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如何選擇hplc溶劑(已修改)

2024-11-02 17:38 本頁(yè)面
 

【正文】 如何選擇 HPLC溶劑 斯百全化學(xué)(上海)有限公司 4008560488 +862164220206 高效液相色譜法( HPLC) ? 20世紀(jì) 60年代末 70年代初發(fā)展起來(lái)的一種新型分離分析技術(shù) ? 目前已成為 生物化學(xué)、醫(yī)學(xué)研究、藥物臨床、化學(xué)化工、食品衛(wèi)生、環(huán)保檢測(cè) 等領(lǐng)域最常用的化學(xué)分離分析手段 ? 定性分析 ? 定量分析(用于化合物含量及純度分析) ? 簡(jiǎn)單來(lái)講,使用 HPLC分析的主要目的在于分離一個(gè)混合物中各個(gè)組分,并定量出各組分在混合物中所占的比重。 ? 工作過(guò)程: 通過(guò)高壓泵, 連續(xù)的將流動(dòng)相按照一定流速流過(guò)柱子;通過(guò)進(jìn)樣器,注入樣品混合物。由于混合物中各組分性質(zhì)不同,因而它們?cè)谥鶅?nèi)移動(dòng)速度不同而逐漸分離。通過(guò)檢測(cè)器檢測(cè),得到組分的電信號(hào)并進(jìn)行放大;記錄儀將放大的電信號(hào)以圖形形式記錄下來(lái),由此得到液相色譜圖。 高效液相色譜法( HPLC) 分離原理 : 溶于流動(dòng)相( mobile phase)中的各組分經(jīng)過(guò)固定相時(shí),由于與固定相( stationary phase)發(fā)生作用(吸附、分配、離子吸引、排阻、親和)的大小、強(qiáng)弱不同,在固定相中滯留時(shí)間不同,從而先后從固定相中流出 在色譜分析中,如何選擇最佳的 色譜條件以實(shí)現(xiàn)最理想分離, 是色譜工作者的重要工作, 也是用計(jì)算機(jī)實(shí)現(xiàn) HPLC 分析方法建立和優(yōu)化的任務(wù)之一 高效液相色譜法( HPLC) HPLC分離指標(biāo) ? 分離度:無(wú)論是定性鑒別還是定量分析,均要求待測(cè)峰與其它峰、內(nèi)標(biāo)峰或特定的雜質(zhì)對(duì)照峰之間有較好的分離度。不一定是兩種待測(cè)物的分離度,而有可能是它們與其最接近的干擾物的分離度。應(yīng)當(dāng)盡量保證 , 想,再大也可以,但沒(méi)太大意義。 ? 峰型:窄而對(duì)稱的峰最為賞心悅目,這也是保證良好分離度的因素,同時(shí)有利于定量的準(zhǔn)確和良好的重現(xiàn)。(拖尾引子:通過(guò)計(jì)算 5%峰高處峰寬與峰頂點(diǎn)至前沿的距離比來(lái)評(píng)價(jià)峰形的參數(shù)。) ? 塔板數(shù):和半峰寬相關(guān)。半峰寬越小,塔板數(shù)越大,峰就越窄,分離越好。究竟要多大,應(yīng)以良好的分離為準(zhǔn)。 ? 保留時(shí)間:要求的是重現(xiàn)性,是色譜定性的依據(jù),同時(shí)也決定了分析時(shí)間 ? RSD(標(biāo)準(zhǔn)偏差) 2 正確選擇流動(dòng)相直接影響檢測(cè)結(jié)果和儀器的損耗! 高效液相色譜法( HPLC) 液相色譜系統(tǒng)的很多問(wèn)題都能在譜圖上反映出來(lái),其中一些問(wèn)題可以通過(guò)改變 設(shè)備參數(shù)得到解決,而其它的問(wèn)題必須通過(guò)修改操作程序來(lái)解決。 譜圖問(wèn)題 與流動(dòng)相或
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