【正文】 ........ 8 玻碳電極支撐的磷脂雙層膜的制備 .............................................................. 8 金電極支撐的硫醇單層膜的制備 .................................................................. 8 結(jié)果與討論 ............................................................................................................... 8 探針溶液對成膜效果的影響 ............................................................................. 9 電極在空氣中的放置時間對 玻碳電極支撐的磷脂雙層膜 的通透性的影響 ........ 9 在 KCL 溶液中水化不同時間對膜通透性的影響 .................................................10 不同溶劑和藥物對玻碳電極支撐的磷脂雙層膜通透性 的影響 ........................... 11 喜樹堿和玻碳電極支撐的磷脂雙層膜相互作用 ................................................12 多粘菌素 B 和玻碳電極支撐的磷脂雙層膜相互作用 ..........................................13 玻碳電極支撐的磷脂雙層膜和金電極支撐的硫醇單層膜的比較 ........................14 結(jié)論 ..........................................................................................................................15 第三章 電化學(xué)方法研究硫酸多粘菌素 B 與磷脂酰膽堿 的相互作用 16 實驗部分 ...................................................................................................................16 主要試劑與儀器 .............................................................................................16 鄭州 大 學(xué) 化學(xué)系 本科 畢業(yè)論 文 HDM 單層膜和 HDMDMPC 雜化雙層膜的制備 ................................................17 結(jié)果與討論 ................................................................................................................17 HDMDMPC 雜化雙層膜電極的 CV 表征 ...........................................................17 裸金電極及 HDMDMPC 雜化雙層膜修飾電極的 EIS 表征 ................................18 硫酸多粘菌素 B 與 HDMDMPC 雜化雙層膜的相互作用研究 ............................19 硫酸多粘菌素 B 的濃度對其與 HDMDMPC 雜化雙層膜相互作用的影響 .19 作用時 間對硫酸多粘菌素 B 和 HDMDMPC 雜化雙層膜相互作用的影響 .20 膽固醇對硫酸多粘菌素 B 和 HDMDMPC 雜化雙層膜相互作用的影響 ....21 溶液 pH 對硫酸多粘菌素 B 和 HDMDMPC 雜化雙層膜相互作用的影響 ....22 HDMDMPC 雜化雙層膜與硫酸多粘菌素 B 作用后的自我修復(fù) ..........................22 修復(fù)時間對膜修復(fù)程度的影響 ................................................................22 結(jié) 論 ........................................................................................................................24 第四章 總結(jié) .................................................................................. 25 參考文獻(xiàn) ........................................................................................... 26 致 謝 ............................................................................................... 27 鄭州 大 學(xué) 化學(xué)系 本科 畢業(yè)論 文 摘要 生物膜結(jié)構(gòu)是細(xì)胞結(jié)構(gòu)的基本形式，生物膜參與生物學(xué)中許多重要的過程。 當(dāng)藥物進(jìn)入人體內(nèi)，生物膜是藥物進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的一道屏障，因此研究藥物和生物膜的相互作用有利于了解藥物在體內(nèi)的吸收、分布以及生物利用度等情況。 由于生物膜結(jié)構(gòu)、組成以及膜內(nèi)外的環(huán)境都非常復(fù)雜，目前的許多研究還不能在膜原位進(jìn)行，為了便于對 生物膜 的各種物理化學(xué)特性進(jìn)行深入研究 ，實驗室 往往 制備一種或幾種脂質(zhì)組成的各種 模擬生物 膜結(jié)構(gòu) 并對其進(jìn)行各項研究。本文主要 采用電化學(xué)循環(huán)伏安法、 電化學(xué)交流阻抗譜方法對金電極支撐 HDMDMPC 混合雙層膜模擬體系進(jìn) 行了研究，這對于了解藥物的作用靶點及新藥的設(shè)計、優(yōu)化等均具有重要的意義。本文研究的主要內(nèi)容如下： 1. 本部分主要利用自組裝技術(shù)在金電極表面制備了金支撐的混合雙層膜（ HDMDMPC） ,并采用循環(huán)伏安法（ CV）以及電化學(xué)交流阻抗譜（ EIS）技術(shù)對由抗生素硫酸多粘菌素 B 引起金電極支撐的硫醇 磷脂混合雙層膜電化學(xué)行為的變化以及該模擬生物膜的重新自組裝行為等進(jìn)行了測定。 