然需要灼燒接種環(huán)嗎?為什么? 答:操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物;每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后,接種環(huán)上殘留的菌種,使下一次劃線時,接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線
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