藥物分析新方法與新技術(shù)-液相色譜聯(lián)用技術(shù)及其應(yīng)用-張尊建(已修改)
2025-01-18 08:39 本頁面
【正文】 1 液相色譜聯(lián)用技術(shù) 及其應(yīng)用 中國藥科大學(xué) 張 尊 建 藥物分析新方法與新技術(shù) 之 2 主 要 內(nèi) 容 ? 第一部分：聯(lián)用技術(shù)概述 ? 第二部分：液質(zhì)聯(lián)用技術(shù) ? 第三部分：液核聯(lián)用技術(shù) 3 ? 聯(lián)用目的 色譜是一種高效的 分離手段 ，可將復(fù)雜混合物中的各個組分分離，但其 定性能力較差 ，通常只是利用各組分的保留特性來定性，這在目標(biāo)物完全未知的情況下是相當(dāng)困難的。 而隨著定性分析和結(jié)構(gòu)分析手段－質(zhì)譜（ MS）、核磁共振光譜 (NMR)、紅外光譜 (IR)以及等離子體發(fā)射光譜 (ICPAES)等的發(fā)展，確定一個純組分是什么化合物，其結(jié)構(gòu)如何已是比較容易的事。 色譜聯(lián)用大大增強了色譜分析的定性能力。 第一部分 聯(lián)用技術(shù)概述 難 點： 載氣 (或流動相 )的分離，出峰時間監(jiān)測 關(guān)鍵點： 接口技術(shù) (分子分離器 ) 4 ? 色譜聯(lián)用中的 “ 接口 ” 色譜聯(lián)用技術(shù)就是將一種色譜儀器（ GC、 HPLC、TLC、 SFC、 CE）和另一種儀器（ MS、 NMR、 FTIR、AAS、 ICPAES）通過稱為 “接口”（ Interface）的裝置直接聯(lián)接起來，將通過色譜儀器分離開的各種組分逐一通過接口送到第二種儀器中進行分析。因此 接口 是色譜聯(lián)用技術(shù)中的 關(guān)鍵裝置 ，它要協(xié)調(diào)前后兩種儀器的輸出和輸入間矛盾。接口的存在既要不影響前一級色譜儀對組分的 分離性能，又要同時滿足后一級儀器對樣品進樣的要求和儀器的工作條件。 5 ? 常用的色譜聯(lián)用技術(shù) 氣相色譜 質(zhì)譜聯(lián)用 氣相色譜 質(zhì)譜（ GCMS）聯(lián)用儀是開發(fā)最早的色譜聯(lián)用儀器。由于氣相分離后的樣品呈氣態(tài)，流動相也是氣體，與質(zhì)譜的進樣要求相匹配，最容易將這兩種儀器聯(lián)用。是最早實現(xiàn)商品化的色譜聯(lián)用儀器。 液相色譜 質(zhì)譜聯(lián)用 液相色譜 質(zhì)譜聯(lián)用（ LCMS）要比 GCMS困難的多，主要是因為液相色譜的流動相是液體，如果讓液相色譜的流動相直接進入質(zhì)譜，則將嚴(yán)重破壞質(zhì)譜系統(tǒng)的真空，也將干擾被測樣品的質(zhì)譜分析，因此 LCMS聯(lián)用技術(shù)的發(fā)展比較慢，出現(xiàn)過各種各樣的接口，但直到大氣壓電離接口的出現(xiàn)，才有了真正成熟的商品化儀器。 6 液相色譜 核磁共振波譜聯(lián)用 核磁共振波譜（ NMR）是有機化合物結(jié)構(gòu)分析的強有力工具，特別是對于同分異構(gòu)體的分析。但實現(xiàn)色譜和 NMR的在線聯(lián)用是當(dāng)前色譜聯(lián)用技術(shù)中最困難的，也是目前使用最少的色譜聯(lián)用技術(shù)。 主要原因如下： ① NMR的 靈敏度較低 ，雖然傅立葉變換波譜可以通過信號的累加提高靈敏度，但需要延長信號采集時間，與色譜峰的出峰時間很短矛盾； ② 為使通過樣品的磁場均勻，一般采用將樣品管在磁場中以 較高速度旋轉(zhuǎn) 的方法，這也造成色譜和 NMR在線聯(lián)用的困難； ③ NMR在作質(zhì)子譜時為避免 溶劑干擾 ，含氫溶劑必須使用氘代溶劑。如用氘代溶劑作流動相，分析成本將大大提高；如不用含氫溶劑，在色譜上又很難實現(xiàn)。在作碳譜時，流動相中的 13C也將干擾測定。 7 第二部分 液相色譜 質(zhì)譜（ LCMS）聯(lián)用技術(shù) LCMS的研究開始于 20世紀(jì) 70年代，與 GCMS不同， LCMS經(jīng)歷了一個更長的實踐、研究過程，直到 90年代方才出現(xiàn)了被廣泛接受的商品接口及成套儀器。 LCMS在線使用首先要解決的問題仍然是真空的匹配?，F(xiàn)有商品儀器的設(shè)計均增加了真空泵的抽速并采用了分段、多級抽真空的方法，形成真空梯度以滿足接口和質(zhì)譜正常工作的要求。
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