【正文】 ，在豆苗第二節(jié)間伸長的生物活性測定實驗中，用油菜甾醇內(nèi)酯處理過的豆苗在第二節(jié)間的生長速度是對照株的200倍。日本的藤條文雄發(fā)現(xiàn)油菜甾醇內(nèi)酯對水稻、黃瓜、菜豆、蔥、土豆、蘿卜、番茄、白菜和甘藍(lán)等作物都有明顯的促進生長的效果，它還可以使葡萄無核，對柑橘等果樹的生長也有一定促進作用。在田間實驗中它可以使萵苣、蠶豆、蘿卜和土豆等增產(chǎn)。油菜甾醇內(nèi)酯對樺、榆等樹苗不僅促進莖生長，還能使葉和側(cè)芽數(shù)增加。另外它還可以增強農(nóng)作物抗寒、抗病、抗鹽和抗雜草能力，增加農(nóng)作物產(chǎn)量，在低溫下降低水稻細(xì)胞內(nèi)離子的外滲，表明其對細(xì)胞膜有保護作用，能提高作物耐冷性。20多年的研究表明，油菜甾醇內(nèi)酯還存在于其它植物中，如未成熟的白菜種子、綠茶葉和栗樹蟲癭等等，同時在這些植物中還分離到其類似物，一般說來油菜甾體在花粉和未成熟的種子中含量最高。自油菜甾醇內(nèi)酯發(fā)現(xiàn)以來已有非常多的類似物從植物中分離和鑒定，而且還有相當(dāng)多的類似物被有機化學(xué)家們合成出來，它們都有相似（或更高或較低）的生理活性，這一類具有甾體骨架的物質(zhì)統(tǒng)稱為油菜甾體（brassinosteroids）。到目前為止，人們從植物中至少已分離到40余種天然油菜甾醇內(nèi)酯類化合物，對這些結(jié)構(gòu)及其活性的研究表明活性與四個因素有相關(guān)性：（１）2α,3α及22R,23R兩對羥基；（2）B環(huán)的6－酮或7－內(nèi)酯；（3）24號位為S構(gòu)型；（4）A/B環(huán)為反式稠環(huán)。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的有利用價值而且容易人工合成的主要有28高油菜甾醇內(nèi)酯（活性與油菜甾醇內(nèi)酯幾乎相當(dāng)）和24表油菜甾醇內(nèi)酯（活性相當(dāng)于天然油菜甾醇內(nèi)酯的十分之一，但由于合成相對簡單它仍然是目前使用最為廣泛的品種之一）（Scheme 2）。同時對人工合成類似物研究后還發(fā)現(xiàn)延長邊鏈可能增強活性，例如25甲基油菜甾醇內(nèi)酯（Scheme 2）具有比油菜甾醇內(nèi)酯更高的活性。目前在本研究領(lǐng)域中還有許多天然的油菜甾醇內(nèi)酯類或非油菜甾醇內(nèi)酯類但有相同（相近）效果的化合物被分離、鑒定和合成，人工合成的同類化合物也有許多被應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)。（三）相關(guān)技術(shù)領(lǐng)域國內(nèi)外發(fā)展現(xiàn)狀、趨勢目前人們得到油菜甾醇內(nèi)酯或其類似物有兩種方法：從天然產(chǎn)物中提取或人工合成。1．提取法（1）從蜂蠟中提取油菜甾醇內(nèi)酯的方法由于蜜蜂經(jīng)常在花粉中采集蜂蜜，所以在蜂蠟中有微量油菜甾醇內(nèi)酯，詳細(xì)資料可以參見專利CN85102899（2）以油料加工廢料為主要原料提取天然油菜甾醇內(nèi)酯浙江皇嘉生化有限公司利用西南師范大學(xué)黃志桂和趙明婕教授發(fā)明的提取天然油菜甾醇內(nèi)酯的高效萃取法新工藝,并利用油料加工廢料,以天然油菜甾醇內(nèi)酯為主要原料,再輔以其它有效成分,于1996年建立了天然油菜甾醇內(nèi)酯合劑工業(yè)化生產(chǎn)基地。人工合成的油菜甾醇內(nèi)酯是用有機化合物作材料，經(jīng)過7－20步復(fù)雜的有機化學(xué)反應(yīng)制成如表油菜甾醇內(nèi)酯或表高油菜甾醇內(nèi)酯，市面上都稱油菜甾醇內(nèi)酯，但純天然與人工合成物是不同的。