hiv抗體檢測與質(zhì)量控制培訓(xùn)課件-文庫吧
2025-02-20 18:56 本頁面
【正文】 有效期內(nèi) ? 酶聯(lián)免疫試劑應(yīng)批批檢合格 ? 選擇敏感性和特異性高的試劑 篩查方法 ? 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) （ ELISA） ? 化學(xué)發(fā)光或免疫熒光試驗(yàn)（ CIA/IFA） ： 采用發(fā)光或熒光底物，用發(fā)光或熒光儀測定結(jié)果 ? 快速檢測 （ RT） 及其它檢測試驗(yàn) 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ ELISA） ? HIV抗體檢測試劑（第三代）： 檢測 HIV1/2抗體 ? HIV抗原抗體聯(lián)合檢測試劑（第四代）： 可同時(shí)檢測血液中 HIV1P24抗原和 HIV1/2抗體 ? 用 酶標(biāo)儀 測定結(jié)果 ? 有效試驗(yàn)的陰性和陽性對照必須符合試劑盒規(guī)定 ELISA試驗(yàn)中可能出現(xiàn)的問題和原因分析 問題 可能的原因（非試劑盒本身的原因） 測定的重復(fù)性差 ，孔間發(fā)生污染 ，加在孔壁上部非包被區(qū) 、洗板、顯色時(shí)間不一致 ELISA試驗(yàn)中可能出現(xiàn)的問題和原因分析 問題 可能的原因（非試劑盒本身的原因） 白板（陽性對照不顯色） ，量筒不干凈含酶抑制物 A或 B 全部板孔都有顯色 ELISA測定中的干擾因素 ? 內(nèi)源性干擾因素 ? 外源性干擾因素 內(nèi)源性干擾因素 ? 人血清標(biāo)本中含有非特異性干擾物質(zhì)，可以不同程度影響檢測結(jié)果。常見的有：類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、嗜異性抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗體、自身抗體、溶菌酶、磷脂、藥物小分子等 外源性干擾因素 ? 常常是由于血標(biāo)本的采集、貯存等不當(dāng)所致。如標(biāo)本溶血、細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存時(shí)間過長、凝集不全、反復(fù)凍融等 分析 ELISA測定中出現(xiàn)的假陽性或假陰性結(jié)果時(shí)，需綜合考慮試劑因素、 操作因素和標(biāo)本因素等。 ELISA法結(jié)果判斷 ? 臨界值概念 : 將檢測的陽性和（或）陰性對照的OD值代入計(jì)算公式計(jì)算出來的判斷陽性和陰性結(jié)果的界值 ? 判斷標(biāo)準(zhǔn) :標(biāo)本 OD值與臨界值的比值大于等于1(S/CO≥1) 為陽性 ? 注意 :不同廠家、不同方法臨界值計(jì)算公式不同 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ ELISA） ? 優(yōu)點(diǎn)：準(zhǔn)確性高、價(jià)格低廉、判斷結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)客觀、結(jié)果便于記錄和保存 ? 用途：流行病學(xué)監(jiān)測及臨床大量標(biāo)本的檢測 化學(xué)發(fā)光或免疫熒光試驗(yàn) ? 采用 發(fā)光或熒光底物 ? 既可檢測抗體，也可聯(lián)合檢測抗原抗體 ? 酶或熒光標(biāo)記的 HIV抗原或抗體，加發(fā)光或熒光底物 ? 用 發(fā)光儀或熒光儀 測定結(jié)果 （ 1）免疫滲濾試驗(yàn)：斑點(diǎn)免疫膠體金（或膠體硒）快速試驗(yàn) ? 以硝酸纖維膜為載體 ? HIV抗原點(diǎn)狀固定在膜上 ? 加待檢樣品 ? 陽性結(jié)果在膜上抗原部位顯示出有色斑點(diǎn) ? 有效試驗(yàn)的質(zhì)控點(diǎn)必須顯色 快速檢測（ RT）及其它檢測試驗(yàn) 斑點(diǎn)免疫膠體金快速診斷試驗(yàn) （ 2）免疫層析試驗(yàn)： ? 以硝酸纖維膜為載體 ? HIV抗原線狀固定在膜上 ? 待檢樣品（血液、唾液或尿液）沿著固相載體遷移 ? 陽性結(jié)果在膜上抗原部位顯示出有色條帶 ? 有效試驗(yàn)的質(zhì)控帶必須顯色 第四代快速試劑（ SD）： 可區(qū)分抗原抗體的檢測 216。全血樣品 加 50ul樣品于樣品墊中 手指血方法 靜脈血方法 加一滴緩沖液 15分鐘內(nèi)讀取結(jié)果 快速檢測（ RT）及其它檢測試驗(yàn) 病人條 質(zhì)控條 快速檢
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