23分解纖維素的微生物的分離-文庫(kù)吧
2025-07-21 00:37 本頁(yè)面
【正文】 上形成的透明圈 透明圈的應(yīng)用： 篩選 具有某種特定功能（如分泌某種酶） 的微生物（ 目的菌 ） . 在 長(zhǎng)出菌落 的 培養(yǎng)基 上，覆蓋質(zhì)量濃度為 1mg/mL的 剛果紅 （簡(jiǎn)稱 CR）溶液， 10～ 15min后，倒去CR溶液 ，加入物質(zhì)的量濃度為1mol/L的 NaCl溶液 ， 15min后倒掉 NaCl溶液，此時(shí)，產(chǎn)生 纖維素酶的菌落 周圍將出現(xiàn) 透明圈 。 先 培養(yǎng)微生物 ， 再 加入 剛果紅 進(jìn)行顏色反應(yīng)。 方法 1： 操作： NaCl溶液 作用 ： 漂洗作用 —— 洗去 與纖維素結(jié)合不牢的剛果紅 ， 以免出現(xiàn)的透明圈不夠清晰。 先 培養(yǎng)微生物 ， 再 加入 剛果紅 進(jìn)行顏色反應(yīng)。 方法 1： 操作： 在 倒平板 時(shí)就加入 剛果紅 。 方法 2： 配制質(zhì)量濃度為 10mg/mL的剛果紅 （ CR）溶液， 滅菌 后，按照每 200mL培養(yǎng)基加入 1mL的比例加入 CR溶液 ，混勻后 倒平板 。等培養(yǎng)基上 長(zhǎng)出菌落 后，產(chǎn)生 纖維素酶的菌落 周圍將會(huì)出現(xiàn)明顯的 透明圈。 NaCl溶液 作用 ： 漂洗作用 —— 洗去 與纖維素結(jié)合不牢的剛果紅 ， 以免出現(xiàn)的透明圈不夠清晰。 在 倒平板 時(shí)就加入 剛果紅 。 先 培養(yǎng)微生物 ， 再 加入 剛果紅 進(jìn)行顏色反應(yīng)。 方法 1： 方法 2： 操作： 染色法 優(yōu)點(diǎn) 缺點(diǎn) 方法 1 (后置染色法 ） 方法 2 (前置染色法 ） 顏色反應(yīng)基本上是纖維素分解菌的作用 操作繁瑣。 剛果紅會(huì)使菌落之間發(fā)生混雜。 操作簡(jiǎn)便， 不存在菌落混雜問(wèn)題 產(chǎn)生模糊透明圈。 ，形成明顯的透明圈。 這兩種方法各有哪些 優(yōu)點(diǎn) 不 丌足 ？ NaCl溶液 作用 ： 漂洗作用 —— 洗去 與纖維素結(jié)合不牢的剛果紅 ， 以免出現(xiàn)的透明圈不夠清晰。 二、實(shí) 驗(yàn) 設(shè) 計(jì) 土壤取樣 選擇培養(yǎng) 梯度稀釋 將樣品涂布在 鑒別 纖 維素分解菌的 培養(yǎng)基 上 挑選 產(chǎn)生透明圈的菌落（ 篩選 ） (1)分布環(huán)境 : 土壤取樣： 富含纖維素 的環(huán)境中 生物與環(huán)境的互相依存關(guān)系 ， 在富含纖維素的環(huán)境中纖維素分解菌的含量相對(duì)提高， 因此從這種土壤中獲得目的微生物的幾率要高于普通環(huán)境。 (2)原因 : 二、實(shí) 驗(yàn) 設(shè) 計(jì) 取樣的 環(huán)境 是怎樣的，作出這種選擇的 理由 是什么？ 纖維素分解菌大多分布在 富含纖維素 的環(huán)境中。因此，選擇纖維素豐富的環(huán)境，如樹林中多年落葉形成的腐殖土，多年積累的枯枝敗葉等等。 如果找不到合適的環(huán)境，可以將 濾紙 埋在土壤中，將濾紙埋在土壤中有 什么作用 ？你認(rèn)為濾紙應(yīng)該埋在土壤中 多深 ？ 將 濾紙 埋在土壤中，能使纖維素分解菌相對(duì)集中，實(shí)際上是 人工設(shè)置纖維素分解菌生存的適宜環(huán)境 。一般應(yīng)將濾紙埋于深約 10cm左右 的土壤中。 土壤取樣： 選擇培養(yǎng) 增加纖維素分解菌的濃度 ，以確保能夠從樣品中分離所需要的微生物。 (1)目的： 思考：用什么方法選擇？ 纖 維素分解菌的 選擇 培養(yǎng)基 組分 含量 /g 提供的主要營(yíng)養(yǎng) 纖維素粉 5 NaNO3 1 KH2PO4 KCl 酵母膏 水解酪素 將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到 1 000 mL 碳源、能源 無(wú)機(jī)鹽 生長(zhǎng)因子
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