【正文】 顆粒直徑較小、機(jī)械強(qiáng)度及比表面積均大的球形硅膠微粒，因而柱效率大大提高。 三、根據(jù)物質(zhì)的吸附性質(zhì)差別進(jìn)行分離 物理吸附 (physical absorption) 也叫表面吸附 ,是因構(gòu)成溶液的分子 (含溶質(zhì)及溶劑 )與吸附劑表面分子的分子間力的相互作用所引起。 特點(diǎn)： ① 是無選擇性、 ② 吸附與解吸過程可逆、 ③ 可快速進(jìn)行。故在實(shí)際工作中用得最廣。如采用硅膠、氧化鋁及活性炭為吸附劑進(jìn)行的吸附色譜即屬于這一類型。 化學(xué)吸附 (chemical absorption),如黃 酮 等酚酸性物 質(zhì) 被堿性氧化 鋁 吸附 ,或生物堿被酸性硅膠吸附等 吸附質(zhì)與吸附劑之間要發(fā)生化學(xué)反應(yīng)的一類吸附。特點(diǎn) ： ① 具有 選擇 性、 ② 吸附十分牢固、有時甚至不可逆 ,故用得 較 少 。半化學(xué)吸附 (semichemical absorption),如聚 酰 胺 對 黃 酮類 、 醌類 等化合物之 間 的氫鍵 吸附 ,力量 較 弱 ,介于物理吸附與化學(xué)吸附之 間 的一類吸附 。1. 物理吸附基本規(guī)律 （ 2）被分離的物質(zhì)與吸附劑、洗脫劑共同構(gòu)成吸附過程中的三要素，彼此緊密相連。（ 1）物理吸附過程一般無選擇性，但吸附強(qiáng)弱大體遵循 “相似者易于吸附 ”的經(jīng)驗(yàn)規(guī)律。硅膠、氧化鋁因均為極性吸附劑 ,故有以下特點(diǎn) :(1)對 極性物 質(zhì) 具有 較 強(qiáng) 的 親 和能力 ,極性 強(qiáng) 的溶 質(zhì)將被 優(yōu) 先吸附。(2)溶 劑 極性越弱 ,則 吸附 劑對 溶 質(zhì) 將表 現(xiàn) 出 較 強(qiáng)的吸附能力。溶 劑 極性增 強(qiáng) ,則 吸附 劑對 溶 質(zhì) 的吸附能力即隨之減弱。(3)溶 質(zhì) 即使被硅膠、氧化 鋁 吸附 ,但一旦加入極性較 強(qiáng) 的溶 劑時 ,又可被后者置 換 洗脫下來?；钚蕴恳?yàn)槭欠菢O性吸附劑 ,故與硅膠、氧化鋁相反 ,對非極性物質(zhì)具有較強(qiáng)的親和能力 ,在水中對溶質(zhì)表現(xiàn)出強(qiáng)的吸附能力。溶劑極性降低 ,則活性炭對溶質(zhì)的吸附能力也隨之降低。故從活性炭上洗脫被吸附物質(zhì)時 ,洗脫溶劑的洗脫能力將隨溶劑極性的降低而增強(qiáng)。 極性及其強(qiáng)弱判斷 極性強(qiáng)弱是支配物理吸附過程的主要因素 。所謂極性乃是一種抽象概念 ,用以表示分子中電荷不對稱(asymmetry)的程度，并大體上與偶極矩 (dipolemoment)、 極化度（ polarizability） 及介電常數(shù)（ dielectricconstant） 等概念相對應(yīng)。 （ 1） 官能 團(tuán) 的極性 按下列官能團(tuán)的順序增強(qiáng)： — CH2— CH2— ， — CH2=CH2— ， — OCH3， — COOR， C=O， — CHO， — NH2， — OH， — COOH（ 2）化合物的極性則由分子中所含官能團(tuán)的種類、數(shù)目及排列方式等綜合因素所決定。