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正文內(nèi)容

x5實驗動物質(zhì)量監(jiān)測(已修改)

2025-05-27 03:10 本頁面
 

【正文】 2021/6/15 2 實驗動物質(zhì)量監(jiān)測的意義 生物學實驗研究的四個基本條件 Animal, Equipment, Information, Reagent ,簡稱 AEIR四要素 這 4個要素在整個實驗研究中具有同等重要的地位,不能忽略或偏廢。事實上, 實驗動物質(zhì)量往往成為制約性要素 ,影響整個實驗的質(zhì)量和水平 實驗動物質(zhì)量監(jiān)測是實驗動物科學的重要內(nèi)容,是確保實驗動物質(zhì)量的必要手段。 2021/6/15 3 實驗工作人員的健康和生命的保證 常見的人畜共患病:流行性出血熱、狂犬病、猴 B病毒、淋巴細胞脈絡叢腦膜炎病毒、利什曼原蟲等 2021/6/15 4 動物生產(chǎn)和繁殖的保證 動物一旦染上傳染病,則種群難以凈化,一些烈性傳染病如鼠痘、兔病毒性出血癥等可致動物全軍覆沒,造成巨大經(jīng)濟損失。 2021/6/15 5 實驗結果準確性、規(guī)律性、重復性的保證 2021/6/15 6 實驗動物質(zhì)量監(jiān)測主要包括以下幾個方面: 遺傳質(zhì)量 微生物與寄生蟲質(zhì)量 飼料質(zhì)量 環(huán)境質(zhì)量監(jiān)測。 2021/6/15 7 第一節(jié) 遺傳質(zhì)量監(jiān)測 ?實驗動物的 遺傳背景與反應特性 ,是影響實驗結果的重要因素。 ?不同遺傳背景與反應特性的實驗動物,對同一刺激有時可引起不同質(zhì)和量的反應。 ?為了保存實驗動物品種品系特性。使實驗動物使用者在動物實驗中能得到正確的、可重復的科學數(shù)據(jù),實驗動物生產(chǎn)者在 嚴格遵守品系繁育技術路線 的同時,還必須努力做好實驗動物遺傳質(zhì)量的嚴格監(jiān)測 ,以防止實驗動物遺傳上的污染和變異。 2021/6/15 8 如: ?BALB/c對放射線比其他品系更為敏感。 ?C57BL/6腫瘤發(fā)生率低, A系高。 ?BALB/c和 C3H小鼠對鼠傷寒沙門氏菌的敏感性存在顯著差異 ?SHR為自發(fā)性高血壓大鼠,心血管疾病發(fā)生率高 2021/6/15 9 一、群體管理 ?管理上人為的粗心最易引起遺傳上的混雜 ,所以對育種群進行恰當?shù)墓芾硎潜WC遺傳質(zhì)量的最有效方法。 ?每一個實驗動物育種機構都應當認真執(zhí)行良好的育種制度,完善地保持育種記錄,基礎群應有系譜記錄。要做到以上要求,最重要的因素就是要有訓練有素、經(jīng)驗豐富的技術人員。 2021/6/15 10 二、免疫學標記監(jiān)測 ( 一 ) 皮膚移植法 這是目前最常用和最靈敏的檢測亞系內(nèi)或亞系間組織相容性基因差異的方法 。 在小鼠和大鼠中普遍采用的是尾部或背部皮膚移植法 。皮膚移植法靈敏度高 。 易掌握 , 經(jīng)濟 。 不需昂貴設備 , 易對植皮成活情況進行觀察和判斷 。 能有效地測出新發(fā)生的 、 造成亞系變異的遺傳混雜和突變 。 2021/6/15 11 ( 二 ) 混合淋巴細胞反應 混合淋巴細胞反應的原理為:異源動物或遺傳上有差異個體的淋巴細胞混合培養(yǎng)一定時間后 , 這些細胞會增殖 , 甚至進一步裂解 。 此反應結果可在 7~ 9天獲得 , 定期地從群體中抽取足夠量的動物進行監(jiān)測能夠維護實驗動物的品質(zhì) 。 2021/6/15 12 ( 三 ) 淋巴組織移植 用供體的均質(zhì)淋巴器官 , 如骨髓 、 脾 、 淋巴結 、 胸腺或胚胎肝臟制備出單細胞懸液 。然后將適量活細胞通過靜脈或腹腔注射到受體動物體內(nèi) , 組織相容性由受體中存活者及脾增大者來確定 , 也可以用放射學方法 。 根據(jù)移植細胞的存活數(shù)測定 。 2021/6/15 13 三、生化標記監(jiān)測 通過多種形式的電泳和電聚集 。 可檢定生化標記即同工酶或蛋白質(zhì) , 常用的電泳介質(zhì)有乙酸纖維素膜 、 淀粉凝膠 、 聚丙烯酰胺凝膠 。 每一種標記系統(tǒng)做特異性染色 ,最后將得到的帶型與公布的生化遺傳圖式進行比較 。 如中華人民共和國國家標準 GB;T149232021公布 9種常用近交系大鼠生化位點標記基因 (表 52)。 2021/6/15 14 表 52 常用近交系大鼠生化位點標記基因 Strain Akp1 Cs2 Es1 Es3 Es4 Es6 Es8 Es9 F344/N a a a a b a b a LOU/C a a a a b b b a SHR a b a b a a b a WKY b b a d b a a c LEW/M a a a d b a b c ACI b a b a b b b a 2021/6/15 15 四、骨骼形態(tài)特征監(jiān)測 ?常采用 “ 下頜骨分析法 ” 來鑒別和檢測大小鼠的亞系變異 。 ?將年齡 、 性別 、 體重相當?shù)拇笫蠡蛐∈筇幩篮?,分辨右下頜骨 , 加以標記 , 在直角坐標系上測量出多個形態(tài)特征參考點距離 。 ?將所有測量的平均數(shù)作統(tǒng)計分析 , 利用判別函數(shù)確定下頜骨形狀 。 如果測量值集中 , 則表明被測亞系間無顯著的遺傳變異 。 2021/6/15 16 五、染色體帶型監(jiān)測 可以利用染色體分帶技術 , 鑒別 C帶和 Q帶作為染色體標記 , 用來區(qū)分大 、 小鼠的近交系 ,在多數(shù)大 、 小鼠的近交系中 , 所有中期染色體都存在 C帶材料 , 同源染色體的 C帶區(qū)域大小相同;不同的近交系 , C帶材料大小不同 ,是品系特異的 , 是一種很有價值的檢測亞系變異和混雜來源的方法 。 2021/6/15 17 六、現(xiàn)代分子生物學技術 傳統(tǒng)的遺傳監(jiān)測方法來源于過去研究者對哺乳動物進行遺傳分析時采用的研究手段 。隨著分子生物學技術的發(fā)展 , 分子生物學技術有可能取代傳統(tǒng)的遺傳監(jiān)
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