（3）蕓苔素內(nèi)酯481成都新朝陽生物化學(xué)有限公司宣稱“我國科學(xué)家利用特殊方式提煉天然蕓苔素成功，并由成都新朝陽生物化學(xué)有限公司首家實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)，一舉達(dá)到國際領(lǐng)先水平”，但未說明提取方式。由于產(chǎn)品中主要成分是三十烷醇，天然少量油菜素內(nèi)酯的含量很低，而三十烷醇同樣是較好的植物生長促進劑，所以關(guān)于產(chǎn)品中天然油菜素內(nèi)酯到底有多大作用不得而知。2．化學(xué)合成法由于油菜甾醇內(nèi)酯類化合物在天然植物中含量甚微（106以下），目前甚至在較長的時間內(nèi)還很難有較好的生物發(fā)酵法出現(xiàn)，化學(xué)合成無疑成為研究的關(guān)鍵和熱點。自油菜甾醇內(nèi)酯的結(jié)構(gòu)確定以后，已有美國、日本、中國、意大利、白俄羅斯、捷克、德國、印度、法國、加拿大和西班牙等國的科學(xué)家相繼進行油菜甾醇內(nèi)酯及其類似物合成和活性的研究。(1982)(1982)。，同時國內(nèi)外還有幾十個研究小組致力于油菜甾醇內(nèi)酯類似物的合成研究工作。在國內(nèi)，中科院上海有機化學(xué)研究所的周維善小組從1982年開始以我國豐產(chǎn)的豬去氧膽酸為原料，采用多種不同的合成方法，對油菜甾醇內(nèi)酯及其類似物的合成進行了系統(tǒng)的研究，合成了50多個化合物，其中有30多個是新化合物，它們絕大多數(shù)具有促進植物生長的調(diào)節(jié)的活性，其中結(jié)構(gòu)最為簡單的膽甾內(nèi)酯具有非常好的效果。國內(nèi)從事油菜甾醇內(nèi)酯合成研究的還有中科院上海藥物研究所、大連化物所和云南大學(xué)（云大科技股份有限公司）等單位，中科院上海植物生理所在生物活性和構(gòu)效關(guān)系方面做了許多有意義的工作。在產(chǎn)業(yè)化工作方面，云大科技股份有限公司走在最前面。云南大學(xué)的3位年輕人，從1984年開始研究人工合成這種激素。他們當(dāng)時的目標(biāo)就是產(chǎn)業(yè)化，這跟國外主要是從理論到理論，一味追求高精尖的做法不一樣。他們的研究達(dá)到一定水準(zhǔn)后，馬上考慮進入商業(yè)化。1991年底，這幾位老師辦了一個校辦工廠，高新區(qū)幫他們申請到200萬元的火炬項目貸款。他們按現(xiàn)代企業(yè)制度改造校辦工廠，與另外兩家橫向聯(lián)合，成立了昆明云大科技產(chǎn)業(yè)有限責(zé)任公司。1998年，云大科技在上海證券交易市場上市。他們盡可能使發(fā)明人能得到合理收益，在國家還沒有相關(guān)政策時，使主要研究者能得到最高40％的權(quán)益（期權(quán)和股票）。在植物激素的產(chǎn)業(yè)化方面，他們也走在了世界最前面，一年能生產(chǎn)250公斤油菜甾醇內(nèi)酯，而在這之前產(chǎn)業(yè)化能力最好的日本年產(chǎn)只有100公斤（1公斤可用在100萬畝農(nóng)田上）。廣東江門市翔盛化工材料有限公司和山東京蓬生物藥業(yè)股份有限公司建立了較為成熟的生產(chǎn)線，浙江醫(yī)藥股份有限公司控股子公司浙江來益生物技術(shù)有限公司為增強市場競爭力，決定建立年產(chǎn)30公斤高油菜甾醇內(nèi)酯等植物生長調(diào)節(jié)劑原藥生產(chǎn)線。目前還有一些地方準(zhǔn)備上這個項目，如果不進行技術(shù)改進降低成本將來就會形成惡性競爭的局面（去年表油菜素甾醇內(nèi)酯曾報價1300元/克，目前已經(jīng)降到500元/克），所以我們在降低成本方面作了許多工作，目前我們的成本已經(jīng)降到180元/克，我們的目標(biāo)是把成本能降到100元以下，并且進入規(guī)?；a(chǎn)，真正讓廣大用戶受益，降低生產(chǎn)成本，提高產(chǎn)量，實現(xiàn)增收節(jié)支。 