《基因表達設(shè)計》ppt課件-文庫吧
2025-04-19 22:05 本頁面
【正文】 2）提高質(zhì)粒的拷貝數(shù)，防止丟失；同時可保證不需要時，細菌生長良好。 三、 SD序列及其后面堿基的成分； 四、轉(zhuǎn)錄終止區(qū)； 五、質(zhì)?？截悢?shù)及穩(wěn)定性 （ 1） Par區(qū)－－－類似染色體的著絲粒；起分配功能； （ 2）無 Par區(qū)，通過抗性篩選，保持質(zhì)粒穩(wěn)定存在。 六、起動子與克隆基因間的距離。 【 真核表達也類似，但序列、位置與原核不同，更復(fù)雜 】 原核表達系統(tǒng)常用啟動子 (promotor) ? T7 噬菌體啟動子 ? SP6噬菌體啟動子 ? Lac 啟動子 ? Trp啟動子 ? Tac 啟動子 (Trp啟動子與 Lac 啟動子雜合成，比兩者都強） ? PL和 PR啟動子（噬菌體早期左 /右向啟動子，受 λ噬菌體 CI基因負調(diào)控。溫度誘導(dǎo)） T7 噬菌體啟動子 ? 可與 T7 RNA聚合酶結(jié)合，啟動基因轉(zhuǎn)錄； ? 普通細菌不含有 T7 RNA聚合酶 ? 改造的工程菌中基因組 DNA中含有 T7 RNA聚合酶基因。 【 BL21(DE3)】 ? 所以含有 T7 噬菌體啟動子的質(zhì)粒，只有在改造的工程菌中才能表達外源蛋白。 啟動子的調(diào)控序列 ? Lac operator: （ 1） Lac I編碼阻遏蛋白，與之結(jié)合，阻止基因轉(zhuǎn)錄； （ 2） I
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