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正文內(nèi)容

細(xì)胞凋亡實驗技術(shù)總結(jié)-文庫吧

2025-10-15 06:32 本頁面


【正文】 用的抑制因子(如生長因子、某些激素、細(xì)胞因子、某些病毒蛋白等)具有抑制凋亡的作用,有利于細(xì)胞的生存。當(dāng)這些因子缺乏時,會激發(fā)細(xì)胞凋亡。另外一些跨膜作用的刺激因子通過受體與配體的結(jié)合而激活細(xì)胞凋亡程序,其中最重要的是腫瘤壞死因子受體家族。此外,尚有多種其它凋亡誘導(dǎo)因子。在胚胎發(fā)育過程中,形態(tài)發(fā)生蛋白、生長因子、分化因子對細(xì)胞凋亡可起促進作用,又可起抑制作用。(2)細(xì)胞內(nèi)調(diào)控 細(xì)胞內(nèi)的某些特異蛋白與細(xì)胞死亡信號相連接,這些特異蛋白對細(xì)胞的死亡與否起決定作用。BCL2蛋白家族(BCL2 family of proteins)是調(diào)節(jié)線粒體通透性的主要成分,通過形成同源(BCL2/BCL2, Bax/Bax)和異源(BCL2/Bax)二聚體對細(xì)胞凋亡進行調(diào)控。BCL2同源二聚體抑制細(xì)胞凋亡,Bax同源二聚體促進細(xì)胞凋亡。此外,細(xì)胞表面受體Fas(CD95),屬TNFR家族,當(dāng)免疫細(xì)胞產(chǎn)生的Fas的配體與T細(xì)胞表面的Fas結(jié)合時,也啟動了死亡程序。這種FasFas配體介導(dǎo)的凋亡在清除免疫反應(yīng)(如自身免疫病)中被激活的淋巴細(xì)胞非常重要。細(xì)胞凋亡后的梯狀DNA 足葉乙甙誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡后的梯狀DNA(3)凋亡的實施 細(xì)胞凋亡的實施是通過蛋白水解的一系列連鎖反應(yīng)實現(xiàn)的。各種組織的細(xì)胞凋亡都要激活caspase家族。Caspase成員作為酶原的形式存在于細(xì)胞內(nèi),經(jīng)裂解激活后,迅速啟動序列性酶解死亡程序,裂解細(xì)胞骨架和細(xì)胞核蛋白基質(zhì)并激活了核酸內(nèi)切酶。在內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶作用下,DNA進行有控降解,產(chǎn)生長度為180~200 bp整倍數(shù)的DNA片段,這正好是纏繞組蛋白多聚體的長度,提示染色質(zhì)DNA恰好是在核小體與核小體連接部被切斷。DNA瓊脂糖凝膠電泳出現(xiàn)ladder也成為檢測凋亡發(fā)生的重要標(biāo)志。(4)凋亡細(xì)胞的吞噬搬運 凋亡細(xì)胞碎片的表面有標(biāo)志分子(血小板反應(yīng)素、粘附糖蛋白)有利于臨近的巨噬細(xì)胞以及其他細(xì)胞的識別、吞噬和處理。凋亡細(xì)胞的吞噬搬運過程非常有效而迅速,凋亡細(xì)胞很快消失,不留痕跡,也無炎癥反應(yīng)。4.細(xì)胞凋亡與壞死的區(qū)別 凋亡 壞死1機制 基因調(diào)控的程序化(programmed)細(xì)胞死亡,主動進行(自殺性)意外事故性(accident)細(xì)胞死亡,被動進行(他殺性)2誘因 生理性或輕微病理性刺激因子誘導(dǎo)發(fā)生,如生長因子缺乏 病理性刺激因子誘導(dǎo)發(fā)生,如缺氧、感染、中毒 死亡范圍 多為散在的單個細(xì)胞 多為聚集的大片細(xì)胞3形態(tài)特征 細(xì)胞固縮,核染色質(zhì)邊集,細(xì)胞膜及各細(xì)胞器膜完整,膜可發(fā)泡成芽,形成凋亡小體 細(xì)胞腫脹,核染色質(zhì)絮狀或邊集,細(xì)胞膜及各細(xì)胞器膜溶解破壞,溶酶體酶釋放,細(xì)胞自溶4生化特征 耗能的主動過程,有新蛋白合成,DNA早期規(guī)律降解為180200bp片段,瓊脂凝膠電泳呈特征性梯帶狀 不耗能的被動過程,無新蛋白合成,DNA降解不規(guī)律,片段大小不一,瓊脂凝膠電泳不呈梯帶狀5周圍反應(yīng) 不引起周圍組織炎癥反應(yīng)和修復(fù)再生,但凋亡小體可被鄰近細(xì)胞吞噬 引起周圍組織炎癥反應(yīng)和修復(fù)再生細(xì)胞自噬細(xì)胞自噬的生理功能1及時清除細(xì)胞中隨時產(chǎn)生的“垃圾”(如破損或衰老的細(xì)胞器、長壽命蛋白質(zhì)、合成錯誤或折疊錯誤的蛋白質(zhì)等),保持一種基礎(chǔ)、低水平的自噬活性是至關(guān)重要的,自噬的產(chǎn)物,如氨基酸、脂肪酸等小分子物質(zhì),細(xì)胞自噬就是一個“備用倉庫”.