分子生物學(xué)技術(shù)(1)(已修改)
2025-01-25 07:55 本頁面
【正文】 常用分子生物學(xué)技術(shù)的 原理和應(yīng)用 ＤＮＡ的變性 ? 在某些理化因素作用下 ， DNA分子互補(bǔ)堿基對之間的氫鍵斷裂 ， 使ＤＮＡ雙螺旋結(jié)構(gòu)松散 ， 變成單鏈 ， 即為ＤＮＡ 變性 。 ? DNA是否發(fā)生變性的常用指標(biāo)是 DNA對260 nm波長吸光值 （ A260） 變化 。 ? 實(shí)驗(yàn)室最常用的方法是 加熱 。 ＤＮＡ的復(fù)性 ? 變性ＤＮＡ在適當(dāng)條件下 ， 兩條互補(bǔ)鏈可重新配對 ， 恢復(fù)天然的雙螺旋構(gòu)象 ，這一現(xiàn)象稱為復(fù)性 。 ? 熱變性的ＤＮＡ經(jīng)緩慢冷卻后即可復(fù)性 ，又稱退火 。 核酸分子雜交 ? DNA復(fù)性時(shí) ， 如果將不同種類的 DNA單鏈分子或 RNA分子放在同一溶液中 ， 只要兩種單鏈分子之間存在一定程度配對關(guān)系 ， 在適宜的條件下 （ T、 離子強(qiáng)度 ） ， 就可以在不同的分子間形成雜化雙鏈 。 ? 雜化雙鏈可以在不同的 DNA分子之間 、 DNA與RNA之間 、 RNA與 RNA之間 。 ? 核酸研究中的應(yīng)用十分廣泛 。 探針技術(shù) ? 探針是經(jīng)過特殊標(biāo)記的核酸片段，具有特定的序列，能夠與待測的核酸片段互補(bǔ)結(jié)合，因此可用于檢測核酸樣品中的基因。 ?
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