gateway技術(shù)——克隆、表達新方法(已修改)
2025-01-24 08:03 本頁面
【正文】 Gateway技術(shù) 克隆、表達新方法 Gateway技術(shù) Gateway技術(shù)： 一種克隆操作平臺：把目的基因克隆到入門載體（ Entry Vector）后，就不用依賴限制性內(nèi)切酶，而靠載體上存在的特定重組位點和重組酶，高效、快速地將目的基因克隆到其它的受體載體（ Destination Vector，目的載體）上。 Gateway技術(shù)特點 ： 通過去除冗長的亞克隆步驟節(jié)省操作時間，同時將目的基因轉(zhuǎn)移到多個表達系統(tǒng)，在任何選擇的表達系統(tǒng)如細菌，酵母，昆蟲，或哺乳動物進行基因的分析表達。 Gateway技術(shù)的靈活性： Gateway技術(shù)的原理 Gateway的原理也是建立在噬菌體 DNA定點整合到細菌宿主基因組上。在噬菌體和細菌的整合因子（ INF、 Int）的作用下， lambda的 attP位點和大腸桿菌基因組的 attB位點可以發(fā)生定點重組， lambda噬菌體 DNA整合到大腸桿菌的基因組 DNA中，兩側(cè)產(chǎn)生兩個新位點： attL和 attR。這是一個可逆的過程，如果在一個噬菌體編碼蛋白 Xis和 IHF、Int的共同介導(dǎo)下這兩個新位點可以再次重組回復(fù)為 attB和attP位點，噬菌體從細菌基因組上裂解下來。這一過程的方向
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