est文庫構建原理和應用-文庫吧
2025-07-21 01:26 本頁面
【正文】 (HGP)及其它模式生物的基因組計劃實施以來 ，人們對生物體生命現(xiàn)象的研究已不僅僅局限于局部某個或幾個基 因，而是把目光投向整個基因組 ，從整體水平去考慮基因的存在 ，結構與功能，以及基因之 間的相互關系等 .而如何 快速、高效地從基因組中獲取生物學信息 ，已成為一個急迫而富有挑戰(zhàn)性的課題擺在我們面前 。 EST技術就是基于這種認識而發(fā)展起來 的，并成為基因組學研究的一個強有力的工具。 表達序列標簽 （ expressed sequence tags,ESTs） EST的制備程序 ? 某特異組織 → 總 RNA的提取→ Poly（ A） +mRNA→cDNA→ 兩端加接頭 → 與 λzap載體連接、包裝、裂解 → 轉染 XLI—Blue細胞，進行 in vivo excision用含有 xgal和 IPTG的氨芐平板篩選 → 隨機挑取白色菌落 → 提取質?！?M13活 T7通用引物測序。 EST技術流程 應用 ? EST作為 表達基因所在區(qū)域的分子標簽 因編碼 DNA 序列 高度保守 而具有 自身的特殊性質 ，與來自非表達序列的標記（如 AFLP、RAPD、 SSR 等） 相比
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