（ 3）、 大體上溶 劑 極性的大小可以根據(jù)介 電 常數(shù)(ε) 的大小來判斷。 介電常數(shù)越大，則極性越大。一般溶劑的介電常數(shù)按下列順序增大：環(huán)己烷（ ），苯（ ），無水乙醚（ ），氯仿（ ），乙酸乙酯（ ），乙醇（ ），甲醇（ ），水（ ） 3.簡單吸附法進(jìn)行物質(zhì)的濃縮與精制 簡單吸附，如在結(jié)晶及重結(jié)晶過程中加入活性炭進(jìn)行的脫色、脫臭等操作，在物質(zhì)精制過程中應(yīng)用很廣。 一葉萩堿　 curinine本品系由大戟科植物一葉萩葉中提取的一種生物堿， 現(xiàn) 已人工合成?！拘誀睢?其硝酸 鹽為 白色或微粉紅 色粉末，味苦，能溶于水。【 藥 理及 應(yīng) 用】 作用與士的寧相似。但毒性 較 低。能 興奮 脊髓。增 強(qiáng) 反射及肌肉 緊張 度。體內(nèi)代謝較 快，無蓄 積 。 動 物 實(shí)驗(yàn) 表明，小量能增 強(qiáng) 心肌收 縮 ，并有抑制膽堿 酯 酶 作用。用于治 療 小兒麻痹癥及其后 遺 癥、面神 經(jīng) 麻痹， 對 神 經(jīng) 衰弱、低血 壓 、植物神經(jīng) 功能紊亂所引起的 頭暈 以及耳鳴 、耳 聾 等有一定 療 效。4. 吸附柱色譜法用于物質(zhì)的分離 吸附色譜法中硅膠、氧化鋁柱色譜在實(shí)際工作中用得最多。有關(guān)注意事項如下 :(1) 硅膠、氧化鋁吸附柱色譜過程中 ,吸附劑的用量一般為試樣量的 30~60倍。試樣極性較小、難以分離者 ,吸附劑用量可適當(dāng)提高至試樣量的 100~200倍。 據(jù)此可選用適當(dāng)規(guī)格的色譜管 ,實(shí)驗(yàn)室中常用色譜管的規(guī)格如下所示，其高度與直徑比約為 (15:1)~(20:1)。 色譜管內(nèi)徑 (cm): 10 長度 (cm):10 15 30 45 60 75 90 120 150(2)硅膠、氧化鋁吸附柱色譜 ,應(yīng)盡可能選用極性小的溶劑裝柱和溶解試樣 ,以利試樣在吸附劑柱上形成狹窄的原始譜帶。 (3) 洗脫用溶劑的極性宜逐步增加 ,但跳躍不能太大。實(shí)踐中多用混合溶劑 ,并通過巧妙調(diào)節(jié)比例以改變極性 ,達(dá)到梯度洗脫分離物質(zhì)的目的。 (4)為避免發(fā)生化學(xué)吸附 ,酸性物質(zhì)宜用硅膠、堿性物質(zhì)則宜用氧化鋁進(jìn)行分離。 (5) 如液 液分配色譜中所述 ,吸附柱色譜也可用加壓方式進(jìn)行 ,溶劑系統(tǒng)可通過 TLC進(jìn)行篩選。 5. 聚酰胺吸附色譜法 聚酰胺 (polyamide)吸附屬于氫鍵吸附 ,是一種用途十分廣泛的分離方法 ,極性物質(zhì)與非極性物質(zhì)均可適用 ,但特別適合分離酚類、醌類、黃酮類化合物。 (1)聚酰胺的性質(zhì)及吸附原理 一般認(rèn)為是通過分子中的酰胺羰基與酚類、黃酮類化合物的酚羥基 ,或酰胺鍵上的游離胺基與醌類、脂肪羧酸上的羰基形成氫鍵締合而產(chǎn)生吸附。至于吸附強(qiáng)弱則取決于各種化合物與之形成氫鍵締合的能力。通常在含水溶劑中大致有下列規(guī)律 :① 形成 氫鍵 的基 團(tuán) 數(shù)目越多 ,則 吸附能力越強(qiáng) 。② 成 鍵 位置 對 吸附力也有影響。易形成分子內(nèi) 氫鍵者 ,其在聚 酰 胺上的吸附即相 應(yīng) 減弱。