cell培養(yǎng)用液ppt課件(已修改)
2025-01-18 13:27 本頁面
【正文】 教學目的 : 掌握細胞培養(yǎng)對水的要求。 了解常用的平衡鹽溶液的配制及使用 方法。 了解細胞培養(yǎng)常用液有那些。 了解常用的培養(yǎng)液的種類。 ? Balanced salt solution, BSS ? 組成：無機鹽、葡萄糖 ? 作用： 維持滲透壓、保持 pH值穩(wěn)定、提供簡 單營養(yǎng)； 2 、濕潤組織，防止組織塊干涸，并能洗滌組織塊上的血污、雜質(zhì)； 3 、作為配制其它溶液的基礎溶液（消化液：分散細胞；抗生素溶液；基礎培養(yǎng)基等） 一、平衡鹽溶液（ BSS） 注意事項： 配制平衡鹽溶液需用三蒸水； DHanks與 PBS不含 Ca2+， Mg2+高壓滅菌不容易出現(xiàn)沉淀，其它含有 Ca2+， Mg2+的平衡鹽溶液高壓滅菌后易出現(xiàn)沉淀，應過濾使用； PBS與 DHanks不含有 Ca2+， Mg2+常用于配制胰蛋白酶溶液（ Ca2+， Mg2+ 會降低胰酶活性）； Earle平衡鹽溶液含有較高的 NaHCO3，適合開放式培養(yǎng)； Hanks液含有較少的 NaHCO3適合密閉式培養(yǎng)； 配好的平衡鹽溶液可以過濾除菌或高溫高壓滅菌。 用途：清洗材料、洗滌細胞、配制其他溶液。 Ringer PBS Tyrode Earle Hank’s DHank’s Dulbecco Ｎ aCl KCl CaCl2 MgCl26H2O MgSO47H2O Na2HPO4H2O NaH2PO42H2O KH2PO4 NaHCO3 葡萄糖 酚紅 常用的幾種平衡鹽溶液 分類： 按來源分：天然培養(yǎng)基 人工合成培養(yǎng)基（基礎培養(yǎng)基） 按基質(zhì)狀態(tài)分：半固體 : 瓊脂，明膠，血漿 液體 二、 組織培養(yǎng)基 92℃ 以上溶解 46℃ 以下凝固 思考題： 細胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基與微生物 培養(yǎng)基有什么區(qū)別？ 生長液：基本培養(yǎng)基加入 8%10%的血清； 維持液：基本培養(yǎng)基加入 3%5%的血清； 完全培養(yǎng)基：人工合成培養(yǎng)基加上血清； 基礎培養(yǎng)基又叫做人工合成培養(yǎng)基。 ? Hank’s+水解乳蛋白（進口） 基礎培養(yǎng)基 + 血清（ 8%10%） 干粉培養(yǎng)基 DMEM， RPM1640等 基礎培養(yǎng)基 + 血清（ 8%10%） Hank’s+水解乳蛋白 +干粉培養(yǎng)基 + 8%10%血清 3種常見的培養(yǎng)基 一、培養(yǎng)基的基本要求 ?（一） 營養(yǎng)成分 ?（二） 促生長因子及激素 ?（三） 滲透壓 ?（四） pH ?（五） 無毒無污染 營養(yǎng)成分 （ 1） 氨基酸 ：細胞合成蛋白的原料 包括： 12種必需氨基酸和谷氨酰胺 （ 2）單糖：六碳糖是最主要的能量來源
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