無(wú)病毒植物的培養(yǎng)ppt課件(已修改)
2025-01-17 11:58 本頁(yè)面
【正文】 第四章 無(wú)病毒植物的培養(yǎng) 教學(xué)目的和要求 (1）了解植物病毒的危害和培養(yǎng)無(wú)病毒植物的意義。 （ 2）理解和掌握脫除植物病毒的原理及方法。 （ 3）了解分離莖尖的培養(yǎng)情況。 （ 4）一般掌握無(wú)毒苗木的鑒定方法。 （ 5）一般掌握脫毒苗木的保存和利用方法。 第一節(jié) 植物病毒的危害和培養(yǎng)無(wú)病毒植物的意義 病毒之所以致病不是由于消耗細(xì)胞養(yǎng)分或通過(guò)毒素殺死細(xì)胞 ， 而是利用細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)占領(lǐng)空間 ，干擾細(xì)胞的代謝過(guò)程 ， 促使細(xì)胞產(chǎn)生一些對(duì)細(xì)胞或生物的生命和正常功能 有害的異常物質(zhì)和條件 ， 這使得植物病毒病的防治較其他植物病害防治更為困難 ， 常給生產(chǎn)帶來(lái)災(zāi)難的損失 ，被稱為 “ 植物的癌癥 ” 。 一、植物病毒的危害 植物病毒已超過(guò) 600種 ， 嚴(yán)重危害著農(nóng)業(yè)生產(chǎn) 。 在 果樹(shù) 、 蔬菜 、 花卉 、 林木以及農(nóng)作物上皆有發(fā)現(xiàn) 。 隨著生產(chǎn)栽培時(shí)間的推移 ，危害越來(lái)越嚴(yán)重 ， 發(fā)現(xiàn)的病毒種類也越來(lái)越多 。 病毒調(diào)查 危害園藝植物的病毒數(shù)目 如侵染菊花的病毒和類病毒有 19種之多 如 無(wú)子病毒 (CAV) 潛隱病毒 (CLV) B病毒 (CVB) 輕斑駁病毒 (CMMV) 矮化病毒 (CSV) 脈斑駁病毒 (CVMV) 退綠斑駁類病毒 (CCMV)等 ? 4種對(duì)草莓生產(chǎn)造成重大影響 : 斑駁病毒（ SMoV） 草莓黃邊病毒（ SMYEV ） 草莓鑲脈病毒（ SVBV） 草莓皺縮病毒 （ SCrV）、 甘薯根腐病 . 甘薯葉點(diǎn)病 甘薯枯萎病 甘薯黑痣病 多植物病毒 不經(jīng)種子 傳播，多數(shù)以種子繁殖后代的植物，可以從輕度罹病植株上采集種子，播種繁殖，不會(huì)將病毒傳至下一代 。（專化性強(qiáng)的病毒除外，如豆類病毒 —— 由一種專化性強(qiáng)的蚜蟲(chóng)傳播 )可隨著種子傳播。） 對(duì)于有性生殖退化，僅能用無(wú)性繁殖方法繁殖的植物，一旦罹病則毫無(wú)辦法。母株一旦染病，病毒在其細(xì)胞內(nèi)增殖，并 通過(guò)插條、接穗、種薯、球根、鱗片傳至下一代。 通過(guò) 昆蟲(chóng) 作為媒介加速傳播。 ３ .植株脫病毒的意義 ? 植物組織培養(yǎng)脫病毒技術(shù)是植物細(xì)胞工程的重要組成部分，脫毒種苗的生產(chǎn)在 提高作物質(zhì)量和產(chǎn)量 方面已顯示出極大潛力， 良種、新品種的脫毒組培苗的大面積推廣和應(yīng)用 ，有效地解決了因病毒引起的品種 退化 問(wèn)題。因此，植物組培脫毒技術(shù)在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的科學(xué)化、現(xiàn)代化中具有巨大的應(yīng)用價(jià)值和經(jīng)濟(jì)效益，還可減少農(nóng)藥的施用， 改善生態(tài)環(huán)境條件，防止病害的蔓延與擴(kuò)散， 該方法已成為農(nóng)業(yè)中應(yīng)用最廣泛的生物技術(shù)。 