③ 分子中芳香化程度高者 ,則 吸附性增 強(qiáng) ；反之 ,則減弱。如：以上是僅就化合物本身對聚酰胺的親和力而言。但吸附因?yàn)槭窃谌芤褐羞M(jìn)行 ,故溶劑也會參加吸附劑表面的爭奪 ,或通過改變聚酰胺對溶質(zhì)的氫鍵結(jié)合能力而影響吸附過程。顯然 ,聚酰胺與酚類或醌類等化合物形成氫鍵締合的能力在水中最強(qiáng) ,在含水醇中則隨著醇濃庭的增高而相應(yīng)減弱 ,在高濃度醇或其它有機(jī)溶劑中則幾乎不締合。 （ 2） 聚酰胺柱的洗脫在聚酰胺柱上的洗脫能力由弱至強(qiáng) ,可大致排列成下列順序 :水 → 甲醇 → 丙酮 → 氫氧化納水溶液 → 甲酰胺→ 二甲基甲酰胺 → 尿素水溶液 (3) 聚酰胺色譜的應(yīng)用 聚酰胺對一般酚類、黃酮類化合物的吸附是可逆的 ,分離效果好 ,加以吸附容量又大 ,故聚酰胺色譜特別適合于該類化合物的制備分離。此外 ,對生物堿、萜類、甾體、糖類、氨基酸等其它極性與非極性化合物的分離也有著廣泛的用途。 6. 大孔吸附樹脂 (1) 大孔吸附樹脂的吸附原理 大孔吸附樹脂是吸附性和分子篩性原理相結(jié)合的分離材料 ,它的吸附性是由于范德華引力或產(chǎn)生氫鍵的結(jié)果。分子篩性是由于其本身多孔性結(jié)構(gòu)的性質(zhì)所決定。 (2) 影響吸附的因素 比表面積、表面電性、能否與化合物形成氫鍵（ 3） 大孔吸附樹脂的應(yīng)用 大孔吸附樹脂現(xiàn)在已被廣泛應(yīng)用于天然化合物的分離和富集工作中 ,如苷與糖類的分離、生物堿的精制。在多糖、黃酮、三萜類化合物的分離方面都有很好的應(yīng)用實(shí)例。 （ 4） 洗脫液的選擇 洗脫液可使用甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙脂等。根據(jù)吸附作用強(qiáng)弱選用不同的洗脫液或不同濃度的同一溶劑。對非極性大孔樹脂 ,洗脫液極性越小 ,洗脫能力越強(qiáng)。對于中等極性的大孔樹脂和極性較大的化合物來說 ,則選用極性較大的溶劑為宜。 四、 根據(jù)物質(zhì)分子大小差別進(jìn)行分離 凝膠過濾法（ Gelfiltration） 凝膠過濾法也叫凝膠滲透色譜 (Gelpermeationchromatography)、分子篩過濾（ molecularsievefiltration）、排祖色譜（ exclusionchromatography），系利用分子篩分離物質(zhì)的一種方法。其中所用載體，如葡聚糖凝膠，是在水中不溶、但可膨脹的球形顆粒，具有三維空間的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。（ 1）原理：分子篩原理。即利用凝膠的三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的分子篩的過濾作用將化合物按分子量大小不同進(jìn)行分離。 （ 2）出柱順序：按分子由大到小順序先后流出并得到分離。 （ 3）常用的溶劑：① 堿性水溶液（ ）含鹽水溶液（）② 醇及含水醇，如甲醇、甲醇 — 水③ 其他溶劑：如含水丙酮，甲醇 氯仿（ 4）凝膠的種類與性質(zhì) 種類很多，常用的有以下兩種：① SephadexG：葡聚糖凝膠，只適用于水中應(yīng)用，且不同規(guī)格適合分離不同分子量的物質(zhì)。