馬鈴薯m病毒重組cp抗血清的制備畢業(yè)論文(已修改)
2024-09-11 01:37 本頁面
【正文】 青島農(nóng)業(yè)大學(xué) 畢業(yè)論文（設(shè)計） 題 目： 馬鈴薯 M 病毒重組 CP抗血清的制備 姓 名： 學(xué) 院： 生 命 科 學(xué) 學(xué) 院 專 業(yè)： 生 物 技 術(shù) 班 級： 2020 級 3 班 學(xué) 號： 20203581 指導(dǎo)教師： 郭 寶 太（教授） 完成時間 ： 2020 年 6 月 15 日 目錄 摘要 ..................................................... 1 Abstract. ................................................. 2 引言 ..................................................... 3 1 材料與方法 .............................................. 5 實驗材料 ................................................................................................................. 5 實驗菌株 ............................................................................................................... 5 主要試劑 與 儀器 ................................................................................................... 5 培養(yǎng)基 .................................................................................................................. 5 主要試劑配 方 ....................................................................................................... 5 方法 .......................................................................................................................... 8 PVMCP 基因原核表達(dá)的誘導(dǎo)與鑒定 ............................................................... 8 菌體總蛋白的提取和包涵體的溶解 ................................................................... 8 PVM 重組 CP 的純化 .......................................................................................... 9 純化蛋白的 SDSPAGE 檢測 ............................................................................. 9 蛋白的透析、濃縮與定量 ................................................................................... 9 PVM 重組 CP 抗血清的制備 .............................................................................. 9 PVM 的 ELISA 測定 .......................................................................................... 10 2 結(jié)果與分析 ............................................. 10 目的蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)與純化 ................................................................................ 10 蛋白的透析、濃縮與定量 .................................................................................... 11 抗血清 效價 的測定 ............................................................................................... 12 PVM 的 ELISA 測定 ............................................................................................. 13 3 討論 .................................................. 13 馬鈴薯病毒的檢測方法 ....................................................................................... 13 目的蛋白的純化與定量 ....................................................................................... 14 重組 CP 途徑與 本研究的創(chuàng)新點 ........................................................................ 14 馬鈴薯病毒抗血清的生產(chǎn)與應(yīng)用 致謝 .................................................... 15 參考文獻(xiàn) ................................................ 15 1 馬鈴薯 M 病毒重組 CP 抗血清的制備 生物技術(shù)專業(yè) 劉 揚 指導(dǎo)教師 郭寶太 摘要 ： 用 IPTG 誘導(dǎo)重組菌 BL21(pET22bPVM)中 馬鈴薯 M 病毒 CP 基因的原核表達(dá) ， 在總蛋白 SDSPAGE 圖譜上 有一條 分子量 36kDa 的特異蛋白帶，符合預(yù)期大小，結(jié)果表明PVMCP 基因的原核表達(dá) 非常成功 。 用溶菌酶 方 法 首先 提取 細(xì) 菌總蛋白，然后利用鎳離子親和層析 純化重 組蛋白，獲得了高純度的 PVM 重組 CP。利用高純度重組 CP 免疫 家 兔制備出了抗血清，間接 ELISA 法測定顯示抗血清的效價為 1： 64K。 制備的抗血清與 PVM 陽性物呈陽性反應(yīng)，也就是說本研究制備的抗血清具有檢測 PVM 的能力。 本研究利用重組 CP 制備出 了 PVM 高 滴度 的抗血清，為進(jìn)行 PVM 的 ELISA 檢測奠定了基礎(chǔ)，同時也為 P
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