微生物培養(yǎng)基及其制備-文庫吧
2025-07-06 10:09 本頁面
【正文】 、 O2含量 （熱酸通風沉淀法） 效果比方法 1好，但是費時費設(shè)備，不適于大規(guī)模生產(chǎn) 澄清效果較好 目的：通過稀釋，酸化，滅菌，澄清，使之更適于發(fā)酵 谷氨酸發(fā)酵的糖蜜前處理 待處理物質(zhì)：膠體成分（起泡、結(jié)晶）、鈣鹽（結(jié)晶） 生物素（發(fā)酵控制） 處理目的：澄清 → 脫鈣 → 脫除生物素 糖蜜預(yù)處理方法 ①活性炭處理法 稀釋，漂白粉，活性炭，過濾 原理：吸附 ②樹脂處理法 ③亞硝酸處理法 原理：破壞生物素 還可以采用以下三種方法脫除生物素： 原理：增加細胞膜對谷氨酸的滲透性 ①添加青霉素法 ②添加表面活性劑 ③添加抗氧劑法 原理：當谷氨酸酶系統(tǒng)成熟時過量生物素不影響發(fā)酵，可在此時添加未處理的糖蜜進去繼續(xù)正常生產(chǎn)。 原理：誘變生物素缺陷型菌株為油酸缺陷型等，是生物素不再影響谷氨酸的積累 第四節(jié) 石油代糧發(fā)酵原料 石油代糧發(fā)酵： 微生物利用石油化工產(chǎn)品，得到蛋白，氨基酸，抗生素，酶，檸檬酸，維生素等產(chǎn)品。 石油代糧發(fā)酵的特點： 不耗糧食； 反應(yīng)不需高溫高壓耐腐蝕的設(shè)備； 耗氧產(chǎn)熱，因此要求菌種耐高溫； 需保證產(chǎn)物安全無毒； 石油代糧發(fā)酵的原料： ? 各種石油餾分：正烷烴，輕油，燈油等 ? 各種石化產(chǎn)品：甲醇，乙醇，醋酸（ for 谷氨酸、賴氨酸），乙二醇，丙二醇等 ? 石油酵母菌體：為維生素 B2和酶的生產(chǎn)提供 C、 N源（間接石油發(fā)酵） 常用：醋酸，乙醇 一 、 前體物質(zhì)：前體指某些化合物加入到發(fā)酵培養(yǎng)基中 ，能直接彼微生物在生物合成過程中合成到 產(chǎn)物 物分子中去 ，而其自身的結(jié)構(gòu)并沒有多大變化 ， 但是產(chǎn)物的產(chǎn)量卻因加入前體而有較大的提高 。 青霉素：分子量 356 苯乙酸 :分子量 136 第五節(jié) 前體物質(zhì)、促進劑 作用 ：前體有助于提高產(chǎn)量和組份 P107 用量 ：前體的用量可以按分子量衡算，具體使用有個轉(zhuǎn)化 率的問題 例： 6000單位 /ml的青霉素 G,需要多少苯乙酸 青霉素＝ 6000*（微克）＝ 36mg/ml 苯乙酸＝（ 36*136） /356= 實際使用時的轉(zhuǎn)化率在 4690%之間 例某廠單耗為： （ kg/10億青霉素） 轉(zhuǎn)化率為： (*36/)=68% 用法 ：前體使用時普遍采用流加的方法 前體一般都有毒性，濃度過大對菌體的生長不利 苯乙酸，一般基礎(chǔ)料中僅僅添加 % 前體相對價格較高，添加過多，容易引起揮發(fā)和氧化， 流加也有利于提高前提的轉(zhuǎn)化率 常用的前體物質(zhì) 氨基酸 菌種 前體物質(zhì) 產(chǎn)率（ %） 絲氨酸 色氨酸 色氨酸 蛋氨酸 異亮氨酸 異亮氨酸 蘇氨酸 嗜甘油棒狀桿菌 異常漢孫酵母 麥角菌 脫氮極毛桿菌 粘質(zhì)賽氏桿菌 阿氏棒狀桿菌 谷氨酸小球菌 甘氨酸 氨茴酸 吲哚 硫代丁酸 α 氨基丁酸 D蘇氨酸 高絲氨酸 二、促進劑：促進劑是指那些非細胞生長所必須的營養(yǎng)物，又非前體，但加入后卻能提高產(chǎn)量的添加劑。 促進劑提高產(chǎn)量的機制還不完全清楚，其原因是多方面的。 ? 有些促進劑本身是酶的誘導(dǎo)物； ? 有些促進劑是表面活性劑，可改善細胞的透性，改善 細胞與氧的接觸從而促進酶的分泌與生產(chǎn)， ? 也有人認為表面活性劑對酶的表面失活有保護作用； ? 有些促進劑的作用是沉淀或螯合有害的重金屬離子。 促進劑作用舉例 發(fā)酵過程的促進劑和抑制劑 抗生素 被抑制的產(chǎn)物 抑制劑 鏈霉素 去甲基鏈霉素 四環(huán)素 去甲基金霉素 頭孢菌素 C 利福霉素 甘露糖鏈霉素 鏈霉素 金霉素 金霉素 頭孢霉素 N 其他利福霉素 甘露聚糖 乙硫氨酸 溴化物、硫脲 硫胺化合物 L蛋氨酸 巴比妥藥物 本章小節(jié) 掌握 ：培養(yǎng)基的原料；培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分；發(fā)酵培養(yǎng)基的選擇；淀粉水解糖的制備； 難點 ：淀粉水解理論基礎(chǔ)；谷氨酸發(fā)酵的糖蜜前處理；生物合成的前體物質(zhì)；發(fā)酵過程中的促進劑和抑制劑； 常見培養(yǎng)基的配方舉例 ? 營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基： 牛肉膏 3g，蛋白胨 10g， NaCl5g，瓊脂 1520g，水 1000ml， ； ? 淀粉瓊脂培養(yǎng)基（高氏 1號培養(yǎng)基）： 可溶性淀粉 20g， KNO31g， ， ，瓊脂 20g，水 1000ml。 ? PDA培養(yǎng)基： 馬鈴薯（去皮） 200g，蔗糖或葡萄糖 15g，瓊脂1520g，水 1000ml。 淀粉酸解反應(yīng)動力學(xué) ? 反應(yīng)速度常數(shù) k=α CAδ λ α ： 催化常數(shù)，與酸的種類相關(guān)； CA ：酸的體積摩爾濃度； δ ：多糖的水解常數(shù)，其值越低，表示多糖越難水解； λ ：溫度對水解速度影響的常數(shù) End Thanks! 第三章 嫌氣發(fā)酵機制 ?微生物細胞的調(diào)節(jié)機制 ?糖酵解途徑特點及調(diào)節(jié)機制 ?酒精發(fā)酵機制 ?甘油發(fā)酵機制 ?乳酸發(fā)酵機制 重點： 糖酵解途徑的特點及調(diào)節(jié)機制； 酒精發(fā)酵機制；甘油的合成機制； 乳酸發(fā)酵機制；同型乳
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