② Sephadex LH20：羥丙基葡聚糖凝膠，為Sephadex G25經(jīng)羥丙基化后得到的產(chǎn)物，具有以下兩個特點(diǎn)：具有分子篩特性，可按分子量大小分離物質(zhì)；在由極性與非極性溶劑組成的混合溶劑中常常起到反相分配色譜的作用，適合于不同類型有機(jī)物的分離。應(yīng)用最廣。 交聯(lián)葡聚糖的化學(xué)結(jié)構(gòu) 膜過濾法膜過濾法是一種用天然或人工合成的膜，以外界能量或化學(xué)位差為推動力，對雙組分或多組分的溶質(zhì)和溶劑進(jìn)行分離、分級、提純或富集的方法。 （ 1）概念膜過濾技術(shù)主要包括滲透、反滲透、超濾、電滲析、液膜技術(shù)等。 （ 2）分類透析法透析法是膜過濾法中的一種。 （ 1）原理：透析法是利用小分子物質(zhì)在溶液中可通過半透膜、而大分子物質(zhì)不能透過半透膜的性質(zhì)，以達(dá)到分離的目的，本質(zhì)上是一種分子篩作用。 （ 2）應(yīng)用：對于生物大分子，一般可以通過透析法進(jìn)行濃縮和精制。如藥用酶的精制。分離和純化皂苷、蛋白質(zhì)、多肽、多糖等大分子物質(zhì)，可將其留在半透膜內(nèi)，而將如無機(jī)鹽、單糖、雙糖等小分子的物質(zhì)透過半透膜，進(jìn)入膜外的溶液中，而加以分離精制。 五、 根據(jù)物質(zhì)離解度不同進(jìn)行分離 具有酸性、堿性、兩性基團(tuán)的化合物在水中多呈解離狀態(tài)，據(jù)此可用離子交換法進(jìn)行分離。 ?固定相：離子交換樹脂離子交換法分離物質(zhì)的原理?流動相：水或含水溶劑洗脫液：強(qiáng)酸性陽離子交換樹脂（ H型） —— 稀氨水洗脫 強(qiáng)堿性陰離子交換樹脂（ OH型） —— 稀氫氧化鈉洗脫?原理：離子交換原理強(qiáng)酸性陽離子交換樹脂的結(jié)構(gòu)離子交換樹脂的結(jié)構(gòu)及性質(zhì)根據(jù)交換基團(tuán)不同分為：① 陽離子交換樹脂 強(qiáng)酸性 （ — SO3H+）弱減性（ — COOH+）② 陰離子交換樹脂強(qiáng)堿性 [— N+（ CH3） 3Cl]弱減性（ —NH 2及仲胺、叔胺 基） 分類 應(yīng)用① 用于不同電荷離子的分離，如水提取物中的酸性、堿性、兩性化合物的分離。② 用于相同電荷離子的分離，如同為生物堿，但堿性強(qiáng)弱不同，仍可用離子交換樹脂分離。 六、根據(jù)物質(zhì)的沸點(diǎn)進(jìn)行分離 —— 分餾法 概念： 分餾法是利用中藥中各成分沸點(diǎn)的差別進(jìn)行提取分離的方法。一般情況下，液體混合物沸點(diǎn)相差 100℃以上時，可用反復(fù)蒸餾法；沸點(diǎn)相差 25℃ 以下時，需用分餾柱；沸點(diǎn)相差越小，則需要的分餾裝置越精細(xì)。 2．應(yīng)用：揮發(fā)油、一些液體生物堿的提取分離常采用分餾法。 色譜是研究并應(yīng)用于分離分析領(lǐng)域的一門科學(xué)技術(shù)，比較公認(rèn)的色譜定義是：由于物質(zhì)的吸著程度不同，在外加流體的作用下引起微分的滯留作用的差異。由此定義出發(fā)，根據(jù)移流相的不同，可分為氣相色譜，液相色譜，超臨界流體色譜。