鑒于上述作用,在正常生理情況下,:(1)首先,腫瘤細(xì)胞本身就具有高代謝的特點,對營養(yǎng)和能量的需求比正常細(xì)胞更高,但腫瘤微環(huán)境往往不能如意,如腫瘤發(fā)生初始期到血管發(fā)生之前、腫瘤長大發(fā)生血管崩塌時、腫瘤細(xì)胞脫離原發(fā)灶游走時等都會出現(xiàn)營養(yǎng)不足或供應(yīng)中斷,而此時提高自噬活性可以有助于度過這一危機(2)(2)當(dāng)化療、放療后,腫瘤細(xì)胞會產(chǎn)生大量的破損細(xì)胞器、損壞的蛋白質(zhì)等有害成分,此時提高自噬活性可及時清除這些有害物質(zhì),并提供應(yīng)急的底物和能量為修復(fù)受損DNA贏得時間和條件.(3)另外,抑制細(xì)胞自噬可以導(dǎo)致細(xì)胞更容易發(fā)生凋亡,然而,細(xì)胞自噬在腫瘤的生成和癌癥的發(fā)展中到底扮演怎樣的角色,可能產(chǎn)生于以下幾種機制(1)細(xì)胞自噬的抑制會加重壞死細(xì)胞的局部炎癥反應(yīng),從而導(dǎo)致腫瘤的生長(2)而細(xì)胞自噬可以清除壞死的細(xì)胞器,調(diào)整內(nèi)源性的壓力,從而穩(wěn)定基因組,減少細(xì)胞向癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)變.(3)細(xì)胞自噬既可以加強細(xì)胞檢驗點的檢查作用,又起到了穩(wěn)定基因組的作用,從而減少了細(xì)胞的癌變第三篇:生物細(xì)胞凋亡總結(jié)課程報告都在說二十一世紀(jì)是生命科學(xué)的世紀(jì),很榮幸能夠進入生物科學(xué)這個行業(yè)。關(guān)于對自己所學(xué)專業(yè),可能最初是興趣讓我來到這個專業(yè),不是太清楚為什么會對這個專業(yè)有這么大的熱情,但真的很喜歡它。生物技術(shù),最官方的定義是指人們以現(xiàn)代生命科學(xué)為基礎(chǔ),結(jié)合其他基礎(chǔ)科學(xué)的科學(xué)原理,采用先進的科學(xué)技術(shù)手段,按照預(yù)先的設(shè)計改造生物體或加工生物原料,為人類生產(chǎn)出所需產(chǎn)品或達到某種目的。生物技術(shù)是人們利用微生物、動植物體對物質(zhì)原料進行加工,以提供產(chǎn)品來為社會服務(wù)的技術(shù)。它主要包括發(fā)酵技術(shù)和現(xiàn)代生物技術(shù)?,F(xiàn)代生物技術(shù)綜合基因工程、分子生物學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、胚胎學(xué)、免疫學(xué)、有機化學(xué)、無機化學(xué)、物理化學(xué)、物理學(xué)、信息學(xué)及計算機科學(xué)等多學(xué)科技術(shù),可用于研究生命活動的規(guī)律和提供產(chǎn)品為社會服務(wù)等。再我自己看來生物技術(shù)其實是一個既可以看做一個基礎(chǔ)學(xué)科也可以看做是一個很新興的,綜合性的學(xué)科。其實生物技術(shù)這是一個很綜合性的學(xué)科,現(xiàn)在和很多領(lǐng)域接軌,對我們而言這是機遇和挑戰(zhàn)。對我自己而言,我想在生物技術(shù)這方面有所建樹,最主要的還是在科研方面能攻克一些難題,雖然可能現(xiàn)在想法不是太成熟但是我相信經(jīng)過幾年的磨練與努力我能夠攻破這些難題。希望能夠在大一下就能夠進入實驗室,學(xué)一些基礎(chǔ)的實驗技能為以后自己做項目打下基礎(chǔ)。然后關(guān)于自己的專業(yè),現(xiàn)在我們所學(xué)的知識其實普遍落后,教科書的編排更新不及時,可能我們學(xué)到的東西可能學(xué)校外面已經(jīng)開始產(chǎn)業(yè)化了,測序技術(shù)已經(jīng)開始第四代了,而我們可能畢業(yè)前一年才開始學(xué)習(xí)切片制作,學(xué)習(xí)的東西很古老,再就是我們這個專業(yè),并沒有像其他幾大理科領(lǐng)域一樣有清晰的邏輯和量化,這導(dǎo)致了很多小領(lǐng)域只有開頭和結(jié)果而沒有一個可復(fù)制的過程,而沒有可復(fù)制的過
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