甘薯脫毒苗 脫毒區(qū) 第 二節(jié) 脫除植物病毒的原理及方法 一 、 物理學(xué)方法： X射線 紫外線 超短波 高溫 都能使病素鈍化 ， 其中以熱處理最常用 。 ① 病毒是 DNA大分子，病毒進(jìn)入植物細(xì)胞后；隨植物細(xì)胞的 DNA一起復(fù)制。熱處理并不能殺死病毒，只能 鈍化病毒的活性 ，使病毒在植物體內(nèi)增殖減緩或增殖停止，而失去侵染的能力。 ②熱處理是一種物理效應(yīng)，與冷處理一樣，它可以加速植物細(xì)胞的分裂，使植物細(xì)胞在與病毒繁殖的競(jìng)爭(zhēng)中取勝。 （ 1） 溫湯浸漬處理法： 將剪下的接穗或種植材料 ， 在 50℃ 左右的溫水中 ， 浸漬 315分鐘至數(shù)小時(shí) 。 （ 2） 熱風(fēng)處理法： 讓盆載植物在 3540℃高溫下生長(zhǎng)發(fā)育 ， 熱處理空氣溫度應(yīng)逐漸升高 ， 然后達(dá)到所需溫度 ， 同時(shí)必須保持一定的濕度和光照 ， 以后可切取處理后新長(zhǎng)出的枝條作接穗和砧木 ， 或?qū)崽幚砼c組織培養(yǎng)結(jié)合效果更好 。 熱處理脫毒 愈傷組織熱處理脫毒法 方法： 從患病植株上取葉片 (莖片 、 鱗片 、 花器亦可 )進(jìn)行離體培養(yǎng) ， 誘導(dǎo)形成愈傷組織 ， 然后將愈傷組織反復(fù)繼代培養(yǎng)同時(shí)兼用熱處理 。 常用處理溫度及處理時(shí)間： 溫度： 3738℃ 時(shí)間：處理 2周 、 4周或 8周 溫度： 50℃ 時(shí)間： 315min。 反復(fù)繼代兼熱處理 ， 經(jīng)歷一定的時(shí)間 (繼代次數(shù)需試驗(yàn) )后 ， 將熱處理過(guò)的愈傷組織轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基中 ， 誘導(dǎo)器官分化 。 果樹(shù)作物： 桃 (無(wú)黃萎病 )、蘋(píng)果 (花葉病 )、葡萄 (扇葉病毒 )、甜橙、香蕉、李子、醋栗、梨、樹(shù)莓、紅莓苔子、草莓等。 蔬菜作物： 馬鈴薯、番茄、菠菜。 花卉植物： 蔓生長(zhǎng)春花、康乃馨、菊花等。 其他植物： 曼陀羅等。 例：煙草愈傷組織兼熱處理鈍化煙草花葉病毒 (TMV)和黃瓜花葉病毒 (CMV)獲得無(wú)病毒株效果做法： A：從患病煙草植株上取 5mm葉片培養(yǎng) ， 在 MS附加 IAA 2+KT 。 B：將其中一部分愈傷組織反復(fù)繼代培養(yǎng) ， 繼代培養(yǎng)中分別兼用 25℃ 、 30℃ 和 37℃ 溫度熱處理 8周 。 C：將熱處理后的愈傷組織 ， 轉(zhuǎn)到 MS附加 IAA 2+KT 2的分化培養(yǎng)基中誘導(dǎo)芽分化 。 D：將 1cm長(zhǎng)的芽轉(zhuǎn)移到 MS附加 IAA 2+KT 根培養(yǎng)基 ， 誘導(dǎo)根分化 。 E：完整植株獲得后 ， 移植到無(wú)毒土壤栽培并進(jìn)行鑒定 。 結(jié)果表明：反復(fù)繼代培養(yǎng)可獲得無(wú)病毒株 。 ? 菊花植株 5℃ ,行莖尖培養(yǎng) ,可以除去矮化病毒 (CSV)和褪綠班駁病毒 (CCMV),而單獨(dú)的莖尖培養(yǎng)無(wú)此效果。 二、化學(xué)方法 使用農(nóng)藥是防治植物真細(xì)菌病害的主要方法 ，理論上講 ， 也應(yīng)
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