sds—聚丙烯酰胺垂直平板電泳(已修改)
2025-05-26 13:12 本頁面
【正文】 SDS— 聚丙烯酰胺垂直平板電泳 一 實驗原理 ? 十二烷基硫酸鈉（ SDS）是一種陰離子去污劑。由于 SDS分子本身帶有負(fù)電荷，能夠與蛋白質(zhì)的疏水區(qū)相結(jié)合，使蛋白質(zhì)伸展和解離，從而使蛋白質(zhì)呈一致的強負(fù)電荷。當(dāng)采用加 SDS的聚丙烯酰胺進(jìn)行電泳時，利用聚丙烯酰胺凝膠的分子篩效應(yīng)，可以進(jìn)行蛋白質(zhì)分子量的測定。 ? 在用該方法進(jìn)行分子量的測定中，是利用某些已知分子量的指示蛋白質(zhì)與經(jīng) SDS處理后解離成單鏈的蛋白質(zhì)樣品進(jìn)行電泳比較，根據(jù)蛋白質(zhì)的電泳遷移率，在一定的分子量范圍內(nèi)與分子量的對數(shù)所呈的線形關(guān)系，就可以測出單鏈樣品蛋白質(zhì)的分子量。用該方法測得的是蛋白質(zhì)亞基的分子量。 ? SDS— 聚丙烯酰胺凝膠電泳可以采用園盤電泳的形式，也可以采用垂直平板電泳的形式，其原理相同，操作步驟也大致相同。另外SDS— 聚丙烯酰胺凝膠電泳亦分為不連續(xù)系統(tǒng)和連續(xù)系統(tǒng)。本實驗采用垂直平板以不連續(xù)系統(tǒng)的 SDS— 聚丙烯酰胺凝膠方式進(jìn)行電泳。垂直平板電泳的優(yōu)點在于在一塊凝膠平板上可以同時進(jìn)行不同樣品的電泳。因此條件一致，更加便于比較。 二 實驗?zāi)康呐c要求 （ 1）、學(xué)習(xí)與了解 SDS— 聚丙烯酰胺垂直平板電泳的方法 （ 2）、通過對某一蛋白質(zhì)樣品的分子量測定，了解和掌握該方法的 分子量測定技術(shù)。 三 實驗儀器與器材 3 實驗儀器 ： ? （ 1）、垂直平板電泳槽裝置（套）； ? （ 2）、電動磁力攪拌器 ? （ 3）、電動脫色儀 ? （ 4）、電泳儀 ? （ 5）、電 爐 ? （ 6）、天 平 ? （ 7）、混合器 3 主要實驗器材 ? （ 1）、 可調(diào)取液器 ? （ 2）、 微量注射器 ? （ 3）、 醫(yī)用注射器 ? （ 4）、 8針頭 ? （ 5）、 燒 杯 ? （ 6）、 洗耳球 ? （ 7）、 量 筒 ? （ 8）、 培養(yǎng)皿 ? （ 9）、 吸水紙 ? （ 10）、記號筆 四 實驗試劑與配制 4實驗試劑 ? （ 1）、 丙 烯 酰 胺 （ Acr） ? （ 2）、 甲叉雙丙烯酰胺 （ Bis） ? （ 3）、 過 硫 酸 銨 （ AP） ? （ 4）、 四 甲基 乙二胺 （ TEMED） ? （ 5）、 三羥甲基氨基甲烷 （ Tris） ? （ 6）、 考馬斯亮蘭 G25
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