再根據(jù)固定相的不同，分離機(jī)理的不同，再分為氣液色譜、氣固色譜、填充柱色譜、毛細(xì)管柱色譜，凝膠色譜、紙色譜、薄層色譜、毛細(xì)管電泳、逆流色譜及場流色譜（單相色譜）等。 結(jié)構(gòu)測定的一般程序純度鑒定推測母體結(jié)構(gòu)類型功能基情況分子量分子式的確定波譜、化學(xué)方法推測出結(jié)構(gòu)式人工合成進(jìn)行確認(rèn)seePage27結(jié)構(gòu)測定純度確定 最基本的條件? 檢查純度的方法：? ? 外觀、顏色、形態(tài)是否均一； ? 測定各種物理常數(shù)，如熔點(diǎn)、沸點(diǎn)、比旋光度、折光率等，這些物理常數(shù)都反映了化合物的純度。? ? 如果可能是已知物，用已知結(jié)構(gòu)的對照品進(jìn)行對照 測定或測定它們的共熔點(diǎn)等，也可對照文獻(xiàn)報導(dǎo)值（ 注意各種測定條件的一致性 ）? ? 薄層層析 （ 三種 展開系統(tǒng)和三種顯色方法 ）? ? 高效液相層析，化學(xué)方法 — 輔助手段 某些成分或功能基，可以和一些特定試劑產(chǎn)生各種顏色或沉淀，有助于判斷化合物類型和功能基：? ? 生物堿類大都能和生物堿沉淀試劑產(chǎn)生沉淀；? ? 羥基葸醌類遇堿呈紅色； ? ? 鹽酸一鎂粉試劑能和許多黃酮類化合物呈色，鑒別功能基的化學(xué)反應(yīng)：? ?三氯化鐵反應(yīng)、三氯化鋁反應(yīng)等等。 ? ?利用在酸水或堿水中的溶解度情況，提示該化合物堿性功能基或酸性功能基的存在以及有無內(nèi)酯、內(nèi)酰胺結(jié)構(gòu)?；瘜W(xué)方法 — 輔助手段? ● 化學(xué)降解法 將復(fù)雜分子通過氧化、還原等化學(xué)反應(yīng)，降解為幾個結(jié)構(gòu)比較簡單又穩(wěn)定的小分子化合物，通過對降解產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)鑒定，再按降解機(jī)理合理地推導(dǎo)出原來可能的化學(xué)結(jié)構(gòu)式；? ● 特點(diǎn)：? ? 需用化合物量大； ? ? 反應(yīng)劇烈；? ? 主要產(chǎn)物得率少又費(fèi)時；? 現(xiàn)在較少應(yīng)用，僅保留一些比較簡單規(guī)律性又較強(qiáng)的降解反應(yīng)? ● 衍生物制備 用化學(xué)方法研究結(jié)構(gòu)的一種常用手段，對結(jié)構(gòu)推定有一定意義；波譜方法 — 主要手段UVIR MSNMR四大光譜光譜? 紫外光譜 ：用波長在 200400nm之間的連續(xù)光掃描記錄下來的圖譜，吸收帶比較寬；? 紅外光譜： 用波長在 800nm20?m之間的連續(xù)光掃描記錄下來的圖譜，譜線比較尖銳；紫外光譜 (UltraViolet, UV)? 測定范圍： 波數(shù) 200～ 400nm 之間，? 作用：? ? 提供基本骨架信息 。? ? 樣品中雜質(zhì)的測定? ? 定量分析? 特點(diǎn)：? ? 液態(tài)樣品才能測定；? ? 常規(guī)紫外光譜儀價格低廉；? ? 樣品用量少（只需 510 ?g）? 生色團(tuán)： 產(chǎn)生紫外吸收的不飽和基團(tuán)，如C=C, C=O, O=N=O等；? 助色團(tuán)： 其本身是飽和基團(tuán)（常含有雜原子），它連到生色團(tuán)上時，能使后者