昆蟲桿狀病毒載體ppt課件(已修改)
2025-01-20 04:46 本頁面
【正文】 昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng) 高遄 生物化學(xué)與分子生物 2120422 原核細胞系統(tǒng) ?大腸桿菌細胞 ?操作簡便 ?周期短、收益大 ?表達產(chǎn)物穩(wěn)定 ?相對分子質(zhì)量有限 ?不能對表達產(chǎn)物進行一些翻譯后加工 、修飾 體外基因 表達系統(tǒng) 真核細胞系統(tǒng) ?哺乳動物細胞 ?酵母細胞 ?昆蟲細胞（ 桿狀病毒表達系統(tǒng) ） ?獨特特性 前言 高表達 低成本 安全性高 大規(guī)模生產(chǎn) 前言 ?昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)是目前國內(nèi)外十分推崇的 真核表達系統(tǒng) 。利用桿狀病毒結(jié)構(gòu)基因中 多角體蛋白 的 強啟動子 構(gòu)建的表達載體，可使很多真核目的基因得到有效甚至高水平的表達。 ?具有 高效表達 、 基因克隆容量大 、 重組病毒易于篩選 、 安全性高 、且有完備的 翻譯后加工修飾 系統(tǒng)等特點，現(xiàn)已成為基因工程四大表達系統(tǒng)之一。 ?利用該表達系統(tǒng)獲得重組蛋白可用于藥物開發(fā)、疫苗生產(chǎn)、生物殺蟲劑等多個領(lǐng)域。據(jù)文獻統(tǒng)計，已有 1000 余種外源基因在昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)中得到了成功地表達，其中約有 95% 的外源重組蛋白能夠被正確的轉(zhuǎn)譯后加工修飾，具有與天然蛋白相同的生物活性。 昆蟲桿狀病毒 表達系統(tǒng) 4. 參考文獻 桿狀病毒載體 昆蟲細胞宿主 表達體系 表達過程 1. 將外源目的基因 插入 到啟動子下游 2. 與桿狀病毒 重組 ，獲得重組病毒 3. 將重組的病毒 純化 4. 感染 昆蟲細胞或蟲體 5. 外源基因隨著病毒的復(fù)制而獲得 表達 桿狀病毒載體 ? ?桿狀病毒是研究細胞分子生物學(xué)的重要工具，同時也是外源基因在昆蟲細胞中表達的載體。桿狀病毒只來源于 無脊椎動物 ，已發(fā)現(xiàn) 600多種 桿狀病毒，其中僅有不到 20 種 進行了分子生物學(xué)研究。 ?桿狀病毒的基因組為單一 閉合環(huán)狀雙鏈 DNA 分子， 大小為80~ 160kb，其基因組可在昆蟲細胞核復(fù)制和轉(zhuǎn)錄。 DNA 復(fù)制后組裝在桿狀病毒的核衣內(nèi)，后者具有較大的柔韌性，可容納較大片段的外源 DNA 插入，因此是表達大片段 DNA 的理想載體。其中 , 用作外源基因表達載體的桿狀病毒，目前僅限于 核型多角體病毒 ( nuclear poly hedrosis virus, NPV) 。 桿狀病毒載體 ?現(xiàn)已知基因組全序列的桿狀病毒僅有 7 種 : ? 苜蓿丫紋夜蛾核型多角體病毒 ( AcMNPV ) ? 家蠶核多角體病毒 ( BmNPV ) ? 黃杉毒蛾多核衣殼核多角體病毒 ( OpMNPV ) ? 舞毒蛾多核衣殼核多角體病毒 ( LdMNPV ) ? 甜菜夜蛾多核衣殼核多角體病毒 ( SeMNPV) ? 棉鈴蟲核型多角體病毒 ( HaNPV) ? 斜紋夜蛾核型多角體病毒 ( SpltMNPV) 桿狀病毒載體 ? AcMNPV 是昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)中最常用的載體，基因表達分為 4 個階段
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