電化學(xué)實驗結(jié)果表明，硫酸多粘菌素 B能夠破壞磷脂分子的有序排列，誘發(fā)混合雙層膜產(chǎn)生孔洞或缺陷，導(dǎo)致混合雙層膜的膜電阻降低，從而增加了探針分子Fe(CN)63/4與電極間的傳遞。首先，實驗發(fā)現(xiàn)這種相互作用的強度受到硫酸多粘菌素B 溶液的濃度、 pH 及其相互作用的時間和膽固醇的影響；其次，通過自修復(fù)實驗的考察，我們發(fā)現(xiàn)，被硫酸多粘菌素 B破壞的雙層膜電極在一定程度內(nèi)膜上的磷脂分子可以在 KCl 支持液中重新自組裝，且這種自我修復(fù)的程度與修復(fù)時間和與之相互作用的硫酸多粘菌素 B的濃度有關(guān) 。 支撐 磷脂 雙 層膜的制備 本部分主要是對幾種不同條件在裸玻碳電極上制備的 DMPC 磷脂膜進(jìn)行電化學(xué)測試，主要采用的是循環(huán)伏安法。 電化學(xué)實驗結(jié)果表明 ， DMPC 能夠在裸 玻碳電極上成膜 。實驗方法是先配置 1mg/ml的 DMPC 三氯甲烷溶液， 將玻碳電極在紗布上打磨，然后在拋光布上用 m的氧化鋁進(jìn)行拋光，然后在 ，然后分別在蒸餾水和乙醇中超聲 1min，用氮氣吹干后立即滴 5μ L 成膜液， 放置空氣半小時后，浸入 ， 就可以得到玻碳電極支撐的磷脂雙層膜。 該雙層膜穩(wěn)定性較差 ,水 ,甲醇 ,乙醇 均能破壞該磷脂雙層膜 ,引起膜的通透性增加。 關(guān)鍵詞： 硫酸多粘菌素 B 混合雙層膜 磷脂 雙層膜 循環(huán)伏安法 Abstract 鄭州 大 學(xué) 化學(xué)系 本科 畢業(yè)論 文 This paper briefly introduces the basic concepts of the biofilm, the basic structure of membrane molecules, membrane position, and several models of biofilm. Biofilm structure is the basic form of cell structure, and the biofilm take part in many important processes in biology. Cell membrane is the first barrier to drug, so the study of the interaction of drugs and biofilm is beneficial for understanding of the drug in the body39。s absorption, distribution, and bioavailability and so on. The biofilm structure, position and the membrane environment are very plex, so many of the current study can not be carried out in situ in the membrane. In order to facilitate the biofilmdepth study, in laboratory, researchers often prepare various simulation biomimetic membranes which often posed of one or several kinds of lipids and carry various studies for that. That will be very useful for understanding the drug targets, new drug design, and its optimization and so on. The major elements are as follows: 1. In this part, the electrochemical behavior of bilayer thiollipid membrances (HDMDMPC) on gold electrode interacted with polymyxin B sulfate was investigated using cyclic voltammetry(CV) and electrochemical impedance spectroscopy(EIS). Experimental results show that polymyxin B sulfate can disrupt the orderly arrangement of phospholipid molecules and induce pores or defects on mixed bilayers, and resulting in hybrid bilayer membrane resistance decreased. Firstly, the interaction depends on time, concentration of polymyxin B sulfate, pH and cholesterol。 secondarily, the selfrepaired experiment shows that the defective mixed bilayers after interaction can be reselfassembly in the KCl solution, and the extent of this selfrepair and repair time relate to the concentration of polymyxin B sulfate which interact with mixed bilayers。 thirdly, the investigation of their interaction using probes bearing different charge shows that the pores in the mixed bilayers are no charge selective, but the through intensity of ions inside or outside membrane may be related to electrical properties of drug. 2. Glassy carbon electrode support the preparation of the bilayer membrane This part of several different conditions is mainly in the naked glassy carbon electrode preparat