下面總結(jié)以下合成油菜甾醇內(nèi)酯及幾種主要類似物的主要的方法：（1）從麥角甾醇出發(fā)合成24表油菜甾醇內(nèi)酯這是目前運用較為廣泛的方法（Scheme 3）。從麥角甾醇出發(fā)，經(jīng)三元環(huán)中間體、氧化羥基、還原雙鍵、開環(huán)、雙羥化和BaeyerVilliger氧化即得到24表油菜甾醇內(nèi)酯。文獻(xiàn)報道總收率在26%左右（實驗室小試，12克規(guī)模），但實際生產(chǎn)時（100500克規(guī)模）只能達(dá)到810%，如果放大到公斤級可能還有問題。同時這條合成路線的Li/NH3還原成本較高，危險性很大，且需要700C的低溫，幾乎不可能進行規(guī)?；a(chǎn)，云大科技（產(chǎn)品“云大120”）和廣東江門農(nóng)藥廠（產(chǎn)品“天豐素”）采用這種方法。（2）從豆甾醇出發(fā)合成28高油菜甾醇內(nèi)酯雖然高純度豆甾醇（99%）的價格較高，但95%含量的豆甾醇價格只有2500/公斤，而且由于豆甾醇在B環(huán)上只有一個雙鍵，反應(yīng)中不需Li/NH3還原步驟，而且28高油菜甾醇內(nèi)酯的活性與天然油菜甾醇內(nèi)酯幾乎相等，所以這也是目前運用最多的合成路線之一，浙江醫(yī)藥就采用這種方法。但是和麥角甾醇一樣，后面幾步反應(yīng)都需要柱層析純化，這也是導(dǎo)致成本上升而且無法大規(guī)模工業(yè)化的原因，一些公司只能靠實驗室規(guī)模人海戰(zhàn)術(shù)生產(chǎn)，人力資源成本也增大。另外還有一個技術(shù)上的問題需要解決，在雙羥化反應(yīng)中，如果參照麥角甾醇的方法（嗎啡啉N氧化物）最后得到以低效的22S,23S體為主的產(chǎn)物，而只有用奎尼定對氯苯甲酸酯催化的不對稱雙羥化技術(shù)才能得到以高效的22R,23R體為主的產(chǎn)物，但催化劑的價格昂貴，需要良好的回收技術(shù)才能降低生產(chǎn)成本。 （3）從豬去氧膽酸合成油菜甾醇內(nèi)酯上海有機化學(xué)研究所的周維善小組從1982年開始以我國豐產(chǎn)的豬去氧膽酸為原料，采用多種不同的合成方法，對油菜甾醇內(nèi)酯及其類似物的合成進行了系統(tǒng)的研究，合成了50多個化合物，其中有30多個是新化合物，它們絕大多數(shù)具有促進植物生長的調(diào)節(jié)的活性，該成果獲得了國家科技進步二等獎。雖然豬去氧膽酸價格便宜，而且在合成內(nèi)酯時可以得到高區(qū)域選擇性，但是由于牽涉到改造側(cè)鏈，整條合成路線成本很高，所以目前尚未見到工業(yè)化實例。（四）項目申請單位、主要合作申請單位及項目主要負(fù)責(zé)人的基本情況項目申請單位上海威敵生化（南昌）有限公司創(chuàng)建于1993年7月，位于南昌市進賢縣工業(yè)開發(fā)區(qū)威化路，是原化工部定點農(nóng)藥生產(chǎn)企業(yè)，中國農(nóng)藥協(xié)會會員單位，國家林業(yè)局森防總站病蟲害防治協(xié)作單位，法人代表吳中興。公司擁有國內(nèi)一流的全自動生產(chǎn)流水線、工程技術(shù)中心和質(zhì)檢中心，年農(nóng)藥制劑加工能力逾3000噸，是江西省農(nóng)藥制劑行業(yè)的骨干企業(yè)。工程技術(shù)中心配備了較為先進的有機合成儀器和設(shè)備，包括無水無氧化學(xué)反應(yīng)系統(tǒng)、柱層析分離設(shè)備、農(nóng)藥制劑配方研究CAD系統(tǒng)和農(nóng)藥生物測試工作站，工程技術(shù)中心還和國內(nèi)外著名的科研院所高校建立了廣泛的合作關(guān)系。工程技術(shù)中心和質(zhì)檢中心都配備了國內(nèi)一流的分析測試設(shè)備，包括毛細(xì)管氣相色譜分析儀、液相色譜和水分分析儀等等。在分析測試方面，公司還和江西師范大學(xué)、南昌大學(xué)、江西省分析測試中心以